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[发明专利]从外周血提取免疫细胞的方法-CN201511029699.5有效
发明人： 宫喜魁;李若鲲;马艳;马艳玲;郝丽敏 -专利权人：北京弘润天源基因生物技术有限公司
申请日： 2015-12-31 - 公布日： 2019-09-13 - 主分类号： C12N5/078 文献下载
摘要：本发明公开了一种从外周血提取免疫细胞的方法，属于生物技术领域。本发明包括如下步骤：外周血的预处理：将加入抗凝剂的外周血移入离心管中，750g，10min离心，吸取上层血浆备用，下层细胞加入等体积的PBS溶液，混匀获得细胞悬液；将含有海藻糖，超低粘度海藻酸钠和泛影酸钠的分离液加入到离心管中；将所述细胞悬液平铺到所述离心液上，在8‑25℃，500g‑800g，10～30min条件下离心，吸取白膜层细胞获得免疫细胞；将所述免疫细胞等体积加入到冻存液中混匀，分装于细胞冻存管中，将所述细胞冻存管放置于程序冻存盒中，先于‑80℃冷冻，然后转入液氮中冻存。本发明配方中的全部原料均符合静注级原料药标准。
外周血提取免疫细胞方法

[发明专利]分离外周血免疫细胞的分离方法-CN201511031155.2有效
发明人： 宫喜魁;李若鲲;马艳;马艳玲;郝丽敏 -专利权人：北京弘润天源基因生物技术有限公司
申请日： 2015-12-31 - 公布日： 2019-02-15 - 主分类号： C12N5/0781 文献下载
摘要：本发明公开了一种分离外周血免疫细胞的分离方法，属于生物技术领域。所述方法包括如下步骤：将抗凝剂处理过的外周血用生理盐水或无血清培养基稀释获得细胞悬液；将含有葡聚糖、磷脂、海藻糖和氨基酸的分离液加入离心管中，分离液的体积不大于离心管体积的1/2；将细胞悬液铺在所述分离液上，在8‑25℃，200g‑800g，10～30min条件下离心，吸取白膜层细胞。本发明使用配制的分离液时，操作者可以直接将细胞悬浮液铺设在分离液上，铺设过程无须过多考虑液面的破坏，对操作者的操作经验要求较低；本发明配方中的全部原料均符合静注级原料药标准，原料不确定性小，安全性高，而且分离得到的免疫细胞并具有较好的杀肿瘤活性。
分离外周血免疫细胞方法

[发明专利]免疫细胞的储存及运输方法-CN201511031752.5有效
发明人： 宫喜魁;李若鲲;马艳;马艳玲;郝丽敏 -专利权人：北京弘润天源基因生物技术有限公司
申请日： 2015-12-31 - 公布日： 2019-01-22 - 主分类号： C12N5/0781 文献下载
摘要：本发明公开了一种免疫细胞的储存及运输方法，属于生物技术领域。本发明包括如下步骤：采集外周血或脐带血，稀释，获得细胞悬液；将含有海藻糖，超低粘度海藻酸钠和氨基酸的分离液加入到离心管中，细胞悬液细胞悬液平铺到分离液上，离心，吸取上层血浆备用，吸取白膜层细胞获得淋巴细胞；将所述淋巴细胞与冻存液等比例混合分装于细胞冻存管中；冻存；复苏后将液态细胞悬液移至含有4～8℃生理盐水的离心管中，混匀，离心；在淋巴细胞中加入含有2％海藻糖的保存液中；移入无菌管或转运袋中转运。本发明从分离到冻存再到保存运输均选用符合静注级原料药标准的原料，原料不确定性小，安全性高。
免疫细胞储存运输方法

[发明专利]骨髓干细胞的保存及运输方法-CN201511032235.X有效
发明人： 宫喜魁;李若鲲;马艳;马艳玲;郝丽敏 -专利权人：北京弘润天源基因生物技术有限公司
申请日： 2015-12-31 - 公布日： 2019-01-22 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明公开了一种骨髓干细胞的保存及运输方法，属于生物技术领域。本发明包括如下步骤：按临床常规取得红骨髓；将骨髓加入5倍体积的PBS，离心，获骨髓细胞；在骨髓细胞中加入PBS轻匀制得悬液；将含海藻糖的分离液加入到离心管中，悬液平铺到分离液上，离心，吸取白膜层细胞；将细胞与冻存液等比例混合分装于冻存管中；先‑80℃冷冻，后转入液氮中冻存；从液氮中取出冻存管立即投入恒温水浴箱中轻轻晃动复融；将复融的细胞悬液移至含有3～7℃生理盐水的离心管中，混匀，离心收集骨髓干细胞；在骨髓干细胞中加入含有0.5％海藻糖的保存液中，使用3～7℃恒温保温箱在24小时内运输至使用单位。本发明使细胞在运输过程中保持活性。
骨髓干细胞保存运输方法

