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[发明专利]一种改良高温碱性蛋白酶AprThc的稳定性的方法及突变体-CN202311159462.3在审
发明人：黄火清;徐欣欣;罗会颖;田健;王苑;柏映国;张红莲;刘波;杨浩萌;于会民;姚斌 -专利权人：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
申请日： 2023-09-11 - 公布日： 2023-10-20 - 主分类号： C12N9/52 文献下载
摘要：本发明涉及基因工程领域，具体涉及一种改良高温碱性蛋白酶AprThc的稳定性的方法及突变体。本申请对碱性蛋白酶AprThc进行L362I、K211G和/或R173G突变。本申请对高温碱性蛋白酶AprThc进行分子改良，以提升其热稳定性和pH稳定性，对于提升蛋白酶的综合性能，降低蛋白酶的使用成本具有重要意义，为蛋白酶的性质改良提供了有效的技术方法。
一种改良高温碱性蛋白酶 aprthc 稳定性方法突变体

[发明专利]一种提高高温碱性蛋白酶AprThc的表达量的方法及突变体-CN202311159482.0在审
发明人：黄火清;徐欣欣;罗会颖;田健;王苑;柏映国;张红莲;刘波;杨浩萌;于会民;姚斌 -专利权人：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
申请日： 2023-09-11 - 公布日： 2023-10-17 - 主分类号： C12N9/52 文献下载
摘要：本发明涉及基因工程领域，具体涉及一种提高高温碱性蛋白酶AprThc的表达量的方法及突变体。本申请对高温碱性蛋白酶AprThc进行S105A、I151V、I297T或F366Y突变，对高温碱性蛋白酶AprThc进行表达量的提升，对降低蛋白酶的使用成本具有重要意义，为蛋白酶的性质改良提供了有效的技术方法。
一种提高高温碱性蛋白酶 aprthc 表达方法突变体

[发明专利]提高锰过氧化物酶的酶活力及过氧化氢耐受性的方法及突变体、编码基因和应用-CN202310706040.7有效
发明人：涂涛;刘晓青;王鑫源;罗会颖;姚斌;黄火清;柏映国;王亚茹;王苑;张杰;秦星;王晓璐;苏小运;张红莲;于会民 -专利权人：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
申请日： 2023-06-15 - 公布日： 2023-10-17 - 主分类号： C12N9/08 文献下载
摘要：本发明涉及农业生物技术领域，具体地涉及提高锰过氧化物酶的酶活力及过氧化氢耐受性的方法及突变体、编码基因和应用。本发明以来源于Moniliophthora roreri的锰过氧化物酶MrMnP作为母本，获得催化效率和H2O2耐受性提高的锰过氧化物酶MrMnP1。涉及到的氨基酸突变点为Glu148Gly。改造后的锰过氧化物酶MrMnP1酶活由10.43 U/mg提高到了13.83 U/mg，提高幅度为32.7%；在1.5 mM H2O2下，MrMnP1酶活由4.3 U/mg提高到了8.3 U/mg，提高幅度为92.7%；在1.5 mM H2O2下处理30 min后，MrMnP1剩余酶活由0.13 U/mg提高到了1.53 U/mg，提高幅度为1067%。
提高过氧化物活力过氧化氢耐受方法突变体编码基因应用

[发明专利]一种提高碱性蛋白酶热稳定性的方法及突变体ThAPT3-M6、M7、M8、M9和应用-CN202310199723.8在审
发明人：秦星;王宵;罗会颖;姚斌;王亚茹;黄火清;柏映国;苏小运;王苑;涂涛;张杰;王晓璐;张红莲;于会民 -专利权人：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
申请日： 2023-03-05 - 公布日： 2023-09-29 - 主分类号： C12N9/58 文献下载
摘要：发明涉及基因工程和蛋白质工程领域，具体涉及一种提高碱性蛋白酶热稳定性的方法及突变体ThAPT3‑M6、7、8、9和应用。本发明以碱性蛋白酶PA3为亲本，分别将loop18区域优化后的突变体ThAPT3‑M2、α8‑helix区域优化后的突变体ThAPT3‑M4和loop19区域优化后的突变体ThAPT3‑M5分别进行双区域叠加和三区域叠加，产生了四个突变体。突变体的Tm值提高了7.2℃、4.3℃、5.7℃、7.5℃，55℃下的t1/2分别提高到亲本的10.6倍、6.9倍、8.5倍、12.2倍，60℃下的t1/2分别提高到亲本的21.2倍、13.2倍、17.6倍、39.7倍。突变体M6、M7、M8和M9的比活力相较于亲本分别提高了23％、25％、20％和62％。因此，本发明提供的碱性蛋白酶突变体相较于野生型有着更好的热稳定性和催化活性，具有更好的工业应用前景。
一种提高碱性蛋白酶热稳定性方法突变体 thapt3 m6 m7 m8 m9 应用

