本发明提供一种GDP‑D‑甘露糖水解酶突变体及其应用，该GDP‑D‑甘露糖水解酶突变体包括以SEQ ID NO:2所示野生型的GDP‑甘露糖水解酶为模板，进行以下一个或几个定点突变形成的突变体；定点突变包括：a)第36位精氨酸突变为亮氨酸、异亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸或色氨酸；b)第38位天冬酰胺突变为精氨酸或赖氨酸；c)第65位亮氨酸突变为精氨酸或赖氨酸；d)第102位酪氨酸突变为精氨酸或赖氨酸。本发明通过对GDP‑D‑甘露糖水解酶进行蛋白质工程改造，获得的GDP‑D‑甘露糖水解酶突变体具有更高的GDP‑L‑岩藻糖催化活性，填补了目前没有特定GDP‑L‑岩藻糖水解酶的空缺。
