本发明提供了一种用于检测转基因农产品中调控元件的重组标准质粒分子,该重组标准质粒是利用重叠PCR技术将SEQ ID No.1所示的CaMV35S启动子、SEQ ID No.2所示的FMV35S启动子、SEQ ID No.3所示的Pat29、SEQ ID No.4所示的Ubiquitin、SEQ ID No.5所示的NOS启动子、SEQ ID No.6所示的T‑35S终止子、SEQ ID No.7所示的NOS终止子和SEQ ID No.8所示的T‑E9终止子基因依次连接获得融合片段,再利用分子克隆技术将所获得的融合片段克隆到载体pMD‑19T中获得的;本发明提供的重组标准质粒可以替代转基因农产品筛查检测中的阳性标准物质,用于盲样转基因农产品定性PCR筛查检测,解决我国转基因农产品筛查中阳性标准物质不足等问题。
本发明提供一种基于实时荧光定量PCR 检测小麦根际土壤中丛枝菌根真菌数量的方法,首先提取小麦根际土壤样本总DNA作为PCR扩增的模板,然后以SEQ ID No.1和SEQ ID No.2为引物扩增获得129bp的特异性片段,经连接、转化后,再以qPCR扩增;本发明方法法不仅鉴定了丛枝菌根,并且可以准确的对其进行绝对定量,得到在转基因小麦各个生育期丛枝菌根真菌的拷贝数,在小麦生长发育阶段,丛枝菌根拷贝数的变化总体呈现逐渐增加的趋势,本发明建立了快速、简便而精确的鉴定方法,为后续试验提供了理论和试验依据,对进一步评价转基因作物的安全性具有重要意义,与现有方法相比,本发明方法敏感性高,特异性强,重复性好,操作方便,结果直观。