本发明提供了昆虫杆状病毒表达载体、构建方法及其应用，所述昆虫杆状病毒表达载体包括含人抗体轻链Kappa保守区序列的昆虫杆状病毒表达载体I以及含人抗体重链IgG1保守区的昆虫杆状病毒表达载体II，所述表达载体I的序列如序列表SEQ ID 1所示，所述表达载体II的序列如序列表SEQ ID 2所示；还包括含α‑2，3‑唾液酸糖基转移酶ST3的昆虫杆状病毒表达载体III，所述表达载体III的序列如序列表SEQ所述昆虫杆状病毒表达载体可高效表达含重链和轻链的人源化抗体。
本发明提供了一种重组杆状病毒及其构建方法和应用，所述重组病毒为核苷酸序列为SEQ ID No1.的基因通过转座重组整合到杆状病毒的基因组上获得的。本发明还提供了重组杆状病毒构建方法，包括从AcMNPV获得Ac‑pk2基因，将该基因构建到pFastBacDual‑egfp，通过Bac‑to‑Bac系统获得重组杆状病毒AcMNPV‑PK2‑EGFP。本发明重组杆状病毒可以通过营救翻译起始来帮助外源蛋白的表达，提高昆虫杆状病毒表达系统的蛋白产量，在杆状病毒昆虫表达系统作为真核表达系统的应用方面具有较好的应用前景。本发明的重组杆状病毒还可用于制备防治鳞翅目害虫的生物杀虫剂。
