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[发明专利]一种团头鲂骨组织细胞培养的方法-CN201710358473.2在审
发明人：高泽霞;关柠楠;兰天;陈宇龙 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2017-05-19 - 公布日： 2017-07-25 - 主分类号： C12N5/077 文献下载
摘要：本发明公开了一种团头鲂骨组织细胞培养的方法，其步骤是：1）选取3月龄团头鲂为实验材料；2）取团头鲂尾椎和肋骨及其周围结缔组织；3）PBS冲洗，将组织块在胎牛血清中润湿后，用镊子将其放入培养瓶底部；4）将培养瓶放入培养箱倒置培养；5）每日观察细胞生长情况，更换培养基；6）待细胞汇合度达到80%后进行胰蛋白酶消化传代，获得团头鲂原代骨组织细胞；7）待团头鲂原代骨组织细胞的汇合度达到70~80%时使用胰蛋白酶进行细胞的消化传代，细胞离心后重悬，接种于两个新的培养瓶中继续培养，获得传代细胞。方法易行，操作简便，解决了由于样品个体大小限制及胰蛋白酶消化法使用受限等问题，为日后鱼类骨骼生长发育等相关研究提供基础材料。
一种团头鲂骨组织细胞培养方法

[发明专利]一种团头鲂成鱼肌间骨染色的方法及应用-CN201511003963.8在审
发明人：高泽霞;聂春红;万世明;张伟卓;关柠楠;王卫民 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2015-12-25 - 公布日： 2016-05-04 - 主分类号： A01N1/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种团头鲂成鱼肌间骨染色的方法，其步骤：1、用无水乙醇固定团头鲂成鱼样本；2、用无水乙醇、蒸馏水对团头鲂成鱼标本复水；3、用TBST溶液浸泡团头鲂成鱼标本过夜处理；4、用蒸馏水浸泡团头鲂成鱼标本，洗去残余的TBST溶液；5、用新配的KOH溶液透明团头鲂成鱼标本；6、将标本转移至新的KOH溶液中，然后滴加茜素红染液染色，直至溶液变为深紫色；7、将标本转移至新的KOH溶液中，洗去团头鲂成鱼标本的染色液；8、将团头鲂成鱼标本转移至甘油中脱水保存。此方法易行，操作过程简单，无需复杂的仪器，获得身体透明、肌间骨染色为深紫色的团头鲂成鱼标本，标本可清楚观察团头鲂成鱼肌间骨的附着位置及形态。
一种团头鲂成鱼肌间骨染色方法应用