本发明提供一种增强型MMLV逆转录酶突变体，在野生型在MMLV逆转录酶氨基酸序列（如SEQ ID No.1序列所示）进行16个氨基酸位点的突变，氨基酸突变位点如下：A70K；S142P；E201N；D206R；G248D；L300K；A307K；G331P；I434R；S453K；Y522G；E531G；E574G；E596G；E610G；E645G。本发明的MMLV增强型MMLV逆转录酶突变体具有更强的逆转录能力，可用于微量RNA的有效逆转录，可应用在单细胞转录组建库及微量RNA病毒检测等领域。
本发明提供一种增强型逆转录酶，其特征为：在野生型逆转录酶mmlv的基础上，具有L22V；D145Q；C240G；T288E；L319A；L385K；T431Q；H595I；Q563A九个氨基酸位点的突变，其氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。并公开了其编码DNA、试剂盒以及其在RNA文库构建中的应用。本发明的含有增强型逆转录酶的快速RNA建库试剂盒相比常规RNA建库试剂盒省去了第二链cDNA合成步骤，缩短了建库时间，显著的降低了文库扩增的循环数，缩短了建库时间，3.5h可以完成500pg级别的RNA建库。
