本发明公开了一种强化型M‑MLV逆转录酶突变体及其应用，属于生物技术领域。所述M‑MLV逆转录酶突变体是在野生型莫洛尼鼠白血病病毒逆转录酶基础上经人工改造而成，氨基酸序列如Seq ID No.2所示。强化型M‑MLV逆转录酶具备高扩增效率、强抗抑制能力和热稳定性，耐热能力可达到70℃，反应灵敏度高、反应时间快，能够排除RNA样品中所混有的高浓度乙醇或异丙醇的干扰，实现RNA的逆转录。所述增强型逆转录酶突变体可应用于微量病毒RNA逆转录和检测，普通及长链cDNA的快速合成，多种转录组建库等领域，具有广泛的应用前景和市场价值。
本发明公开了一种用于治疗代谢疾病的瘦素融合蛋白及其制备方法和应用，属于瘦素及成纤维细胞生长因子21技术领域。本发明的技术方案要点为：用于治疗代谢疾病的瘦素融合蛋白是由人FGF21蛋白的N端与人Leptin蛋白融合而成的，其氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO:2所示。本发明还公开了该用于治疗代谢疾病的瘦素融合蛋白的制备方法及其作为治疗糖尿病、肥胖症或代谢综合症药物中的应用。本发明提供的瘦素融合蛋白hLeptin‑hFGF21在糖尿病肥胖模型小鼠上具有良好的降糖和降脂作用，并在体重改善方面也表现出了显著的效果。
本发明涉及生物工程技术领域，具体涉及一种Pfu DNA聚合酶，其氨基酸序列如Seq ID No.1所示，经透析过的蛋白浓度为1.2mg/mL；编码该Pfu DNA聚合酶的基因的核苷酸序列如Seq ID No.2所示，将携带有该基因的表达载体转入宿主菌中构建获得表达菌株，经诱导表达获得所述Pfu DNA聚合酶。该Pfu DNA聚合酶可以无错配地扩增出6000bp以内的DNA片段，除了具有高保真性外还具有快速的延伸速度42bp/s和较高的变性温度100℃；37℃保存一周仍能保持较为完整的蛋白结构和优异的扩增效果，较野生型未修饰酶稳定性显著提高。因此，本发明Pfu DNA聚合酶在PCR反应中可以节省更多的时间，稳定性更强，增加了纯化后的回收效率。
