本发明涉及一种构建瓜蒌薤白半夏汤的药物制剂的指纹图谱及测定指标性成分含量的方法,包括:取瓜蒌薤白半夏汤的药物制剂制备为供试品溶液;取黑麦草内酯、金圣草黄素、25S‑Timosaponin BⅡ、Macrostemonoside I、25R‑Timosaponin B II、PWVPG和AVGTNHLLSGETLD制备为第一混合对照品溶液;将供试品溶液和第一混合对照品溶液分别注入液相色谱‑质谱联用仪,根据液相色谱‑质谱联用法,获得药物制剂的指纹图谱,并建立UHPLC‑QQQ‑MS定量检测方法。通过本发明提供的瓜蒌薤白半夏汤的药物制剂的指纹图谱的构建方法以及指标性成分含量的测定的方法,全面完善了瓜蒌薤白半夏汤的药物制剂的评价标准,保证了瓜蒌薤白半夏汤的药物制剂临床使用的有效性。