本发明涉及一种人EGFR基因T790M位点检测的引物、探针、PCR反应液和试剂盒,属于分子生物学领域。本发明引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示;本发明探针包括针对人EGFR基因T790M位点的突变型探针和野生型探针,所述突变型探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示,所述野生型探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示;所述突变型探针和野生型探针的5’端标记有不同的荧光报告基团,3’端均标记有非荧光淬灭基团并连接有MGB修饰基团;所述突变型探针和野生型探针的至少一个碱基还进行锁核酸修饰。本发明引物扩增特异性和灵敏度度均较高;本发明探针为LNA修饰的TaqMan MGB探针,MGB可以将探针的Tm值提高10℃左右,且LNA修饰探针,提高了PCR反应中DNA分子的稳定性和亲和力,增加特异性和灵敏度。