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[发明专利]一种酶法制备亚精胺的方法-CN201911171620.0有效
发明人：陈可泉;刘逸;王昕;郭兴;乔荣梅;高思远;欧阳平凯 -专利权人：南京工业大学
申请日： 2019-11-26 - 公布日： 2023-10-10 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种酶法制备亚精胺的方法，该方法以BL21DE3为出发菌株，在出发菌株基础上过分别过表达了来源于大肠杆菌K12中编码S‑腺苷甲硫氨酸脱羧酶的speD基因和编码亚精胺合成酶的speE基因，通过上述操作得到两株工程菌，通过细胞破碎得到的粗酶液进行反应后得到亚精胺的产量为1g/L。与现有技术相比，本发明方法生物合成法有着绿色，高产，条件温和等优点，尤其是副产物少，对环境友好度高。
一种法制精胺方法

[发明专利]一种EutM天然蛋白支架介导提高L-苏氨酸醛缩酶立体选择性的方法及其应用-CN202211597264.0在审
发明人：王昕;胡鑫峰;陈可泉;乔荣梅 -专利权人：南京工业大学
申请日： 2022-12-12 - 公布日： 2023-09-08 - 主分类号： C12N9/96 文献下载
摘要：本发明公开了一种EutM天然蛋白支架介导提高L‑苏氨酸醛缩酶立体选择性的方法及其应用。该方法是利用结合蛋白SpyCatcher和结合分子肽SpyTag之间能自发脱水形成异肽键耦联的特点将L‑苏氨酸醛缩酶和EutM天然蛋白支架进行连接。相比于游离酶体系，组装体EutM‑L‑TA中的支架使酶处于更加稳定的状态；EutM蛋白支架独特的表面电荷分布也对酶的反应产生了有益影响，因此，利用组装体EutM‑L‑TA合成的屈西多巴的DE值得到了明显提高，具有良好的应用前景。
一种 eutm 天然蛋白支架提高苏氨酸醛缩酶立体选择性方法及其应用

[发明专利]一种双酶耦合合成去甲肾上腺素的方法-CN202110212194.1在审
发明人：王昕;乔荣梅;陈可泉;张琨;冯娇;麦丹丹;马琛;陆佳晨 -专利权人：南京工业大学
申请日： 2021-02-25 - 公布日： 2021-06-15 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种双酶耦合合成去甲肾上腺素的方法，该方法以BL21DE3为出发菌株，在出发菌株基础上分别过表达了来源于黑熊中编码L‑苏氨酸醛缩酶的S‑TA基因和短乳杆菌中编码酪氨酸脱羧酶的TDC基因，通过上述操作得到两株工程菌，通过细胞破碎得到的粗酶液，以3,4‑二羟基苯甲醛为底物，甘氨酸为辅底物，5‑磷酸吡哆醛为辅因子进行反应后得到去甲肾上腺素的产量为6.3g/L。与现有技术相比，本发明方法生物合成法有着绿色，高产，条件温和等优点，尤其是副产物少，对环境友好度高，且所需生产设备成本大大降低。
一种耦合合成去甲肾上腺素方法

[发明专利]一种基于L-苏氨酸醛缩酶生物合成屈昔多巴的方法-CN202110212026.2在审
发明人：陈可泉;乔荣梅;王昕;冯娇;张琨;麦丹丹;胡鑫峰 -专利权人：南京工业大学
申请日： 2021-02-25 - 公布日： 2021-06-11 - 主分类号： C12P13/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于L‑苏氨酸醛缩酶生物合成屈昔多巴的方法，该发明以BL21DE3为出发菌株，在出发菌株基础上过表达了来源于铜绿假单胞杆菌中编码L‑苏氨酸醛缩酶的ItaE基因、恶臭假单胞杆菌中编码L‑苏氨酸醛缩酶的P‑TA基因、大肠杆菌中编码L‑苏氨酸醛缩酶的LTA基因，或链霉菌中编码L‑苏氨酸醛缩酶的STA基因，通过上述操作得到工程菌，通过离心收集得到的湿细胞进行反应后得到屈昔多巴的产量为3.3‑4.15g/L。与现有技术相比，本发明方法生物合成法有着绿色，高产，条件温和等优点，尤其是副产物少，对环境友好度高。
一种基于苏氨酸醛缩酶生物合成屈昔多巴方法

[发明专利]一种基于酪胺-β-羟化酶催化产章鱼胺的方法-CN202110255680.1在审
发明人：陈可泉;程莎莎;王昕;乔荣梅;胡鑫峰;冯娇;张阿磊;欧阳平凯 -专利权人：南京工业大学
申请日： 2021-03-09 - 公布日： 2021-06-04 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于酪胺‑β‑羟化酶催化产章鱼胺的方法，该方法具体包括以下步骤：生成表达酪胺‑β‑羟化酶的基因工程菌BL21(DE3)/pET28a‑TBH；培养基因工程菌BL21(DE3)/pET28a‑TBH和诱导表达TBH；收集上述菌体，用缓冲液重悬菌体后，匀浆破碎，离心消除杂质，得TBH的粗酶液；以酪胺为底物，加入抗坏血酸、富马酸、铜离子为辅因子，加入TBH粗酶液反应得产物章鱼胺(在有氧条件下进行)。本发明方法是首次系统的做出从酪胺到章鱼胺的酶催化生产工艺，催化效率高达20mg/L，环境友好，原料易得，生产成本低，工艺简单，反应条件温和，成功打通了这条路径，为以后的章鱼胺生产研究奠定了良好的基础。
一种基于羟化酶催化章鱼方法

[发明专利]一种纳米材料固定化脂肪酶的方法-CN201911171607.5在审
发明人：陈可泉;刘逸;李辉;郭兴;乔荣梅;陆秋豪;曾金磊;李春秋;欧阳平凯 -专利权人：南京工业大学
申请日： 2019-11-26 - 公布日： 2020-03-06 - 主分类号： C12N11/14 文献下载
摘要：本发明公开了一种纳米材料固定化脂肪酶的方法。该方法先制备固定化酶，再将固定化酶重悬后重新加入CALB、Zn2+和二甲基咪唑溶液，离心后的纳米固定化脂肪酶，经过预冻后，继续冻干称重，即可计算出蛋白固载量。与现有技术相比，采用该方法固定化脂肪酶后，在固载率有提高的情况下仍然保持较高的酶活，方便重复利用，降低生产成本，提高经济效益。
一种纳米材料固定脂肪酶方法