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[发明专利]一种生物矿化的CRISPR/Cas9 RNPs纳米颗粒、制备方法及其用于基因编辑-CN201910683467.3有效
发明人：韩鹤友;李烁钧;宋智勇 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2019-07-26 - 公布日： 2023-07-07 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明公开了一种生物矿化的CRISPR/Cas9 RNPs纳米颗粒、制备方法及其用于基因编辑，涉及基因工程领域，该方法包括：将1份浓度为60mM的可溶性磷酸盐加入向15～18份缓冲溶液中混合均匀，向混合液中加入4～5份待矿化的蛋白/质粒DNA混合均匀后，加入4～5份浓度为100mM的可溶性钙盐混合均匀并静置至溶液为不透明且没有出现肉眼可见的沉淀时，加入分散剂震荡混合均匀并离心、纯化；该纳米颗粒的粒径为100～200nm；该纳米颗粒用于基因编辑时，使细胞与矿化的CRISPR/Cas9 RNPs纳米颗粒接触。本发明用于基因编辑时，能够避免DNA残留和脱靶效应。
一种生物 crispr cas9 rnps 纳米颗粒制备方法及其用于基因编辑

[发明专利]一种用于成熟植物的基因编辑系统及基因编辑方法-CN202110095351.5有效
发明人：韩鹤友;李烁钧 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2021-01-25 - 公布日： 2023-05-16 - 主分类号： C12N15/89 文献下载
摘要：本发明提供了一种用于成熟植物的基因编辑系统及基因编辑方法，属于生物技术领域。所述植物基因编辑系统包括碳纳米管(CNT)载体和负载在所述CNT载体上的核酸分子，所述核酸分子为Cas9mRNA、sgRNA或CRISPR/Cas9IVTs。本发明采用Cas9mRNA进行基因编辑，由于分子量大大缩小，更易于被CNT载体转运进植物细胞，而且mRNA表达的场所位于细胞质中，无需进入细胞核，使得递送过程中少了核孔屏障，有助于提高基因编辑效率。此外，以Cas9mRNA进行基因编辑，导入的mRNA和sgRNA在细胞内发挥作用后不会再生，有利于降低脱靶效应和对植物基因组自身基因表达的影响，有效避免基因组整合，实现无外源基因插入且无转基因过程的基因编辑。
一种用于成熟植物基因编辑系统方法

[发明专利]一种用于治疗杜氏肌营养不良症的生物矿化纳米材料及基因编辑系统-CN202210086636.7在审
发明人：韩鹤友;杜墨青;李烁钧 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2022-01-25 - 公布日： 2022-05-17 - 主分类号： A61K48/00 文献下载
摘要：本发明公开一种用于治疗杜氏肌营养不良症的生物矿化纳米材料及基因编辑系统，该生物矿化纳米材料，按体积份数计包括如下组分：碳酸盐1份，可溶性钙盐2～5份，高分子包被材料0.5份，缓冲液18～20份；其中，所述碳酸盐包括但不限于Na2CO3和K2CO3；所述可溶性钙盐包括但不限于CaCl2；所述高分子包被材料包括但不限于PVP和PAA；所述缓冲液的pH=7～8，且其中不含碳酸根；该生物矿化纳米材料可以高效地搭载CRISPR/Cas9质粒，且可保护质粒在血清中免受降解，实现在细胞内及生物体内基因编辑。本发明基因编辑系统为采用所述生物矿化纳米材料为基础载体搭载CRISPR/Cas9质粒系统用于治疗杜氏肌营养不良症，具有广阔的应用前景及医疗价值。
一种用于治疗杜氏肌营养不良生物纳米材料基因编辑系统