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[发明专利]一种改变脂肪酶催化活性的活性重塑方法-CN201610261953.2有效
发明人：王栋;徐岩;张璋 -专利权人：江南大学
申请日： 2016-04-25 - 公布日： 2019-04-02 - 主分类号： C12N9/20 文献下载
摘要：本发明公开了一种改变脂肪酶催化活性的活性重塑方法，属于酶工程技术领域。本发明通过脂肪酶体外重塑过程中添加不同的调节因子，获得具有高酯化活性的重构脂肪酶，以满足脂肪酶非水相催化的需要。将不具有酯化活性或者活性较低的各种微生物脂肪酶，包括大肠杆菌工程菌外源表达的脂肪酶以及商品脂肪酶，经8M尿素变性处理，在复性过程中添加从华根霉细胞提取的膜环境复合物WTS，可获得酯化活性显著提高的活性重塑脂肪酶，同时脂肪酶常见的水解活性也发生变化。酯化活性的恢复使脂肪酶更适合工业化应用。
一种改变脂肪酶催化活性重塑方法

[发明专利]制备生物柴油催化剂的脂肪酶酯化活力的测定方法-CN201210339821.9无效
发明人：黄遵锡;张学林;李俊俊;唐湘华;许波;杨云娟;周峻沛 -专利权人：云南师范大学
申请日： 2012-09-14 - 公布日： 2012-12-26 - 主分类号： C12Q1/44 文献下载
摘要：本发明是制备生物柴油催化剂的脂肪酶酯化活力的测定方法。本发明是利用脂肪酶催化月桂酸和月桂醇之间的酯化反应，反应一定时间后，吸取一定体积的反应液用0.05M的NaOH标准液滴定，用反应液反应前后消耗的NaOH标准液多少来确定脂肪酶的酯化活力，一个酯化活力单位定义为：1g固体酶粉（或1ml液体酶），在一定温度下，1min内消耗的月桂酸的量。本发明用于筛选可作为制备生物柴油的脂肪酶产生菌，以及高酯合成领域，将会达到目的性更强，研究和开发更多的具有酯转化活性的脂肪酶。本发明的脂肪酶酯化活性的测定方法，可用于筛选制备生物柴油的脂肪酶产生菌和研究和开发出更多的催化剂，进一步拓宽脂肪酶的应用领域。
制备生物柴油催化剂脂肪酶酯化活力测定方法

[发明专利]一种印迹脂肪酶及其应用-CN201811314975.6有效
发明人：钱俊青;苟李红;郭辉;龚峰 -专利权人：浙江工业大学
申请日： 2018-11-06 - 公布日： 2021-02-02 - 主分类号： C12N9/20 文献下载
摘要：本发明公开了一种印迹脂肪酶及其应用，所述印迹脂肪酶按如下方法制备：将印迹分子加入脂肪酶酶液中，搅拌溶解，调节pH为7.2‑7.8，搅拌印迹反应完全后，加入大孔树脂，搅拌吸附完全后，将反应液过滤，滤饼洗涤干燥，即获得印迹脂肪酶；本发明以麦芽糖或蔗糖为印迹分子，与有机酸和酯类化合物为印迹分子比较，印迹体系不需要表面活性剂与醇类助溶剂，印迹分子在水溶液中与脂肪酶分子的结合更优。麦芽糖印迹的脂肪酶，催化低聚糖酯化的应用面较广，以蔗糖为例，催化其乙酯合成，酯化率与酯化选择性均优于未印迹的脂肪酶，本发明酯化率高达86.6％，酯化选择性高达85.4％。
一种印迹脂肪酶及其应用

[发明专利]一种利用表面活性剂制备高酯化活性脂肪酶的方法-CN201710425990.7有效
发明人：王栋;徐岩;张璋 -专利权人：江南大学
申请日： 2017-06-08 - 公布日： 2021-07-27 - 主分类号： C12N9/96 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用表面活性剂制备高酯化活性脂肪酶的方法，属于酶工程技术领域。本发明通过脂肪酶水溶液中添加不同的表面活性剂及不同的表面活性剂浓度，通过冷冻干燥获得具有高酯化活性的脂肪酶，以满足脂肪酶非水相催化的需要。将不具有酯化活性或者活性较低的各种微生物脂肪酶，在合适浓度下与适当浓度的表面活性剂进行混合处理，可获得酯化活性显著提高的脂肪酶，同时脂肪酶常见的水解活性也发生变化。酯化活性的提高使脂肪酶更适合工业化应用。
一种利用表面活性剂制备酯化活性脂肪酶方法

