本发明公开了一种用于鉴别丝羽乌骨鸡与黑凤鸡屠体的引物、试剂盒及应用,该引物包括:上游引物F:核苷酸序列如SEQ ID No.1所示;上游引物MF:核苷酸序列如SEQ ID No.2所示;下游引物R:核苷酸序列如SEQ ID No.3所示;本发明设计的用于鉴别丝羽乌骨鸡和黑凤鸡的引物,可以扩增出不同长度的丝羽乌骨鸡和黑凤鸡基因组DNA,通过凝胶电泳条带,可以非常容易的通过条带长短鉴别丝羽乌骨鸡和黑凤鸡,该方法可以100%准确的判断丝羽乌骨鸡和黑凤鸡屠体,可用于冰鲜鸡市场上丝羽乌骨鸡和黑凤鸡屠体的鉴别或筛选。
本发明公开了一种用于鉴别丝羽乌骨鸡和黑凤鸡屠体的引物、试剂盒及检测方法,所述引物包括:核苷酸序列如SEQ ID No.1所示的正向引物,核苷酸序列如SEQ ID No.2所示的反向引物,以及核苷酸序列如SEQ ID No.3所示的测序引物;本发明基于待测鸡种PCR产物序列碱基位点的多态性,通过基因测序方法判定其位点等位基因,当161bp处碱基为C、223bp处碱基为A、347bp处碱基为T、376bp处碱基为A、586bp处碱基为T和/或593bp处碱基为A时,判定为黑凤鸡鸡种,当其位点没有出现上述碱基时,则判定为丝羽乌骨鸡,该方法可以100%准确的判断丝羽乌骨鸡和黑凤鸡屠体。
本发明公开了一种可视化的鉴别丝羽乌骨鸡和黑凤鸡屠体的引物、试剂盒及检测方法,该引物包括:FIP:核苷酸序列如SEQ ID No.1所示;BIP:核苷酸序列如SEQ ID No.2所示;F3:核苷酸序列如SEQ ID No.3所示;B3:核苷酸序列如SEQ ID No.4所示;本发明设计的用于可视化鉴别丝羽乌骨鸡和黑凤鸡的引物,可以特异性PCR扩增丝羽乌骨鸡基因组DNA,而不能扩增黑凤鸡的基因组DNA,可以用于鉴别丝羽乌骨鸡和黑凤鸡屠体,反应完成后,若反应体系为天蓝色,则待测鸡种为丝羽乌骨鸡,若为淡紫色,则为黑凤鸡,该方法可以100%准确的判断丝羽乌骨鸡和黑凤鸡屠体。
本发明公开了一种用于检测泰和乌鸡鸡蛋的引物、试剂盒及检测方法,所述引物包括:如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3及SEQ ID NO:4所示。所述检测方法,包括以下步骤:提取待测鸡蛋基因组DNA,采用两步PCR方法对基因组DNA扩增,根据第二步PCR产物基因序列68bp处碱基进行基因分型,当该位置碱基为G时,为泰和乌鸡鸡蛋;当该位置基因为C时,为非泰和乌鸡鸡蛋。本发明所针对的变异位点为泰和乌鸡鸡蛋所特有的,利用该引物和检测方法可以100%准确的鉴定被检个体是否为泰和乌鸡鸡蛋,可排除不良商贩用非泰和乌鸡蛋或混有非泰和乌鸡鸡蛋的“泰和乌鸡鸡蛋”冒充泰和乌鸡蛋。