[发明专利]一种筒形汽缸用便捷式拆装定位结构-CN202210229966.7有效
发明人：张昊然;王超;赵俊波;姚福锋;张红莲;刘殊一;丁化文;韦俊 -专利权人：中国船舶重工集团公司第七0三研究所
申请日： 2022-03-09 - 公布日： 2023-09-29 - 主分类号： F01D25/26 文献下载
摘要：本发明的目的在于提供一种筒形汽缸用便捷式拆装定位结构，包括套筒、主螺栓、副螺栓，套筒位于外汽缸里，主螺栓位于套筒里，套筒和主螺栓的内部均为贯通结构，副螺栓位于套筒和主螺栓里，套筒的外圈通过其螺纹与外汽缸的螺纹配合安装，套筒的内圈与主螺栓插入式配合，主螺栓尾部通过其螺纹孔与副螺栓连接。本发明筒形汽缸用便捷式拆装定位结构实现超临界汽轮机内外缸定位，防止松脱的同时方便拆装。该径向通孔可穿过内缸直达转子部位，转子相应位置设置了现场动平衡螺钉孔，可以实现现场动平衡，提高转子动平衡精度，减小振动，提高安全可靠性。拆装后该径向通孔可穿过内缸直达转子部位，可测量转子对中状态，方便安装和检修。
一种汽缸便捷拆装定位结构

[发明专利]一种毕赤酵母基因编辑单一质粒及改进的基因编辑方法-CN202310574853.5有效
发明人：黄火清;刘波;张红莲;徐欣欣;杨浩萌;王苑;涂涛;柏映国;张伟;罗会颖;姚斌 -专利权人：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
申请日： 2023-05-22 - 公布日： 2023-09-29 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明涉及基因编辑领域，具体涉及一种毕赤酵母基因编辑单一质粒及改进的基因编辑方法。根据本申请的技术方案，在构建基因编辑质粒时只需两轮PCR和一次无缝重组即可完成基因编辑质粒的构建，第一轮PCR用于扩增左右同源序列、第二轮PCR用于将左右同源序列进行融合。在删除基因时，只需转入单一的基因编辑质粒即可。完成基因编辑后，将阳性转化子接入含有鼠李糖的培养基中培养，通过鼠李糖诱导启动子调控毒性蛋白MazF表达，即可快速消除细胞中质粒pPICC02及其衍生体；相对于现有的在无选择压力下多次传代来消除质粒的策略，此法快速简洁。基于本申请的基因编辑质粒的基因编辑方法可实现基因快速高效编辑，有很好的应用潜力。
一种酵母基因编辑单一质粒改进方法

[发明专利]构建以果糖、甘油和CO2-CN202310334319.7在审
发明人：王晓璐;张杰;姚斌;罗会颖;黄火清;柏映国;苏小运;涂涛;张红莲;王苑;王亚茹;秦星;于会民 -专利权人：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
申请日： 2023-03-31 - 公布日： 2023-08-29 - 主分类号： C12N15/74 文献下载
摘要：本发明涉及农业生物技术领域，具体涉及构建以果糖、甘油和CO2为碳源生产N‑乙酰氨基葡萄糖的罗尔斯通氏菌工程菌的方法。本发明通过敲除罗尔斯通氏菌H16中的nagC、nagE、nagF、nagA和nagB基因来阻断N‑乙酰氨基葡萄糖进入细胞及其在细胞内的分解代谢途径。而后，通过异源表达秀丽隐杆线虫来源的葡萄糖胺‑6‑磷酸N‑乙酰基转移酶突变体基因(Cegna1*)构建了N‑乙酰氨基葡萄糖生产菌株。进一步通过阻断ED途径和聚羟基丁酸酯(PHB)合成途径，进一步提高了N‑乙酰氨基葡萄糖的产量。以果糖、甘油和CO2为唯一碳源进行发酵，N‑乙酰氨基葡萄糖的最高产量分别达到了199.9、566.3和75.3mg/L，不但能够实现生物活性物质的合成，同时也消除大气中的温室气体。
构建果糖甘油 co base sub

