本发明公开了一种拟盘多毛孢属真菌几丁质脱乙酰酶及其制备方法和应用。本发明根据毕赤酵母密码子偏爱性,优化后的核酸序列如SEQ ID NO.2所示,利用全基因合成方法获得拟盘多毛孢属真菌的几丁质脱乙酰酶编码基因序列。进一步利用毕赤酵母表达系统对所述优化的几丁质脱乙酰酶编码基因进行分泌表达,获得几丁质脱乙酰酶,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明获得的几丁质脱乙酰酶可对几丁质、壳聚糖及壳寡糖中的乙酰基进行脱除,从而获得特定结构的壳聚糖或壳寡糖。这些特定结构的壳聚糖或壳寡糖可具有新的或更高的生物活性。因此,该拟盘多毛孢属真菌几丁质脱乙酰酶及其脱乙酰产物均具有良好的工业应用前景。
本发明公开了一种褐藻胶裂解酶Alg7D及其制备方法和应用。本发明根据毕赤酵母密码子的偏好性,对嗜糖菌属菌株2‑40(Saccharophagus degradans 2‑40)中的褐藻胶裂解酶编码基因进行了优化,优化后的核酸序列如SEQ ID NO.2所示。进一步利用毕赤酵母表达系统对所述优化的褐藻胶裂解酶编码基因进行高效分泌表达,获得褐藻胶裂解酶,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明获得的褐藻胶裂解酶对褐藻酸钠底物有较高的水解活性,摇瓶发酵产生的粗酶液即具有0.1ml(蛋白质含量约0.03mg)彻底降解1g褐藻酸钠的能力,具有良好的工业应用前景。