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[发明专利]一种猪流行性腹泻病毒抗体sIgA的ELISA检测方法-CN201710375327.0有效
发明人：贾爱卿;邓胜朝;包银莉;冯晓声;王贵平 -专利权人：广东海大畜牧兽医研究院有限公司;四川海林格生物制药有限公司
申请日： 2017-05-24 - 公布日： 2019-08-06 - 主分类号： G01N33/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒抗体sIgA的ELISA检测方法，包括以下步骤：加入抗原：将抗原PEDV S1蛋白和包被液加入酶标板，进行包被；封闭：加入含BSA的PBS作为封闭液进行封闭，然后弃去封闭液；加样：加入待检样品；加入酶标抗体：加入酶标抗体HRP‑兔抗猪sIgA，反应后用PBST洗去未结合的酶标抗体；显色和测定：加入显色剂，避光显色后加入终止液，然后测定OD_450nm；该检测方法特异性及重复性好，能够对PEDV抗体sIgA给出准确的检测结果，也有利于PEDV疫苗免疫效果的评价。
酶标抗体流行性腹泻病毒抗体封闭液抗原显色种猪疫苗免疫效果待检样品检测结果包被液酶标板兔抗猪显色剂终止液封闭包被避光加样抗体检测

[发明专利]一种ELISA待检样品的稀释液、其制备方法及其应用-CN201710374058.6有效
发明人：贾爱卿;邓胜朝;包银莉;冯晓声;王贵平 -专利权人：广东海大畜牧兽医研究院有限公司;四川海林格生物制药有限公司
申请日： 2017-05-24 - 公布日： 2019-07-05 - 主分类号： G01N33/531 文献下载
摘要：本发明公开了一种ELISA待检样品的稀释液，包括以下成分：BSA 5‑35g/L；NaN₃ 0.1‑0.5g/L；硫酸铵3.5‑10.5g/L；KCl 0.11‑0.27g/L；K₂HPO₄ 0.87‑1.75g/L；NaH₂PO₄ 0.24‑0.72g/L；NaCl 5.8‑15g/L；胃蛋白酶50‑300g/L；木瓜蛋白酶80‑350g/L；制备方法为：将原料溶解于溶剂中，定容后即得；其应用为先采用稀释液稀释ELISA待检样品，然后再将经稀释的样品进行ELISA检测；该稀释液可降低IgG的干扰，确保检测结果的准确性。
一种 elisa 样品稀释液制备方法及其应用

[发明专利]一种具有交叉保护力的血清5型副猪嗜血杆菌及其应用-CN201710439942.3有效
发明人：贾爱卿;王贵平;包银莉;邓胜朝 -专利权人：广东海大畜牧兽医研究院有限公司;四川海林格生物制药有限公司
申请日： 2017-06-12 - 公布日： 2018-10-12 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明公开了一种具有交叉保护力的血清5型副猪嗜血杆菌及其应用。该副猪嗜血杆菌的保藏编号为GDMCC No：60189，记名为副猪嗜血杆菌GDMZ株，毒力较血清5型参考菌株Nagasaki株强，并具有较好的交叉保护力，能保护目前国内主要的流行血清型1、4、5、6、12、13型副猪嗜血杆菌菌株的侵害。利用本发明筛选出的副猪嗜血杆菌GDMZ制备副猪嗜血杆菌疫苗，工艺简单，仅需单独培养副猪嗜血杆菌GDMZ，经常规处理即可制备得到副猪嗜血杆菌疫苗。本发明技术工艺简单，可以完全克服目前市场上多价副猪嗜血杆菌疫苗生产中工艺繁琐的缺陷。
一种具有交叉保护血清型副猪嗜血杆菌及其应用

[发明专利]一种免疫原性强的血清2型猪链球菌及其应用-CN201710439505.1有效
发明人：贾爱卿;王贵平;包银莉;邓胜朝 -专利权人：广东海大畜牧兽医研究院有限公司;四川海林格生物制药有限公司
申请日： 2017-06-12 - 公布日： 2018-07-06 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明公开了一种免疫原性强的血清2型猪链球菌及其应用。该猪链球菌的保藏编号为GDMCC No：60188，记名为猪链球菌GDZQ株，其毒力强，5×108CFU即可引起全部试验仔猪死亡，其免疫原性较强，抗原含量1×108CFU即可对仔猪形成100％免疫保护，优于目前市面上的同类产品；此外猪链球菌GDZQ具有较好的交叉保护力，能保护猪免受目前国内主要的流行血清2、7、9型猪链球菌的侵害。利用本发明筛选出的猪链球菌GDZQ制备猪链球菌疫苗，工艺简单，仅需单独培养猪链球菌GDZQ，经常规处理即可制备得到猪链球菌疫苗。本发明技术工艺简单，成本低廉，可以克服目前市场上多价猪链球菌疫苗生产中工艺繁琐的缺陷。
猪链球菌猪链球菌疫苗免疫原性血清2型仔猪制备交叉保护力保藏单独培养技术工艺免疫保护抗原血清毒力应用筛选试验死亡生产

