本发明涉及苏云金芽胞杆菌基因cry8like2、与cry8G组合及其应用，属于生物防治技术领域。本发明从HBF-18中分离得到cry8lik1e基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO1所示，与cry8E连接后得到cry8like2合成基因，其核苷酸序列如EQ ID NO2所示。同时本发明提供一种蛋白组合，Cry8like2与Cry8G在鞘翅目害虫上有协同作用，对主要地下害虫蛴螬的生物防治以及我国农业绿色可持续发展都有极其重要的意义，进一步为开发抗蛴螬的Bt工程菌株、转基因作物提供基因来源
本发明提出了Cry1A类毒素广谱检测用单链抗体及基因序列和应用，该单链抗体为scFv‑5B5或其突变体scFv‑2G12，单链抗体scFv‑5B5的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，单链抗体scFv‑2G12的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。本发明提供的两种单链抗体与3种Cry1A类毒素（Cry1Aa，Cry1Ab和Cry1Ac）均具有较好的结合活性，同时与Cry1B、Cry1C和Cry1F毒素无交叉反应，可用于Cry1A类毒素的广谱检测，
本发明公开了一种人工合成cry1Ah1基因及其应用，该人工合成cry1Ah1基因的碱基序列如SEQ ID NO.2所示或如SEQ ID NO.3所示。本发明选取Bt杀虫基因crylAh1基因野生型序列为原始序列对cry1Ah1基因编码区全长起始密码子开始第64nt‑1998nt杀虫关键区域共645个氨基酸，在不改变原有氨基酸一级序列的前提下进行密码子优化，获得cry1Ah1‑B基因和cry1Ah1‑U基因，将优化后的基因与优化前基因的所有基因翻译的蛋白经过tBlastX比较均完全一致。对转cry1Ah1改造基因植株的RT‑PCR鉴定分析，表明cry1Ah1‑B、cry1Ah1‑U与野生cry1Ah1基因表达效率有明显差别，转Bt基因杨树的ELISA测定结果表明，包括对照组在内的所有株系总蛋白量保持在24.013mg/g~26.667mg/g之间，虫试结果较为良好的株系中A‑3‑4、A‑5‑0、A‑5‑23和Z‑1‑3四个株系的毒蛋白含量在4669.38ng/g~9342.33ng/g之间，抗虫效果明显
本发明涉及cry2Ah‑vp基因在抗黏虫中的应用。本申请人在Cry2Ah的第354位缬氨酸后面插入一个脯氨酸而从中得到Cry2Ah1‑vp突变体如SEQ ID No.1所示。密码子优化后获得cry2Ah‑vp基因，利用农杆菌介导法将cry2Ah‑vp基因转入玉米，获得了T0代转基因玉米。实验结果表明cry2Ah‑vp基因在转基因玉米不同组织中可以正常转录，六叶期Cry2Ah‑vp蛋白在玉米各个部位的表达量最高，叶片的表达量为2.20μg/g(鲜重)，抽雄期和灌浆期各部位也有较高表达。
本发明涉及“对鞘翅目害虫高效的苏云金芽孢杆菌cry8H基因、蛋白及其应用”属于生物防治技术领域。本发明对鞘翅目害虫高毒力的cry8H基因的核苷酸序列，如SEQ ID NO1所示，人工设计合成的可以在植物中表达的cry8H基因的核苷酸序列如SEQ ID NO3所示。该人工设计的cry8H基因转化植物，获得的转基因植物都具有抗华北大黑鳃金龟(Holotrichiaoblita)、铜绿丽金龟(Anomala corpulenta)和暗黑鳃金龟(Holotrichia