[发明专利]分离淋巴细胞的分离方法-CN201511031167.5有效
发明人： 宫喜魁;李若鲲;马艳;马艳玲;郝丽敏 -专利权人：北京弘润天源基因生物技术有限公司
申请日： 2015-12-31 - 公布日： 2019-01-22 - 主分类号： C12N5/0781 文献下载
摘要：本发明公开了一种分离淋巴细胞的分离方法，属于生物技术领域。本发明包括如下步骤：将符合药用标准的右旋糖酐3～5重量份，海藻糖2～4重量份，超低粘度海藻酸钠0.3～0.8重量份，泛影葡胺1～3重量份，聚二烯丙基二甲基氯化铵0.1～0.15重量份充分溶解于灭菌水配制成100重量份的生理溶液，再经过滤膜过滤除菌得到分离液；将所述分离液加入离心管中，所述分离液的体积不大于离心管体积的1/2；将抗凝剂处理过的样品经平衡盐溶液或无血清培养基稀释后铺在所述分离液上，在8‑25℃，200g‑800g，10～30min条件下离心；所述样品的来源为外周血、脐带血或骨髓。本发明分离得到的淋巴细胞具有较好的杀肿瘤活性。
分离淋巴细胞方法

[发明专利]用于分离淋巴细胞的组合物及其分离液-CN201511029713.1有效
发明人： 宫喜魁;李若鲲;马艳;马艳玲;郝丽敏 -专利权人：北京弘润天源基因生物技术有限公司
申请日： 2015-12-31 - 公布日： 2019-01-22 - 主分类号： C12N5/0781 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于分离淋巴细胞的组合物及其分离液，属于生物技术领域。本发明的用于分离单个细胞的组合物，由以下原料按重量份组成：右旋糖酐1～4份，海藻糖4～6份，超低粘度海藻酸钠0.3～1.5份，泛影葡胺4～7份，L‑甲硫氨酸0.003‑0.006份,L‑缬氨酸0.008‑0.011份和L‑亮氨酸0.01‑0.012份。本发明配方中的全部原料均符合静注级原料药标准，原料不确定性小，安全性高，并且分离后的淋巴细胞具有较好的杀肿瘤活性。
分离淋巴细胞分离液淋巴细胞生物技术领域不确定性超低粘度单个细胞泛影葡胺海藻酸钠甲硫氨酸右旋糖酐肿瘤活性海藻糖亮氨酸原料药重量份缬氨酸配方

[发明专利]淋巴细胞的冻存方法-CN201511032072.5有效
发明人： 宫喜魁;李若鲲;马艳;马艳玲;郝丽敏 -专利权人：北京弘润天源生物技术股份有限公司
申请日： 2015-12-31 - 公布日： 2017-10-31 - 主分类号： A01N1/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种淋巴细胞的冻存方法，属于生物技术领域。本发明的冻存方法包括如下步骤将含有海藻糖，超低粘度海藻酸钠和聚二烯丙基二甲基氯化铵的分离液加入到离心管中；将抗凝剂处理过的外周血或脐带血中加入等体积的生理盐水或无血清培养基稀释后平铺在所述分离液上，离心，吸取上层血浆备用，吸取白膜层细胞获得淋巴细胞；配制冻存液将12％DMSO+10％右旋糖酐+18％所述上层血浆+1％海藻糖+59％注射用生理盐水混合作为冻存液；将所述淋巴细胞与所述冻存液按0.9～1.11的比例混匀，分装于细胞冻存管中。本发明的分离液的组分与冻存液组分部分接近，减少外源物质对细胞的伤害，提高安全性。
淋巴细胞方法

