本发明提供一种用于鉴定鹤鸵目动物性别的引物、性别鉴定方法及试剂盒，涉及生物学检测与人工繁育技术领域。本发明的用于鉴定鹤鸵目动物的引物序列如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示。本发明的性别鉴定方法，包括以下步骤：S1、提取鹤鸵目动物的血液或羽毛的DNA；S2、以步骤S1中提取的DNA为模板，使用上述的引物RASEF‑F1和RASEF‑R1进行PCR扩增，并对PCR产物进行琼脂糖检测；S3、对PCR扩增产物进行测序，根据所得序列的连锁的单核苷酸差异判断鹤目动物的性别。本发明的引物和鉴定方法，能高效、快速、准确地鉴别鹤鸵目动物的性别。
本发明提供一种鹦鹉博尔纳病毒4型的鉴定引物、鉴定方法和试剂盒，涉及生物学检测与疾病诊断领域。本发明的荧光定量PCR鉴定引物序列如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示。本发明的鉴定方法包括以下步骤：S1、提取鹦鹉病料组织的病毒RNA，将病毒RNA反转录成cDNA；S2、以步骤S1中cDNA为模板，使用上述鉴定引物进行SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR扩增；S3、对扩增曲线进行分析，当ct值≤30并且扩增曲线呈S型时，判定为PaBV‑4型阳性，当ct值＞30时，判定为PaBV‑4型阴性。本发明的引物和鉴定方法，具有灵敏度高，特异性强，重复性好的特点，可用于鹦鹉博尔纳病毒4型的检测，尤其适用于鹦鹉博尔纳4型病毒的早期及隐性感染病毒含量低的检测及鉴定。
本发明涉及一种一种虎γ干扰素及其表达基因、制备方法和应用，属于基因工程技术领域。该虎γ干扰素包括如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。上述虎γ干扰素是通过分离培养虎外周血淋巴细胞，ConA诱导其分泌γ干扰素，从淋巴细胞中克隆获得的虎γ干扰素。并且为了更好地利用基因工程技术来开发重组虎干扰素γ制剂，本发明中，还将去除信号肽序列的虎干扰素γ基因序列根据毕赤酵母的偏嗜性进行密码子优化，插入到pPIC9K载体，构建成能分泌表达干扰素γ蛋白的重组表达载体，然后将其导入高效表达系统‑毕赤酵母中。培养毕赤酵母，表达虎γ干扰素蛋白，为后续制备用于增强虎免疫能力和/或抵抗病原微生物感染的药物中提供坚实的基础。
