本发明涉及α‑半乳糖苷酶技术领域,具体地,涉及一种α‑半乳糖苷酶LrgalA基因及以及含该基因的重组质粒和重组菌及其构建方法。所述α‑半乳糖苷酶LrgalA基因的核苷酸序列如SEQUENCE ID NO.3所示。在50℃条件下,所述α‑半乳糖苷酶的在pH4.5‑6.0之间都具有较高的活性,在pH为6.0时,即达到最高酶活,pH为6.5时还保留75%以上的酶活力;在pH为6.0条件下,α‑半乳糖苷酶活力在温度为65℃时达到最大值,到60‑70℃时酶活力含具有80%以上的相对酶活力,超过75℃检测,相对酶活力急剧下降。α‑半乳糖苷酶LrgalA具有较好的热稳定性,60℃处理0.5h后,残留约85%酶活力,该酶热稳定性较好。该酶和甘露聚糖酶协同能够有效的提高富含富含甘露聚糖原料的降解,提高还原糖的释放。
本发明公开了一种β‑甘露糖苷酶及其应用。本发明的β‑甘露糖苷酶的多肽的序列为:(1a)如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列;或者(2a)与SEQ ID NO:1具有至少75%序列同一性且具有与SEQ ID NO:1相同功能的β‑甘露糖苷酶的氨基酸序列。本发明还公开一种β‑甘露糖苷酶的表达载体及宿主细胞。本发明公开的β‑甘露糖苷酶在pH 3.5‑8以及温度30‑65℃具有较好的甘露糖苷酶酶活稳定性。将本发明的β‑甘露糖苷酶用于生产甘露糖时,甘露糖的产量能够达到7.1mg/mL,是不添加本发明β‑甘露糖苷酶的约6倍,具有潜在的工业应用价值。