[实用新型]一种高密封性的细胞培养瓶-CN201621432955.5有效
发明人： 宫喜魁;沈丽;王培培 -专利权人：北京弘润天源生物技术股份有限公司
申请日： 2016-12-27 - 公布日： 2017-10-27 - 主分类号： C12M3/00 文献下载
摘要：本实用新型涉及细胞培养技术领域，且公开了一种高密封性的细胞培养瓶，包括瓶体，瓶体的内部固定连接有隔断架，隔断架的底端固定连接有位于瓶体底端的固定台，瓶体顶部的一端固定连接有物料口，物料口的顶端固定安装有第一密封圈，第一密封圈的内部固定连接有管口，管口的外侧设置有螺纹，管口的外部设置有管帽，管帽的外侧设置有防滑层。该高密封性的细胞培养瓶，通过设置注射口、第一密封圈以及第二密封圈，注射器通过橡胶层内的注射缝对细胞培养瓶进行加液，培养液在相对密封的环境中完成加液的过程，同时，第一密封圈和第二密封圈保证了物料口的密封性，达到了该高密封性的细胞培养瓶的密封效果。
一种密封性细胞培养

[实用新型]一种全方位调节式细胞培养用盖玻片夹具-CN201621453910.6有效
发明人： 宫喜魁;沈丽;王培培 -专利权人：北京弘润天源生物技术股份有限公司
申请日： 2016-12-29 - 公布日： 2017-07-11 - 主分类号： C12M1/00 文献下载
摘要：本实用新型涉及细胞培养用品技术领域，且公开了一种全方位调节式细胞培养用盖玻片夹具，包括第一固定架和第二固定架，所述第一固定架和第二固定架之间通过第一拉伸弹簧弹性连接，第一固定架的内侧通过开设的第一滑槽活动连接有第一夹块，第一夹块的上表面通过第一压缩弹簧与第一固定架内腔的顶部弹性连接，第二固定架的内侧通过开设的第二滑槽活动连接有第二夹块，第二夹块的上表面通过第二压缩弹簧与第二固定架内腔的顶部弹性连接，第一夹块和第二夹块之间通过第二拉伸弹簧弹性连接。本实用新型具备全方位的调节便于固定不同的盖玻片，构思巧妙，设计合理，结构简单，实用性强以及成本低廉等优点。
一种全方位调节细胞培养盖玻片夹具

[实用新型]一种用于细胞培养的细胞器皿-CN201621410995.X有效
发明人： 宫喜魁;沈丽;王培培 -专利权人：北京弘润天源生物技术股份有限公司
申请日： 2016-12-27 - 公布日： 2017-07-11 - 主分类号： C12M3/00 文献下载
摘要：本实用新型涉及细胞培养设备技术领域，且公开了一种用于细胞培养的细胞器皿，包括底座，底座的顶端活动套装有盖子，底座的内侧固定安装有隔板，底座的上表面固定安装有磁铁块，磁铁块顶端的中部固定安装有套杆，底座的中部固定安装有定位板，定位板的外侧与隔板的内侧固定连接，定位板上活动套装有试管，试管延伸至定位板顶端的外部固定套装有密封塞。该用于细胞培养的细胞器皿，通过密封塞使得个体试管内的细胞能个体保存进行培养，再通过标记块可以对每个试管内的细胞进行标记，方便对比和存放，通过隔板可以有效的观察每个试管内的细胞情况，打开盖子时不会使得其他试管内的细胞被感染，增加了细胞器皿的实用性。
一种用于细胞培养细胞器皿

[实用新型]一种防污染的细胞培养皿-CN201621430204.X有效
发明人： 宫喜魁;沈丽;王培培 -专利权人：北京弘润天源生物技术股份有限公司
申请日： 2016-12-27 - 公布日： 2017-07-11 - 主分类号： C12M3/00 文献下载
摘要：本实用新型涉及细胞培养技术领域，且公开了一种防污染的细胞培养皿，包括皿体和皿盖，皿体的顶部与皿盖活动链接，皿盖的顶部设有通风孔，通风孔的一侧连接有封孔盖，通风孔的下方安装有灭菌网，皿盖的内壁设有内螺纹，皿体顶部的外侧设有外螺纹，皿体的底部与底座固定连接。该防污染的细胞培养皿，通过设置灭菌网，可以在使用细胞培养皿时防止细胞被污染，通过设置通风孔，可以使氧气或二氧化碳进入细胞培养皿，通过设置封孔盖，可以更加方便的控制氧气或二氧化碳的进入，通过设置内螺纹和外螺纹，可以使皿盖和皿体能够更紧密的闭合，从而可以更有效的防止细胞培养皿内的细胞受到污染，通过设置底座，可以有效的减轻细胞培养皿受到的震动。
一种污染细胞培养皿

