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[发明专利]用于检测下呼吸道感染的试剂盒制备方法、试剂盒及应用-CN202210022485.9在审
发明人：蒋析文;梁志坤;苏恬恬;吴轶兰 -专利权人：广州达安基因股份有限公司
申请日： 2022-01-10 - 公布日： 2023-07-18 - 主分类号： C12Q1/689 文献下载
摘要：本申请实施例属于NGS测序技术领域，涉及一种用于检测下呼吸道感染的试剂盒制备方法，包括选择鉴定的呼吸道感染病原体，基于呼吸道感染病原体设计对应的多重引物；将多重引物与对应的第一接头序列进行连接，构成多重扩增引物；将与多重扩增引物互补配对的第二接头序列、MGI barcode序列及MGI测序引物序列进行连接，得到二轮扩增引物；分别制备阴性标准品和阳性标准品；根据多重扩增引物和多重扩增试剂制备多重扩增体系；将多重扩增体系、二轮扩增引物、预先制备的二轮扩增试剂、阴性标准品和阳性标准品组装得到试剂盒。本申请还涉及一种用于检测下呼吸道感染的试剂盒及应用。本申请提供的技术方案能够提高病原体的检测效率，同时可以简化实验流程。
用于检测呼吸道感染试剂盒制备方法应用

[发明专利]基于已知标签的内参进行高通量测序的方法-CN202111422884.6在审
发明人：蒋析文;梁志坤;王琳;吴轶兰 -专利权人：广州达安基因股份有限公司
申请日： 2021-11-26 - 公布日： 2022-01-28 - 主分类号： C12Q1/6869 文献下载
摘要：本申请实施例属于高通量测序技术领域，涉及一种基于已知标签的内参进行高通量测序的方法，包括：生成随机的DNA序列，并在所述DNA序列两端添加含有已知标签的单端接头DNA序列，获得内参序列，基于所述内参序列合成测序质控序列；通过所述测序质控序列对待测样本文库进行高通量测序，获得测序数据；对所述测序数据进行结果分析，获得所述待测样本文库的样本错误分配率，结束所述高通量测序。本申请能够通过内参监控测序过程中标签跳跃的情况。
基于已知标签内参进行通量方法

[发明专利]一种RNA和DNA二代测序文库的构建方法及二代测序盒-CN202110983590.4在审
发明人：蒋析文;梁志坤;张丽珊;吴轶兰 -专利权人：广州达安基因股份有限公司
申请日： 2021-08-25 - 公布日： 2021-11-23 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，其公开了一种RNA和DNA二代测序文库的构建方法及二代测序盒，该二代测序文库的构建方法包括步骤：对RNA核酸和DNA核酸进行一链合成，得到一链cDNA；对述一链cDNA进行二链合成，得到二链cDNA；对二链cDNA片段化、末端修复、磷酸化及加A处理后得到加A产物；将加A产物进行接头连接和第一次纯化处理，得到目标RNA片段和DNA片段并回收；对目标RNA片段和DNA片段进行PCR扩增反应，以构建并得到所述RNA和DNA二代测序文库。该方法构建二代测序文库，采用整体建库流程，工艺步骤简化，极大缩减了操作流程和实验时间，可最大程度减少核酸样本的损耗，同时，无需构建两种文库，可大大节约人力、试剂、时间等成本。
一种 rna dna 二代序文构建方法测序盒

[发明专利]一种用于检测呼吸道样本中病原体DNA文库的构建方法及试剂盒-CN202110920640.4在审
发明人：蒋析文;梁志坤;马伟原;吴轶兰 -专利权人：广州达安基因股份有限公司
申请日： 2021-08-11 - 公布日： 2021-11-19 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本申请属于生物技术领域，涉及一种用于检测呼吸道样本中病原体DNA文库的构建方法及试剂盒，包括通过一步反应对DNA样本以及与所述DNA样本相对应的内标进行片段化处理，以实现对所述DNA样本及所述内标进行末端修复、磷酸化及加A，获得第一产物；将所述第一产物依次进行接头连接和第一次纯化处理，获得第二产物；对所述第二产物依次进行PCR富集和第二次纯化处理，获得用于检测下呼吸道样本中病原体DNA文库。本申请的DNA文库构建过程简便快捷，能够适用于较低起始量及较差质量的DNA建库；并添加有内标，以便后续生信分析结果的解读。
一种用于检测呼吸道样本病原体 dna 文库构建方法试剂盒

[发明专利]一种DNA二代测序文库的构建方法-CN202110981921.0在审
发明人：梁志坤;蒋析文;温慧敏;吴轶兰 -专利权人：广州达安基因股份有限公司
申请日： 2021-08-25 - 公布日： 2021-10-19 - 主分类号： C40B50/06 文献下载
摘要：本发明公开了一种DNA二代测序文库的构建方法，包括步骤：基因组DNA的酶切、末端修复和加A；DNA片段接头连接；接头连接后产物的磁珠纯化处理；DNA片段PCR扩增、PCR产物片段的选择与纯化处理。本发明提供的DNA二代测序文库构建方法，以双酶切和末端修复一步反应工艺，使用VVN和T7将片段进行片段化处理，再利用Taq DNA聚合酶的聚合作用将5’突出补平，然后再3’加上A(腺嘌呤)，整合一步反应的实现构建DNA二代测序文库，第一步反应结束无需进行磁珠纯化，使得构建工艺简单；该工艺制备中，两种限制性内切酶没有偏好性，可实现目标片段测序。
一种 dna 二代序文构建方法

[发明专利]一种脑膜炎病原体宏基因组二代测序文库的构建方法及其试剂盒-CN202010167751.8在审
发明人：陈杰;吴轶兰;谢丽丽;张清文;梁思杏 -专利权人：广州赛哲生物科技股份有限公司
申请日： 2020-03-11 - 公布日： 2020-07-10 - 主分类号： C40B50/06 文献下载
摘要：本发明公开了一种脑膜炎病原体宏基因组二代测序文库的构建方法及其试剂盒。本发明首先提供了一种脑膜炎病原体宏基因组二代测序文库的构建方法，通过一步反应对片段化后的脑膜炎病原体DNA进行末段修复、磷酸化和加A，接头连接及纯化，PCR富集，纯化，即得所述脑膜炎病原体宏基因组二代测序文库。该方法及其试剂盒能够实现末段修复、磷酸化和加A一步完成，建库步骤少、时间短、成本低，通过加入外源基因组DNA解决了因脑脊液样本核酸量极低难以建库成功的问题，接头连接和文库扩增获得了特异性极高的宏基因组二代测序文库，有效文库比例高；因此，本发明的方法或试剂盒在脑膜炎病原体宏基因组二代测序文库构建中具有广泛的应用前景。
一种脑膜炎病原体宏基二代序文构建方法及其试剂盒