本发明提供烟酰胺核苷激酶全酵母细胞及其生物催化合成NMN工艺,涉及酶工程技术领域。该烟酰胺核苷激酶全酵母细胞及其生物催化合成NMN工艺,包括以下步骤:S1、酿酒酵母的烟酰胺核苷激酶重组展示表达载体的构建:根据NrK1突变体的氨基酸序列(SEQ ID NO:1)设计NrK1的编码DNA序列,密码子采用酿酒酵母的偏爱密码子,以全基因合成的方式合成NrK1的编码DNA(SEQ ID NO:2)。该烟酰胺核苷激酶全酵母细胞及其生物催化合成NMN工艺,该烟酰胺核苷激酶全酵母细胞及其生物催化合成NMN工艺,可将不同生物来源可催化NMN合成的高活性酶通过基因工程技术锚定表达于酿酒酵母的细胞壁表面,形成具有高效合成NMN的全酵母工程细胞酶。