本申请提供了一种宽谱金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶及应用,属于生物技术领域;该裂解酶氨基酸序列如SEQ ID No.1所示,核苷酸序列如SEQ ID No.2所示;该裂解酶对5株标准金黄色葡萄球菌菌株和13株MRSA均具有较高的裂解活性,具有广谱性;其最小抑菌浓度MIC为4μg/mL,杀菌动力学试验显示20 min内,裂解酶LysJS03使细菌浊度下降约74.8%,具有较强的裂解活性;pH在4.0到10.0之间裂解活性达到80%以上,在4℃~50℃温度范围内均有裂解活性,结果表明裂解酶LysJS03具有较高的环境耐受性。
一种具有体外裂解活性的沙门氏菌宽谱裂解酶及其应用。本发明属于生物技术领域,具体涉及一种针对沙门氏菌的宽谱裂解酶及其抗菌应用;该裂解酶命名为LysMD19,其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示,核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示;该裂解酶能够在没有ETDA等细胞通透试剂的条件下直接在体外高效裂解沙门氏菌,并且对肠炎沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、鸡白痢沙门氏菌等多种不同血清型的沙门氏菌均具有裂解作用,具有较好的温度稳定性及较强的耐酸碱能力,既可以用于防治沙门氏菌的感染,也可以用于对源头养殖场、加工、包装、运输到市场售卖等多个环节中沙门氏菌的杀灭,确保“从农场到餐桌”的安全,具有良好的应用前景和价值。
本发明公开了一种抗菌肽,名为GS18,其序列为GLLRRLRKKIGEIFKKLS,SEQ ID NO:1。所述抗菌肽为人工设计合成的活性多肽,GS18包含18个氨基酸残基,分子量为2155.74Da,等电点为11.74,净电荷为+6。所述的抗菌肽的用途,用于制备治疗革兰氏阴性菌感染的抗菌药物。本发明的抗菌肽GS18为α螺旋阳离子多肽,具有肽链长度较短、稳定性较好、人工合成方便、净电荷高、杀菌作用强等优点。
本发明公开一株能裂解NDM‑1阳性肺炎克雷伯氏菌临床分离菌的强裂解性噬菌体及其作为生物制剂在防治NDM‑1肺炎克雷伯氏菌引发的感染和污染中的应用,该噬菌体保藏号为CCTCC M 2015760,具有正二十面体的头部和可伸缩的尾部,属于肌尾科双链DNA噬菌体;该噬菌体具有较强的杀灭活性和较宽的噬菌裂解谱,可用于制备防治由NDM‑1阳性肺炎克雷伯氏菌引起的细菌感染的药物,以及杀灭养殖环境和医疗环境中的NDM‑1阳性肺炎克雷伯氏菌。
本发明提供了一种穿透肽及其在体外敲除金黄色葡萄球菌黏附因子的应用,即首先依据金黄色葡萄球菌黏附因子sgRNA识别区的靶点序列构建CRISPR‑Cas9系统,靶点序列的碱基序列如SEQ NO.1所示,所构建CRISPR‑Cas9系统中,是将T7启动子插入sgRNA转录起始位点前,构建Cas9蛋白的原核表达载体,以T7启动子进行调控,接着利用氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的细胞穿透肽CPP5L将金黄色葡萄球菌黏附因子敲除载体pCas9‑FnBP带入微生物细胞内,以实现在体外敲除金黄色葡萄球菌黏附因子。
本发明公开一种葡萄球菌的宽谱噬菌体嵌合裂解酶,其核苷酸序列如Seq ID NO.1所示,氨基酸序列如Seq ID NO.2所示;该裂解酶用于防治多种葡萄球菌,该抗葡萄球菌的宽谱噬菌体嵌合裂解酶可以单独或复配使用,或制备成酶制剂,用以防治由葡萄球菌引起的各种污染和感染,特别是奶牛养殖场中由葡萄球菌引起的奶牛乳房炎感染,具有极高的防治效果,且安全无毒副作用。
本发明涉及属于生物工程领域,特别涉及一种大肠杆菌裂解酶及其制备方法及其作为抗感染药物的应用;一种大肠杆菌裂解酶,其特征在于其氨基酸序列为Seq ID NO.2。利用生物工程技术开发能够高效杀灭大肠杆菌的酶制剂,该制剂可以单独或复配使用,能够特异性的灭活多种大肠杆菌,为目前防控奶牛乳房炎中的大肠杆菌提供一种安全、无毒副作用的酶制剂来源。