[发明专利]一种构建高产γ-氨基丁酸重组大肠杆菌的方法及生产γ-氨基丁酸的方法-CN202310337105.5在审
发明人：王晓璐;常放放;张杰;涂涛;姚斌;罗会颖;黄火清;柏映国;苏小运;张红莲;秦星;王苑;王亚茹;于会民 -专利权人：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
申请日： 2023-03-31 - 公布日： 2023-08-04 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明涉及农业生物技术领域，具体涉及一种构建高产γ‑氨基丁酸重组大肠杆菌的方法及生产γ‑氨基丁酸的方法。本发明通过在大肠杆菌中异源表达芽孢杆菌Z11来源的谷氨酸脱羧酶编码基因构建了一株能够进行γ‑氨基丁酸生产的大肠杆菌工程菌株。为消除大肠杆菌工程菌在转化底物生产γ‑氨基丁酸的过程中对外源昂贵辅因子吡哆醛5’‑磷酸的依赖，通过对基因来源、基因组合及表达调控方式进行筛选，在上述大肠杆菌工程菌株中构建了内源吡哆醛5’‑磷酸的合成途径。该途径的构建不但能够完全供给谷氨酸脱羧酶的辅酶需求，而且大幅提升了产物的转化效率。
一种构建高产氨基丁酸重组大肠杆菌方法生产

[发明专利]一种智能检重方法及系统-CN202010344975.1有效
发明人：李旭伟;蒋荟;王华伟;刘宗洋;郑婷;陈亚勋;朱槿;张红莲;祁苗苗;史晓磊;陈雄;贾琨;杨凯;谢斌;李源 -专利权人：中国铁道科学研究院集团有限公司电子计算技术研究所;北京经纬信息技术有限公司;中国铁道科学研究院集团有限公司
申请日： 2020-04-27 - 公布日： 2023-07-28 - 主分类号： G06Q10/087 文献下载
摘要：本发明实施例提供的智能检重方法及系统，主要包括：接收用户的检重申请，生成检重订单；获取被检对象的第一检重信息；对被检对象进行超重检测；若超重检测合格，则生成被检对象的电子磅单；生成临时出入库单；获取被检对象的第二检重信息；利用智能检重子系统对被检对象的检重信息进行一次检重校验；若检重校验的结果合格，则生成正式出入库单。本发明实施例提供的系统化、流程化、智能化、安全化的智能检重方法及系统，对现有物流园区运输生产和仓储服务等环节中的检重信息进行管理，解决生产环节中前后检重信息不一致及传统纸质检重单据无法实现信息化问题。通过引入检重校验方法可以有效规避因超重导致的运输风险，提高了物流园区的生产效率。
一种智能方法系统

[发明专利]一种最适温度、热稳定性和自降解抗性提高的碱性蛋白酶突变体ThAPT3-M10及应用-CN202310177937.5在审
发明人：罗会颖;王宵;秦星;王晓路;黄火清;涂涛;苏小运;张杰;柏映国;王苑;张红莲;田健;王亚茹;于会民;姚斌 -专利权人：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
申请日： 2023-02-28 - 公布日： 2023-06-27 - 主分类号： C12N9/50 文献下载
摘要：本发明涉及农业生物技术领域，具体涉及一种最适温度、热稳定性和自降解抗性提高的碱性蛋白酶突变体ThAPT3‑M10及应用。本发明以碱性蛋白酶ThAPT3‑M9为亲本，在表面loop区域的以定点突变的方法引入三个突变位点，突变体ThAPT3‑M10的最适温度从65℃提高到了70℃。Tm值与亲本相比提高了3℃，60℃下的t1/2从62.4min提高到了111.8min(≈1.8倍)。此外，ThAPT3‑M10在70℃下的自降解现象较亲本相比有了明显的改善。因此，本发明提供的碱性蛋白酶突变体相较于亲本有着更好的热稳定性和自降解抗性，具有更好的工业应用前景。
一种温度热稳定性降解抗性提高碱性蛋白酶突变体 thapt3 m10 应用

[发明专利]改良中性甘露聚糖酶PLM5A的稳定性的方法及突变体-CN202310378038.1在审
发明人：黄火清;徐欣欣;罗会颖;王苑;张红莲;杨浩萌;柏映国;涂涛;苏小运;姚斌;于会民 -专利权人：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
申请日： 2023-04-11 - 公布日： 2023-06-27 - 主分类号： C12N9/24 文献下载
摘要：本发明涉及农业生物技术领域，具体涉及改良中性甘露聚糖酶PLM5A稳定性的方法及突变体。本申请对中性甘露聚糖酶PLM5A进行K52V、T266D、W291S、A93LK205R、F63Y、D66Y、S283L、G288S和/或L292I突变。突变体的最适温度提高，热稳定性增加，具有更强的耐酸性。
改良中性甘露聚糖 plm5a 稳定性方法突变体