[发明专利]一种固定化脂肪酶及其制备方法-CN200810223076.5有效
发明人：张增伟;张文波;周浩;顾燕松 -专利权人：北京凯泰新世纪生物技术有限公司;北京中纺化工股份有限公司
申请日： 2008-09-26 - 公布日： 2009-03-11 - 主分类号： C12N11/08 文献下载
摘要：本发明公开了一种固定化脂肪酶及其制备方法。该固定化脂肪酶的制备方法，是将脂肪酶溶液与是所述脂肪酶溶液重量的3％-60％的聚合物乳液混合均匀，将得到混合液浸渍无纺布，干燥得到固定化脂肪酶；所述聚合物乳液是聚丙烯酸酯乳液或者溶质为聚丙烯酸酯与聚氨酯的混合乳液实验证明本发明的固定化脂肪酶催化性能高，使用寿命长，其连续进行多次催化酯化反应和转酯化反应后，催化效率仍能保持在90％以上，其催化生产每吨生物柴油所需的固定化酶量≤4kg。
一种固定脂肪酶及其制备方法

[发明专利]一种利用解脂亚罗酵母菌脂肪酶分两步催化油脂合成生物柴油的方法与所得到的柴油-CN200810182818.4有效
发明人：孟永宏;徐志文;李月娟;周志奇;梁晓梅;杨娜;陈晋南 -专利权人：秦皇岛领先科技发展有限公司
申请日： 2008-12-10 - 公布日： 2009-04-22 - 主分类号： C12N9/20 文献下载
摘要：本发明提供了一种利用解脂亚罗酵母菌CGMCC No.2707的粗脂肪酶酶液及其固定化脂肪酶分别催化废弃动、植物油脂水解、酯化反应，合成生物柴油方法；并提供了该脂肪酶粗酶液和固定化酶的制备方法。该方法中油脂水解和酯化反应均使用脂肪酶为催化剂，不使用强酸强碱，具有反应条件温和、污染小的优点，整个脂肪酸甲酯/乙酯生产过程中不使用有机溶剂，反应安全、效率高。
一种利用解脂亚罗酵母菌脂肪酶分两步催化油脂合成生物柴油方法得到

[发明专利]一种固定化脂肪酶催化黄连木油制备生物柴油的方法-CN201110092849.2无效
发明人：刘光斌;刘苑秋;黄长干;胡冬南;张露;杜天真;黄忠;邱自兵 -专利权人：江西农业大学
申请日： 2011-04-14 - 公布日： 2011-11-30 - 主分类号： C12P7/64 文献下载
摘要：一种固定化脂肪酶催化黄连木油制备生物柴油的方法，其特征是：以天然纤维-苎麻为载体的固定猪胰脂肪酶催化黄连木油与甲醇的转酯反应制备生物柴油。本发明可将固定化脂肪酶在酯化反应后回收连续重复使用13次,脂肪酶的活性保持率大于80.0%,提高了脂肪酶的利用率,降低了因脂肪酶所致的产品成本。
一种固定脂肪酶催化黄连木制备生物柴油方法

[发明专利]脂肪酶-金属有机框架复合催化材料及其制备方法和应用-CN202010557873.8在审
发明人：黄和;张幸;李昺之;徐晴;纪元 -专利权人：南京师范大学
申请日： 2020-06-18 - 公布日： 2020-11-20 - 主分类号： C12N11/04 文献下载
摘要：本发明公开了脂肪酶‑金属有机框架复合催化材料及其制备方法和应用，该复合催化材料以金属有机框架作为一种新型的固定化酶材料，将脂肪酶包裹在其内部形成。本发明制备得到脂肪酶‑金属有机框架复合催化材料后，将其加入植物甾醇和酯化试剂的混合溶液中，催化酯化反应得到植物甾醇酯产品。本发明的复合催化材料能够高效催化植物甾醇的酯化反应，不仅具有良好的热稳定性和化学稳定性，还能提高酶促反应速率，并可以实现多次回收利用同时保持较高的催化活性。
脂肪酶金属有机框架复合催化材料及其制备方法应用

