本发明涉及植物分子生物学领域,具体涉及蜡梅CpCBL8基因及其编码的蛋白与应用。将从转录组测序获得的CpCBL8基因CDS序列全长设计特异引物,以蜡梅叶片cDNA为模板,利用PCR扩增技术以得到该目的片段,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,编码蛋白的氨基酸如SEQ ID NO.2所示。CpCBL8是盐和干旱胁迫响应的正向调节因子,是提高蜡梅耐盐和耐旱能力的潜在基因。蜡梅CpCBL8异源表达拟南芥可增强过表达拟南芥的耐盐和耐旱能力,但使其对低温胁迫不耐受,并具有抑制花发育的作用。
本发明提供蜡梅CpVIN3基因启动子及其应用。本发明通过染色体步移法从蜡梅基因组DNA中克隆获得CpVIN3 pro启动子,序列如SEQ ID No.1所示。将该启动子连接GUS报告基因,转化拟南芥,在转基因拟南芥的不同发育时期的各组织中均能检测到GUS活性,表明克隆到的蜡梅CpVIN3基因启动子序列CpVIN3 pro能够驱动GUS基因在不同发育时期及不同组织中组成型表达,在茎尖分生区、腋芽分生区、花芽分生区有较强的GUS活性,且伴随着花朵不断发育GUS活性加强。
本发明提供蜡梅CpFT基因及其在花期调控中的应用。本发明提供的蜡梅CpFT的基因序列如SEQ ID No.1所示。本发明首次克隆获得蜡梅CpFT基因,并通过转基因技术,在植物拟南芥中验证了该基因的功能。结果表明,蜡梅CpFT基因表达量越高,转基因拟南芥的莲座叶数越少,抽葶时间、第一朵花开放时间、第一个果荚形成时间越短。由于植株由营养生长向生殖生长转化的时间提前,导致营养生长时间缩短,莲座叶数减少,开花时间提前。表明蜡梅CpFT基因能够促进植株开花,同时对植株的营养生长具有抑制作用,并且该基因在低温打破蜡梅花蕾休眠导致花朵膨大、开放过程中起重要作用。
本发明提供蜡梅CpVIN3基因及其在花期调控中的应用。本发明提供的蜡梅CpVIN3的基因序列如SEQ ID No.1所示。本发明首次克隆获得蜡梅CpVIN3基因,并通过转基因技术,在植物拟南芥中验证了该基因的功能。通过将CpVIN3基因转入拟南芥,对其表型进行观察来初步验证该基因功能,对比转基因与野生型拟南芥表型发现,在4℃春化处理的条件下,转基因型拟南芥的开花时间比野生型拟南芥提前,莲座叶数量与野生型相比减少,说明该基因在春化作用诱导成花过程中调节植物营养生长向生殖生长的转化。
本发明提供蜡梅CpWOX13基因及其编码的蛋白及其在花期调控和提高生物量中的应用。本发明提供的蜡梅CpWOX13的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示,编码该蛋白的基因序列如SEQ ID No.2所示。本发明首次克隆获得蜡梅CpWOX13基因,并通过转基因技术,在植物(拟南芥)中验证了该基因的功能,转基因拟南芥与野生型相比,花期提前、株高变高、根系变长、侧根增多,为进一步改良观赏性植物,如蜡梅的花期调控及增加物种生物量提供可能。
本发明提供蜡梅CpSOC1基因及其编码的蛋白及其在花期调控中的应用。本发明提供的蜡梅CpSOC1蛋白,其为:1)由SEQ ID No.2所示的氨基酸组成的蛋白质;或2)在SEQ ID No.2所示的氨基酸序列中经取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且具有同等活性的由1)衍生的蛋白质。本发明还提供编码该蛋白的基因。本发明首次克隆获得蜡梅CpSOC1基因,并通过转基因技术,在植物(拟南芥)中验证了该基因的功能,结果表明,转基因拟南芥花期较对照提前,转基因拟南芥中表达量高的株系和表达量中等的株系花萼的宿存时间较对照显著延长,为植物的花期调控和观赏价值提升提供了可能。