[发明专利]一种提高副猪嗜血杆菌体外培养的促生长剂-CN201710450315.X有效
发明人：贾爱卿;王贵平;邓胜朝;包银莉 -专利权人：广东海大畜牧兽医研究院有限公司;四川海林格生物制药有限公司
申请日： 2017-06-15 - 公布日： 2018-07-06 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明公开了一种提高副猪嗜血杆菌体外培养的促生长剂。该促生长剂由叶酸、KCl、NaH2PO4、NaCl、酵母提取物、NAD、山梨醇、土豆汁和水组成。本发明发现的促生长剂能够显著提高副猪嗜血杆菌本身生长的浓度，无需浓缩菌液便能生产出理想免疫效果的副猪嗜血杆菌灭活疫苗，免疫效价高，免疫效果好这为疫苗厂节约大量的生产成本、可降低疫苗的价格，具有广泛的应用价值。
副猪嗜血杆菌促生长剂免疫效果体外培养疫苗酵母提取物免疫效价灭活疫苗浓缩菌液山梨醇土豆汁叶酸生产成本节约生长应用发现生产

[发明专利]一种提高副猪嗜血杆菌疫苗免疫效力的免疫增强剂-CN201710453777.7有效
发明人：贾爱卿;王贵平;邓胜朝;包银莉 -专利权人：广东海大畜牧兽医研究院有限公司;四川海林格生物制药有限公司
申请日： 2017-06-15 - 公布日： 2018-06-19 - 主分类号： A61K39/39 文献下载
摘要：本发明公开了一种提高副猪嗜血杆菌疫苗免疫效力的免疫增强剂。该免疫增强剂含有6‑PGD，IL‑8，IL‑6，葡萄糖和明胶，能够显著提高副猪嗜血杆菌疫苗免疫效果。本发明还发现6‑PGD、IL‑6、IL‑8同时使用时对副猪嗜血杆菌疫苗免疫效果产生了协同作用，其所发挥的促免疫效果高于6‑PGD、IL‑6、IL‑8分开使用产生的促进效果的和。本发明的免疫增强剂有利于促进副猪嗜血杆菌疫苗的广泛有效地应用，具有很好的应前景。 1
副猪嗜血杆菌免疫增强剂疫苗免疫效果疫苗免疫葡萄糖明胶分开使用免疫效果有效地疫苗应用发现

[发明专利]一种猪流行性腹泻病毒的培养方法-CN201510052418.1有效
发明人：冯晓声;贾爱卿;王贵平 -专利权人：广东海大畜牧兽医研究院有限公司;四川海林格生物制药有限公司
申请日： 2015-01-31 - 公布日： 2017-06-30 - 主分类号： C12N7/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒的培养方法，包括以下步骤(1)DMEM培养基的配制(2)在DMEM培养基中加入1‑8％的胎牛血清，进行单层细胞的培养；(3)将形成有单层细胞的培养容器内的DMEM培养基弃去，并洗液洗涤；(4)弃去洗液，向形成有单层细胞的培养容器内加入猪胰蛋白酶、细胞亲和剂和DMEM培养基；(5)将步骤(4)中的单层细胞放置细胞培养箱中静置培养1分钟‑30分钟，静置培养后取出并迅速接种猪流行性腹泻病毒，混合均匀后放置于细胞培养箱进行培养，收集猪流行性腹泻病毒液。本培养方法主要是在培养过程中通过改变病毒与细胞间的微关系，增加病毒与细胞间亲和度，使病毒更容易感染细胞。
种猪流行性腹泻病毒培养方法

[发明专利]一种提高鸭黄病毒体外感染效率的细胞亲和剂及其制备方法-CN201510052419.6有效
发明人：冯晓声;王贵平;贾爱卿;王伟 -专利权人：广东海大畜牧兽医研究院有限公司;四川海林格生物制药有限公司
申请日： 2015-01-31 - 公布日： 2017-03-22 - 主分类号： C12N7/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种提高鸭黄病毒体外感染效率的细胞亲和剂及其制备方法，属于微生物病毒培养用剂技术领域。该细胞亲和剂由按照质量百分数计的如下组分制成有机酸0.5～5％；磷酸0～1％；无机盐0～3.5％；去离子水余量。该细胞亲和剂能够改善鸭黄病毒与细胞之间的微环境，增加鸭黄病毒与细胞之间的亲和剂，有效提高鸭黄病毒对细胞的感染率。
一种提高鸭黄病毒体外感染效率细胞亲和及其制备方法