[发明专利]一种酶法催化高酸价油脂制备生物柴油的方法-CN202010167904.9有效
发明人：李道明;钟小荣;刘看看;刘宁 -专利权人：陕西科技大学
申请日： 2020-03-11 - 公布日： 2022-05-24 - 主分类号： C12P7/649 文献下载
摘要：本发明公开了一种酶法催化高酸价油脂制备生物柴油的方法，属于油脂化工技术领域。首先采用固定化甘油三酯脂肪酶在甲醇远过量的情况下催化高酸价油脂甲酯化，反应平衡后，回收甘油三酯脂肪酶、甲醇和油相产物；随后，采用固定化偏甘油酯脂肪酶继续催化上述油相产物甲酯化，可快速将上述产物中未反应的偏甘油酯转化为脂肪酸甲酯，反应平衡后，收集固定化酶、甲醇和终产物。该方法操作简单，成本低廉，脂肪酸甲酯生成速率和产量大大提升；且所用甘油三酯脂肪酶和固定化偏甘油酯脂肪酶可多次回收利用，具有良好的经济效益。
一种催化高酸价油脂制备生物柴油方法

[发明专利]一种定向催化酯化反应的固载酶及其制备方法与应用-CN202010226830.1在审
发明人：钟南京;陈文艺 -专利权人：广东药科大学
申请日： 2020-03-27 - 公布日： 2020-07-10 - 主分类号： C12N11/02 文献下载
摘要：本发明属于生物化工技术领域，具体公开了一种定向催化酯化反应的固载酶及其制备方法与应用。所述方法包括如下步骤：将南极假丝酵母脂肪酶与HEPES缓冲液混合，配制得到HEPES‑脂肪酶液；然后将所得HEPES‑脂肪酶液与GMP或AMP母液混合得到混合溶液，再加入金属离子混合均匀，过滤后冷冻干燥，得到固载酶。本发明固载酶制备方法简单，所得固载酶其酶活性高，能高效催化酯化反应，并且重复利用性好，但是它不能催化醇解反应，具有定向催化性质，即能催化酯化反应而不能催化醇解反应，因此本发明具有非常好的应用前景。
一种定向催化酯化反应固载酶及其制备方法应用

[发明专利]产活性脂肪酶的米曲霉菌株及应用与发酵产酶方法及应用-CN202310064771.6在审
发明人：谭新;雷国伟;李靖;周小春 -专利权人：湖南万全裕湘生物科技有限公司
申请日： 2023-01-14 - 公布日： 2023-05-09 - 主分类号： C12N1/14 文献下载
摘要：本发明公开了一种产活性脂肪酶的米曲霉菌株及应用与发酵产酶方法及应用，该米曲霉新菌株为曲霉属的新菌株MASL‑01，所述新菌株MASL‑01已保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC NO.63015该米曲霉新菌株产生的脂肪酶活性可以高达378000U/g，该脂肪酶能够高效催化脂肪酸甘油酯水解为脂肪酸，水解率可以达到90％以上，而且脂肪酶对甘油酯有很好的sn‑1,3位置专一性，优先催化反应甘油sn‑1,3位置的脂肪酸；同时该脂肪酶还能够催化脂肪酸进行酯化反应，酯化率高达99％。该脂肪酶的最适反应温度为40～45℃，其热稳定性好，能够在较高温度下实现更快速和高效的水解，具有较好的工业生产应用价值。
活性脂肪酶曲霉菌株应用发酵方法

