本发明公开了一种氨肽酶LapA定点突变蛋白及其应用,属于蛋白质工程技术领域,本发明基于对LapA结构的研究结果,发现了影响LapA底物识别性的关键位点,通过对LapA突变蛋白的研究,利用定点突变技术,获得了氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的嗜肺军团菌氨肽酶LapA的第386位突变体蛋白,经过突变的蛋白不仅保留了原蛋白的水解作用,还对N末端为赖氨酸的蛋白质和多肽具有水解作用,扩展了LapA底物识别的范围,为氨肽酶LapA的产业化和应用广泛化奠定了良好的基础。
本发明公开了一种有机溶剂耐受性氨肽酶LapA及其制备方法和应用,属于基因工程、蛋白表达与纯化及酶学特征研究领域,该氨肽酶LapA来源于嗜肺军团菌,具有如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列,该编码基因具有如该酶作为一种外切蛋白酶,具有良好的温度稳定性以及有机溶剂耐受性,能适应极端的高浓度有机溶剂反应条件,为氨肽酶LapA的产业化和在发酵食品加工工业的应用奠定了良好的基础。