[实用新型]一种密封性能高的细胞培养箱-CN201621444006.9有效
发明人： 宫喜魁;沈丽;王培培 -专利权人：北京弘润天源生物技术股份有限公司
申请日： 2016-12-27 - 公布日： 2017-07-11 - 主分类号： C12M3/00 文献下载
摘要：本实用新型涉及细胞培养技术领域，且公开了一种密封性能高的细胞培养箱，包括箱体，箱体的底部安装有固定板，且固定板的底部固定连接有底座，底座的内腔固定连接有缓冲柱，箱体内腔的底部安装有吸水层，吸水层的顶部与底板固定连接，底板的内腔设有入气口，底板顶部的两侧均固定连接有器皿，器皿的内腔安装有培养板，培养板的内腔设有培养腔，且培养腔的内腔设有培养孔，器皿的顶部与连接杆固定连接。该密封性能高的细胞培养箱，通过器皿、培养板、培养腔和培养孔的配合使用，可以在对细胞进行培养时，将需要培养的细胞放到培养孔中，而且培养板可以卡接在器皿中，可以实现对细胞培养所处环境的密封效果。
一种密封性能细胞培养

[发明专利]一种检测EGFRvⅢ的免疫组化抗体试剂及检测方法-CN201710010615.6在审
发明人：沈丽;王培培;马艳玲;宫喜魁 -专利权人：北京弘润天源生物技术股份有限公司
申请日： 2017-01-06 - 公布日： 2017-03-15 - 主分类号： G01N33/574 文献下载
摘要：本发明公开了一种检测EGFRvⅢ的免疫组化抗体试剂，具有特异性强、敏感度高等优点，包括抗EGFR突变体Ⅲ单克隆抗体和抗体稀释液；所述抗体稀释液由博士德生物技术有限公司生产，其商品货号为AR1016。本发明还公开了一种检测EGFRvⅢ的免疫组化方法利用检测EGFRvⅢ的免疫组化抗体试剂，通过免疫组化方法检测待检测标本组织中的EGFRvⅢ的表达情况，检测结果可以作为临床医生的诊断依据之一，为临床肿瘤的诊断起预后判断的作用，帮助临床肿瘤的诊断、分类、预后判断以及疗效评估。
一种检测 egfrv 免疫抗体试剂方法

[实用新型]医用保温箱-CN201520869581.2有效
发明人： 宫喜魁;李若鲲;马艳;马艳玲;郝丽敏 -专利权人：北京弘润天源生物技术股份有限公司
申请日： 2015-11-03 - 公布日： 2016-05-11 - 主分类号： B65D25/14 文献下载
摘要：本实用新型有关于一种医用保温箱，其包括：外箱体、内箱体、上盖、保温袋、以及温度计，所述外箱体由发泡聚苯乙烯制成，所述内箱体设置于外箱体的内部，所述内箱体的箱体壁设有多个插槽，该插槽内部放置冰块，所述上盖设置于外箱体和内箱体的上部开口处，所述保温袋真空吸附在所述外箱体及上盖的外表面，所述温度计设置于所述外箱体的外壁。本实用新型可以使体外诊断试剂盒在运输过程中持久的保持低温，并且蓄冷效果均一。
医用保温箱

[发明专利]从骨髓中提取免疫细胞的方法-CN201511032075.9在审
发明人： 宫喜魁;李若鲲;马艳;马艳玲;郝丽敏 -专利权人：北京弘润天源生物技术股份有限公司
申请日： 2015-12-31 - 公布日： 2016-04-27 - 主分类号： C12N5/078 文献下载
摘要：本发明公开了一种从骨髓中提取免疫细胞的方法，属于生物技术领域。本发明包括如下步骤：采集人骨髓，用含15％胎牛血清的α-MEM培养液5倍稀释离心，弃上清及脂肪层，获骨髓细胞；将外周血移入离心管中，离心，吸取上层血浆备用，下层细胞用于分离外周血淋巴细胞；骨髓细胞中加入含15％上层血浆的α-MEM培养液制成细胞悬液；将含有海藻糖，超低粘度海藻酸钠和泛影酸钠的分离液加入到离心管中；将细胞悬液平铺到所述离心液上，离心，吸取白膜层细胞获得免疫细胞；将免疫细胞等体积加入到冻存液中混匀，分装于细胞冻存管中进行冻存。本发明配方中的全部原料均符合静注级原料药标准，原料不确定性小。
骨髓提取免疫细胞方法

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