本发明公开了一种基因重组工程菌及其在催化合成D‑泛解酸内酯中的应用,属于生物催化研究领域。所述基因重组工程菌,以大肠杆菌为宿主菌,所述宿主菌内含有包含了共轭聚酮还原酶基因和葡萄糖脱氢酶基因的重组表达质粒,所述共轭聚酮还原酶基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。该工程菌经诱导同时表达聚酮还原酶和葡萄糖脱氢酶,将其应用于不对称催化合成D‑泛解酸内酯,通过上述双酶的协同作用,实现辅酶NADPH的原位再生,可达到从酮基泛解酸内酯到D‑泛解酸内酯高效生产的目的。该方法简化了生产工艺,同时避免了额外辅酶的添加,降低了生产成本。