[发明专利]一种提高猪流行性腹泻病毒体外感染效率的细胞亲和剂及其制备方法-CN201510050716.7有效
发明人：冯晓声;贾爱卿;王贵平 -专利权人：广东海大畜牧兽医研究院有限公司;四川海林格生物制药有限公司
申请日： 2015-01-31 - 公布日： 2017-03-22 - 主分类号： C12N7/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种提高猪流行性腹泻病毒体外感染效率的细胞亲和剂，由原料混合液制成，所述原料混合液由按照质量百分数计的如下组分苹果酸0.1‑1％；草酸0.12‑1.2％；山梨酸0.1‑1％；磷酸0.01‑0.1％；无机盐0.36‑3％；去离子水余量。本发明通过改变猪流行性腹泻病毒与细胞间的微环境，增加病毒与细胞接触亲和度，从而增加病毒对细胞的感染率使之适应体外规模化培养。
一种提高流行性腹泻病毒体外感染效率细胞亲和及其制备方法

[发明专利]一种诱导哺乳动物乳腺黏膜产生IgA的免疫增强剂及其制备方法和应用-CN201510050768.4有效
发明人：冯晓声;贾爱卿;王贵平;刘琪 -专利权人：广东海大畜牧兽医研究院有限公司;四川海林格生物制药有限公司
申请日： 2015-01-31 - 公布日： 2017-02-22 - 主分类号： A61K45/06 文献下载
摘要：本发明提供一种诱导哺乳动物乳腺黏膜产生IgA的免疫增强剂，其特征在于，所述免疫增强剂为溶液，包括溶质和溶剂，其中，所述溶液为氯化钠水溶液；所述溶质为Toll样受体激动剂、细胞粘附剂、上皮细胞粘附因子和促淋巴细胞归巢因子的混合物。本发明还提供该免疫增强剂的制备方法和应用。本发明所述的免疫增强剂能够诱导哺乳动物乳腺黏膜产生IgA，提高哺乳动物的乳汁中所含IgA的含量。
一种诱导哺乳动物乳腺黏膜产生 iga 免疫增强及其制备方法应用

[发明专利]一种提高鸭黄病毒病毒滴度的培养方法-CN201510050831.4有效
发明人：冯晓声;王贵平;贾爱卿;王伟 -专利权人：广东海大畜牧兽医研究院有限公司;四川海林格生物制药有限公司
申请日： 2015-01-31 - 公布日： 2017-01-18 - 主分类号： C12N7/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种提高鸭黄病毒病毒滴度的培养方法，属于微生物病毒技术领域，主要包括以下步骤配制DMEM培养液、加入胎牛血清后接种细胞进行单层培养、加入亲和剂及DMEM培养液后继续培养1min～30min、接种鸭黄病毒2～5天，即可收获具有较高病毒滴度的鸭黄病毒液。本发明所述的培养方法主要通过改变鸭黄病毒与细胞间的微环境，增加病毒与细胞接触亲和度，从而大大提高鸭黄病毒病毒滴度。
一种提高鸭黄病毒培养方法

[发明专利]提高猪伪狂犬病毒体外感染效率的细胞亲和剂及使用方法-CN201610186543.6在审
发明人：冯晓声;王伟;王贵平;赵金旺;刘宗秀 -专利权人： 四川海林格生物制药有限公司
申请日： 2016-03-29 - 公布日： 2016-06-01 - 主分类号： C12N7/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种提高猪伪狂犬病毒体外感染效率的细胞亲和剂及使用方法，解决了猪伪狂犬病毒的滴度较低、生产成本较高的问题。本发明包括复合酸与无机盐；所述复合酸包括苹果酸、草酸、山梨酸和磷酸；所述无机盐包括磷酸氢二钠、氯化钾、氯化钠。本发明具有有效增加猪伪狂犬病毒的滴度、降低生产成本、节省培育时间等优点。
提高狂犬病毒体外感染效率细胞亲和使用方法

[发明专利]一种猪伪狂犬病毒的培养方法-CN201610190381.3在审
发明人：冯晓声;王伟;杨文;王贵平;赵金旺 -专利权人： 四川海林格生物制药有限公司
申请日： 2016-03-29 - 公布日： 2016-05-25 - 主分类号： C12N7/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种猪伪狂犬病毒的培养方法，解决了猪伪狂犬病毒的滴度较低、生产成本较高的问题。本发明包括：（1）配置细胞亲和剂，将细胞亲和剂的各物质溶于去离子水中并过滤；（2）配置适用于猪伪狂犬病毒培育的DMEM培养液；（3）培育单层细胞；（4）将单层细胞、DMEM培养液以及细胞亲和剂混合均匀，然后放置细胞培养箱中静置1～30min；该细胞亲和剂的终浓度为0.01%～1%；（5）静置完成后取出，并迅速加入猪伪狂犬病毒混合均匀，最后放置到细胞培养箱进行培养，直至细胞病变脱落。本发明具有有效增加猪伪狂犬病毒的滴度、降低生产成本、节省培育时间等优点。
种猪狂犬病毒培养方法

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