[发明专利]一株高产脂肪酶的解脂亚罗酵母突变株、培养方法及其酶应用-CN200810172116.8有效
发明人：李颖;王贵利;关国华;孟永宏;李月娟;徐志文 -专利权人：秦皇岛领先科技发展有限公司
申请日： 2008-11-11 - 公布日： 2009-05-27 - 主分类号： C12N1/16 文献下载
摘要：本发明提供一株经过紫外诱变方法得到的解脂亚罗酵母脂肪酶高产菌株LW1(CGMCC No.2707)，并提供该菌株的发酵培养方法、脂肪酶提纯、催化脂肪酸甲酯化的方法。解脂亚罗酵母CGMCC No.2707在100L发酵罐上经过补料发酵培养97.5h，产酶水平为15500U/ml，所制得的脂肪酶酶粉活力为30000U/g。获得的脂肪酶酶粉或发酵液可直接应用于催化脂肪酸甲酯化反应。在脂肪酸与甲醇等摩尔比加入，体系中用酶量为每克脂肪酸1000-3000U时，30h转化率在90％以上。
高产脂肪酶解脂亚罗酵母突变培养方法及其应用

[发明专利]一种非水相脂肪酶转酯化活力的检测方法-CN201310174245.1无效
发明人：郑建永;汪钊;付显锋 -专利权人：浙江工业大学
申请日： 2013-05-10 - 公布日： 2013-09-18 - 主分类号： G01N21/75 文献下载
摘要：本发明提供了一种非水相脂肪酶转酯化活力的检测方法，所述方法是以式（I）所示对硝基苯酚酯和式（II）所示烷基醇为底物，以脂肪酶为催化剂在有机溶剂中进行转酯化生成对硝基苯酚和式（III）所示烷基酯，通过有机溶解稀释后检测反应液310nm处的紫外吸收值变化来确定脂肪酶的转酯化活力；本发明所述非水相脂肪酶转酯化活力的检测方法的有益效果主要体现在：检测方法简单可行，原料成本低，检测耗时少，仪器要求不高，可以用于脂肪酶酯化活性的快速测定
一种非水相脂肪酶酯化活力检测方法

[发明专利]一种脂肪酶组合物及其应用-CN201910332001.9在审
发明人：韩望;黄友雪;黄大鑫;曹议元;罗冠聪;曹弘隽;林小欣;奉心茹;甘露菁;金铁铨 -专利权人：北京理工大学珠海学院
申请日： 2019-04-24 - 公布日： 2019-06-28 - 主分类号： C12N9/20 文献下载
摘要：本发明公开了一种脂肪酶组合物及其应用，属于酶工程技术领域。本发明的脂肪酶组合物由来自铜绿假单胞菌的脂肪酶和来自疏绵状嗜热丝孢菌的脂肪酶组成，按蛋白质含量，具体组成如下：铜绿假单胞菌的脂肪酶25％～50％、疏绵状嗜热丝孢菌的脂肪酶50％～75％。本发明的脂肪酶组合物对催化油脂的水解反应和酯化反应具有协同增效作用，能够快速水解甘油三酯、加快酯化初始反应速度，反应过程更平缓、波动少，反应终了时能够生成更多的酯化产物，降低了酶制剂用量，有效节省反应时间和生产成本
脂肪酶脂肪酶组合物疏绵状嗜热丝孢菌铜绿假单胞菌协同增效作用酶工程技术酶制剂用量饲料添加剂甘油三酯水解反应油脂化工酯化产物酯化反应洗涤剂水解酯化催化生产成本蛋白质应用

[发明专利]提高固定化脂肪酶活性和稳定性的方法-CN200910249000.4无效
发明人：孙玉梅;杜凯 -专利权人：大连工业大学
申请日： 2009-12-30 - 公布日： 2010-06-16 - 主分类号： C12N11/14 文献下载
摘要：一种提高固定化脂肪酶活性和稳定性的方法。采用能改变脂肪酶分子构象以及载体对脂肪酶的吸附状态的极性有机溶剂为处理剂，对吸附固定的脂肪酶浸泡适当时间而成；所述的固定化载体选取40目活性炭、或硅胶G、或DM-130树脂，所述的有机化合物选取醇、酮、酯中的一种为固定化酶处理剂。将吸附固定的脂肪酶浸泡于有机化合物处理剂中，再对浸泡的固定化脂肪酶进行分离收集和干燥处理，即得催化活性和稳定性得以提高的固定化脂肪酶。所得处理的固定化脂肪酶可用作于油脂的转酯化、合成或水解，其酶活力为对照的1.5～2.5倍、半衰期延长3～8h、催化大豆油转酯化反应延长使用3-6批。改善了固定化酶的使用性能。
提高固定脂肪酶活性稳定性方法

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