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[发明专利]一种杀蚊子幼虫的苏云金芽胞杆菌及其应用-CN201710690297.2有效
发明人： 方宣钧;张文飞 -专利权人：浙江翠溪农业开发有限公司
申请日： 2017-08-14 - 公布日： 2017-10-17 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明属卫生害虫的生物防治技术领域，主要是对“四害”之首蚊子的幼虫防治的材料和方法。公开了一种杀蚊子幼虫的苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)新菌株Bt S2160‑1，保藏编号为CGMCC No.13274。本发明涉及的菌株Bt S2160‑1对致倦库蚊和白纹伊蚊的幼虫具有极高的杀虫活性，相较于WHO推荐的Bt控蚊菌株Bti，Bt S2160‑1对于白纹伊蚊幼虫的活性更高。可以将本发明涉及的苏云金芽孢杆菌Bt S2160‑1制成杀虫剂，用于对致倦库蚊和白纹伊蚊的幼虫种群进行大规模的防治。从而作为Bti之外控蚊微生物菌剂的有力补充，甚至能够作为Bti的替代物来控制白纹伊蚊的种群，有利于降低由于长期使用Bti晶体蛋白控制蚊子种群而导致抗性产生的风险。
一种蚊子幼虫苏云金芽胞杆菌及其应用

[发明专利]对蚊子等双翅目昆虫有杀虫活性的Bt cry40Dal基因及其应用-CN200910119992.9无效
发明人： 方宣钧;张文飞;谢柳 -专利权人：海南海德热带农业资源研究所有限公司
申请日： 2009-03-03 - 公布日： 2010-09-08 - 主分类号： C12N15/32 文献下载
摘要：本发明公开了一种从苏云金杆芽胞杆菌野生菌株S2096-2中分离克隆的杀虫晶体蛋白基因cry40Da1，及其对蚊子等双翅目昆虫有杀虫活性和应用。本发明采用反向PCR克隆法从菌株S2096-2中克隆了cry40Da全长基因，该基因的开放阅读框(ORF)为1977bp，编码由659个氨基酸组成的蛋白质，被国际Bt杀虫晶体蛋白基因命名委员会命名为cry40Da1，GenBank登录序号为EU596478。利用工程菌以及提取的表达蛋白，对致倦库蚊(Culex quinquefasciatus)等双翅目昆虫表现出高效的杀虫活性。
蚊子双翅目昆虫杀虫活性 bt cry40dal 基因及其应用

[发明专利]对鳞翅目昆虫有杀虫活性的Bt crylAc22基因及其应用-CN200910119991.4无效
发明人： 方宣钧;张文飞;谢柳;刘卓明 -专利权人：海南海德热带农业资源研究所有限公司
申请日： 2009-03-03 - 公布日： 2009-09-16 - 主分类号： C12N15/32 文献下载
摘要：本发明涉及一种从苏云金杆芽孢杆菌(Bt)野生菌株W015-1中分离克隆的杀虫晶体蛋白基因cry1Ac22及其对鳞翅目昆虫具有高效杀虫活性和应用。本发明采用反向PCR克隆法从Bt菌株w015-1中克隆了Cry1Ac全长基因，该基因的开放阅读框(ORF)为3534bp，编码由1178个氨基酸组成的蛋白质，整个蛋白含有三个内毒素蛋白保守结构域，被国际Bt杀虫晶体蛋白基因命名委员会命名为Cry1Ac22，GenBank登录序号为EU282379。利用工程菌或纯化的表达蛋白，对鳞翅目昆虫小菜蛾(Plutella xylostella)具有高活力毒杀作用。
鳞翅目昆虫杀虫活性 bt crylac22 基因及其应用

[发明专利]连接豌豆营养生长特异因子基因序列和启动子的方法-CN01102128.4无效
发明人：朱玉贤;方宣钧 -专利权人：海南科丰转基因生物研究中心
申请日： 2001-01-22 - 公布日： 2002-05-08 - 主分类号： C12N15/29 文献下载
摘要：本发明提供一种编码控制植物生长发育的膜蛋白的基因的应用方法,并由此提供一条能够人为控制细胞衰老特性的易于操作的途径。通过把PPF1基因序列按正方向和反方向克隆到植物转化中间载体上,转化不同受体植物,筛选得到保留原来农艺性状、但发育进程显著改变的转基因植物,以获得可在生产上应用的新品种或新种质;通过构建体外表达PPF1基因序列的原核细胞或真核细胞载体,发酵并纯化PPF1蛋白,用于延缓人体表皮细胞或整个机体的衰老。
连接豌豆营养生长特异因子基因序列启动子方法

[发明专利]果蔬保鲜剂-CN89100490.4无效
发明人： 方宣钧;于梁;周丽丽 -专利权人： 方宣钧
申请日： 1989-01-31 - 公布日： 1990-08-15 - 主分类号： A23B7/153 文献下载
摘要：本发明是一种果蔬保鲜剂，是一种由防腐剂、助溶剂、粘结剂及植物激素组成的混合物，特别适于对蒜苔的长期贮藏保鲜；对苹果、梨、柑桔、西红柿也有明显的保鲜效果。蒜苔使用本保鲜剂处理后，有效抑制了由霉菌引起的腐烂，贮藏8个月以上，腐烂损耗率低于5％，且贮藏后的蒜苔，色泽正常，质地脆嫩，无异味。
保鲜剂