本发明公开了抗多血清型极端耐药型鲍曼不动杆菌的单克隆抗体及其应用，涉及医药技术领域。一种鲍曼不动杆菌单克隆抗体，包括：选自A1)或A2)的重链可变区互补决定区和轻链可变区互补决定区；A1)氨基酸序列分别为SEQ ID NO.1～3所示的重链可变区CDR1～3，和氨基酸序列分别为SEQ ID NO.4～6所示的轻链可变区CDR1’～3’；A2)氨基酸序列分别为SEQ ID NO.9～11所示的重链可变区CDR1～3，和氨基酸序列分别为SEQ ID NO.12～14所示的轻链可变区CDR1’～3’。该单克隆抗体能够特异性识别多种血清型的鲍曼不动杆菌及其荚膜多糖，还能够改善鲍曼不动杆菌肺部感染。
本发明涉及生物工程技术领域，具体提供一种sgRNA库、敲低基因文库及敲低基因文库的构建方法和应用。所述sgRNA库包括SEQ ID NO.1～1740所示的序列。所述构建方法包括利用sgRNA库、酶切质粒、T4DNA连接酶、pir E.coli感受态细胞和MFD pirE.coli感受态细胞等构建MFD敲低质粒文库，以及利用Tn7转座系统，通过细菌接合将MFD敲低质粒文库转移至肺炎克雷伯菌中并插入基因组稳定遗传的步骤。本发明可以快速高效的构建大规模敲低基因文库，并且不受必需基因无法敲除、敲除缺失、插入突变等的限制，获得的敲低基因文库可以用于对肺炎克雷伯菌的潜在药物作用靶点进行筛选。
本发明具体提供一种试剂盒和乙型肝炎病毒YVDD耐药突变的数字PCR检测方法。所述试剂盒用于乙型肝炎病毒YVDD耐药突变的检测；试剂盒包括数字PCR检测试剂，数字PCR检测试剂包括SEQ ID NO.1所示核苷酸序列的上游引物、SEQ ID NO.2所示核苷酸序列的下游引物、SEQ ID NO.3所示核苷酸序列的型突变探针以及SEQ ID NO.4所示核苷酸序列的野生型探针；突变型探针和野生型探针的5’端均标记有荧光基团、3’端均标记有淬灭基团。本发明的试剂盒用于对乙型肝炎病毒进行数字PCR扩增时，可实现DNA低载量的扩增，且对YVDD耐药突变的检出限达到0.01％。
本发明涉及恶性疟原虫的多表位人工抗原及其用途。本发明设计出一种序列如SEQ ID No：1所示的多核苷酸以及序列如SEQ ID NO：2所示的多肽，所述多核苷酸和多肽作为人工抗原可用于制备疫苗，并可通过该抗原获得抗体，用于制备抗恶性疟原虫感染的免疫制剂和检测疟疾感染的试剂盒。本发明多表位人工抗原与现有技术的抗恶性疟原虫疫苗相比具有高免疫原性、抗原识别多样性，本发明的抗体对恶性疟原虫的体外生长具有很高的抑制效率。