[实用新型]轻便型剪刀腿-CN202223284607.6有效
发明人：董建学;李爱民;刘聪;任城钊;晁越;刘友军;赵海光;郭冬雪;张红莲;于顺利 -专利权人：涿州市职业技术教育中心
申请日： 2022-12-07 - 公布日： 2023-06-27 - 主分类号： A63B23/04 文献下载
摘要：本实用新型提供了一种轻便型剪刀腿，包括：支座、支架、轴、转动盘、脚架托；支架设于支座上方，轴设置于支架和转动盘之间，脚架托设置于转动盘上，转动盘上设有限位杆，支架上设有限位槽，限位槽限制限位杆的转动范围。本实用新型使用轻质合金制成的剪刀腿，该剪刀腿设有限位机构，可以提高使用剪刀腿时的安全性。
轻便剪刀

[发明专利]具有高比活力的耐热α-淀粉酶突变体及其基因和应用-CN202310031075.5在审
发明人：涂涛;廖敏;罗会颖;姚斌;黄火清;柏映国;王苑;苏小运;王亚茹;张杰;秦星;王晓璐;张红莲;于会民 -专利权人：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
申请日： 2023-01-10 - 公布日： 2023-06-23 - 主分类号： C12N9/28 文献下载
摘要：本发明涉及农业生物技术领域，具体地，本发明涉及具有高比活力的耐热α‑淀粉酶突变体及其基因和应用。本发明通过将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的突变体α‑淀粉酶K152H/A166C/E168H(M1)进行A262D单点突变，从而获得所述α‑淀粉酶的突变体。本发明的α‑淀粉酶突变体与α‑淀粉酶M1相比，比活力大幅提升，且最适温度不变，为95℃。
具有活力耐热淀粉酶突变体及其基因应用

[实用新型]一种高精度呼吸阀低温测试装置-CN202320115012.3有效
发明人：吴翔;龙海涛;郁勇;方士豪;李绍利;姚东升;张红莲;蒋峰 -专利权人：江苏复森特种阀门有限公司
申请日： 2023-01-16 - 公布日： 2023-06-13 - 主分类号： G01M13/003 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种高精度呼吸阀低温测试装置，包括呼吸阀、低温箱和进气管，所述低温箱的内壁安装有呼吸阀，所述呼吸阀的一侧安装有进气管，所述呼吸阀的底部安装有数据采集模块，所述数据采集模块的一侧安装有温度传感器接管，所述数据采集模块的一侧安装有压力传感器接管。本实用新型通过操作电气控制柜，使压力通过压力泵组件传递到进气管向呼吸阀内进压，且数据采集模块中包含有压力传感器和温度传感器，由于数据采集模块距离呼吸阀很近，可以更精确的采集压力温度数据，通过温度传感器接管和压力传感器接管将采集到的数据传到电脑终端，最终生成呼吸法测试报告，进而保证测量的精确性。
一种高精度呼吸低温测试装置

[发明专利]一种提高碱性蛋白酶热稳定性的方法及突变体ThAPT3-M1、ThAPT3-M2和应用-CN202310199721.9在审
发明人：罗会颖;王宵;秦星;姚斌;王亚茹;黄火清;柏映国;苏小运;王苑;涂涛;张杰;王晓璐;张红莲;于会民 -专利权人：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
申请日： 2023-03-05 - 公布日： 2023-06-06 - 主分类号： C12N9/58 文献下载
摘要：本发明涉及基因工程和蛋白质工程领域。具体地，涉及到一种提高碱性蛋白酶热稳定性的方法及突变体ThAPT3‑M1、ThAPT3‑M2和应用。本发明以碱性蛋白酶PA3为亲本，通过区段替换和定点突变，从而获得了热稳定性显著提高的蛋白酶突变体。亲本PA3在60℃条件下处理10min和20min后，剩余酶活分别为1.9％和1.6％。突变体ThAPT3‑M1和ThAPT3‑M2在60℃下处理10min后，剩余酶活分别为62％和69％；突变体ThAPT3‑M1和ThAPT3‑M2在60℃下处理20min后，剩余酶活分别为39％和43％。此外，突变体ThAPT3‑M2的比活力提高了25％。因此，本发明提供的碱性蛋白酶突变体相较于野生型有着更好的热稳定性和催化活性，具有更好的工业应用前景。
一种提高碱性蛋白酶热稳定性方法突变体 thapt3 m1 m2 应用

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