本发明提供了一种人冠状病毒五种型别的一管多重荧光PCR检测方法,该方法采用了序列如SEQ ID NO:1-10所示的引物,还采用了序列如SEQ ID NO:11-15所示的探针。本发明还提供了包含上述引物和探针的人冠状病毒五种型别的一管多重荧光PCR检测试剂盒。本发明采用自身设计的OC43、229E、NL63、HKU1、SARS特异引物及Taqman探针,使用TAMRA/CY5/FAM/ROX/JOE多重荧光素标记,实现对人冠状病毒五种型别的一管多重检测,具有特异性强、灵敏度高、快速、操作简单方便、成本低廉等多种优点,可作为检测试剂用于科研及临床。