本发明提供一种以重组减毒单増李斯特菌为载体的结肠癌疫苗及制备方法，涉及基因工程领域，是以减毒单増李斯特菌背景菌株Lemo‑C07为背景载体，利用PCR技术扩增Lemo‑C07的hly基因498bp以及hly基因下游500bp分别作为片段A和片段B；利用SOE‑PCR技术将三个片段(抗原片段AH1设计在引物上)连在一起获得A‑B的目的片段，如序列SEQ ID NO.1所示；以KpnⅠ和PstⅠ为酶切位点，经酶切将肿瘤特异性抗原基因整合至减毒李斯特菌基因组中，使抗原基因能够稳定表达，不易丢失；使用的减毒株Lemo‑C07与野生株相比，毒力降低了近10000倍；不含抗性质粒，无抗生素耐药风险，安全性更高。
本发明公开了一种嗜水气单胞菌的LAMP检测引物组，包括一对外引物AH-F3和AH-B3、一对内引物AH-FIP和AH-BIP以及一对环引物AH-LF和AH-LB，其中AH-F3的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，AH-B3的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，AH-FIP的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，AH-BIP的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示，AH-LF的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示，AH-LB的核苷酸序列SEQ ID NO.6所示。
