本发明属于微生物技术领域,公开了一种人H组轮状病毒Real‑time PCR定量检测方法,Real‑time PCR定量检测的上游引物F包括SEQ ID No.1以及与SEQ ID No.1至少有70%同源性的序列;下游引物R包括SEQ ID No.2以及与SEQ ID No.2至少有70%同源性的序列;探针包括SEQ ID No.3以及与SEQ ID No.3至少有70%同源性的序列。Real‑time PCR循环条件为:48‑55℃反转录5‑8min,95℃PCR起始活化20s‑50s,95℃变性10‑20s,55‑65℃退火和延伸50‑70s,进行35‑45个循环,每个循环后检测荧光信号。本方法能快速有效地检测人H组轮状病毒感染。本发明的检测方法具有较高的检测灵敏度和特异性,操作简单,应用方便,为临床诊断、检验检疫等领域H组轮状病毒监测和H组轮状病毒感染疾病预防和控制提供了可行的技术支持。