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[发明专利]一种南方红豆杉组织培养种苗繁育方法-CN201710312634.4有效
发明人：王婷婷;胡春宏;常苹;季翔;王晨 -专利权人：江苏东郁园林科技有限公司
申请日： 2017-05-05 - 公布日： 2020-04-24 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种南方红豆杉组织培养种苗繁育方法，其技术方案要点是步骤为选取外植体，将外植体置于培养基中进行培养，选取外植体后，再将外植体置于培养基内之前，对外植体进行消毒处理；所选取的外植体中，导管尚未发育成熟，为活细胞，能够分裂增殖，其木薄壁组织对外植体的难以起到阻碍分裂的作用。将外植体消毒能够有效去除外植体表面的细菌，减小细菌污染培养基的可能性；同时，不对外植体进行搅碎的操作，能够减少破碎细胞的数量，以便降低细菌污染外植体的可能性，在后期的培养中，细菌的数量少，难以对培养基中的外植体起到污染、损害的作用，以利于外植体正常增殖，提高了实验成功的可能性，利于大批量商业化生产。
一种南方红豆杉组织培养种苗繁育方法

[发明专利]一种蝴蝶兰组织培养中外植体消毒的方法-CN201711204997.2在审
发明人：李洁;陈丽妍 -专利权人：佛山市恒爱网络科技有限公司
申请日： 2017-11-27 - 公布日： 2018-02-23 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种蝴蝶兰组织培养中外植体消毒的方法，包括清洗干净外植体表面，得到清洗后外植体；将所述清洗后外植体浸泡在75％的酒精中，在第一设定温度条件下超声波震荡第一预设时间，得到第一预处理外植体；将所述第一预处理外植体浸泡在2％‑4％的NaClO溶液中，在所述第一设定温度条件下超声波震荡第二预设时间，得到第二预处理外植体；将所述第二预处理外植体浸泡在无菌水中，在所述第一设定温度条件下超声波震荡第二预设时间，得到第三预处理外植体；无菌水冲洗所述第三预处理外植体，得到消毒后外植体。本发明外植体清洁效果显著且外植体存活率高，达到了提高清洁效果及降低损伤率的技术目的。
一种蝴蝶兰组织培养中外消毒方法

[发明专利]一种组织培养中外植体消毒的方法-CN201610916689.1在审
发明人：耿冠宇;张素贤;吴慧;张云龙;杨小兵 -专利权人：定州市绿谷农业科技发展有限公司
申请日： 2016-10-21 - 公布日： 2017-05-10 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明实施例公开了一种组织培养中外植体消毒的方法，包括清洗干净外植体表面，得到清洗后外植体；将所述清洗后外植体浸泡在70％的酒精中，在第一设定温度条件下超声波震荡第一预设时间，得到第一预处理外植体；将所述第一预处理外植体浸泡在5％‑10％的NaClO溶液中，在所述第一设定温度条件下超声波震荡第二预设时间，得到第二预处理外植体；将所述第二预处理外植体浸泡在无菌水中，在所述第一设定温度条件下超声波震荡第二预设时间，得到第三预处理外植体；冲洗所述第三预处理外植体，得到消毒后外植体。
一种组织培养中外消毒方法

[发明专利]一种拟小叶喇叭藻假根外植体的消毒方法-CN201310555178.8无效
发明人：苏建丽 -专利权人：青岛文创科技有限公司
申请日： 2013-11-11 - 公布日： 2014-03-26 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种拟小叶喇叭藻假根外植体的消毒方法，拟小叶喇叭藻留取假根作为组织培养用的外植体，用毛刷将外植体上附着的杂藻等附着物清除干净后，将外植体置于浓度为1～5%的抗生素中浸泡5～8h，然后再将外植体取出，于碘化钾溶液中浸泡2～5min，再将外植体取出，于聚维酮碘中消毒1～3min，最后用冷却的过滤高压灭菌海水冲洗干净。本发明减少抗生素的使用浓度和使用时间，避免外植体形成抗药性；同时结合碘化钾和聚维酮碘的消毒效果，既可以杀死外植体表面和内部的细菌或真菌，又可以避免消毒剂对外植体造成不可恢复的伤害，经本发明方法，可以获得85%无菌、可行的假根外植体。
一种小叶喇叭假根外植体消毒方法

[发明专利]一种芫花茎段外植体初代组织培养方法-CN201710176228.X有效
发明人：张虎;许建民;潘静霞;宋微 -专利权人：江苏农林职业技术学院
申请日： 2017-03-23 - 公布日： 2019-03-15 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种芫花茎段外植体初代组织培养方法，包括如下步骤：(1)芫花外植体的选取：采集芫花当年生枝条，去除全部叶片，剪截成带腋芽茎段作为外植体；(2)芫花外植体的处理：将外植体用洗衣粉溶液浸泡洗涤，接着用流水冲洗，进行消毒处理，接入芫花茎段外植体初代组织培养的培养基中；(3)芫花外植体的培养：将接入初代培养基中的外植体置于培养室的培养架进行光照培养，直至诱导丛生芽萌发。本发明采用茎段外植体诱导丛生芽，可以简单、快捷的获得芫花组培苗，培养周期明显缩短，培养成功率明显提高，并且萌芽率高，玻璃化率低。
一种芫花茎段外植体初代组织培养方法

[发明专利]一种降低芍药组织培养中外植体污染的方法-CN202010314221.1在审
发明人：张利;敖青霞;姜媛媛;赵茂俊;倪苏;王龙;胡佳;冯均;周劲;余燕;王海平;吴金勇;陈欢 -专利权人：四川农业大学
申请日： 2020-04-20 - 公布日： 2020-09-01 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：一种降低芍药组织培养中外植体污染的方法，采集芍药幼嫩部位进行低温处理；低温处理后的芍药外植体使用洗洁精浸泡后流水冲洗；冲洗完毕后的芍药外植体，浸泡在多菌灵和青霉素钠混合溶液中并置于摇床；浸泡后的芍药外植体由75％酒精消毒，再以0.1％升汞消毒进行表面消毒；消毒后的芍药外植体在含有益培灵的培养基中培养；本发明能有效降低芍药组织培养中的污染，且芍药外植体存活率较高，实用性、推广性强。
一种降低芍药组织培养中外污染方法

[发明专利]口杯法便捷外植体灭菌的方法-CN201110202739.7有效
发明人：王罡;季静;郑丽红;关春峰 -专利权人：天津大学
申请日： 2011-07-20 - 公布日： 2011-12-28 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明提供的是一种简便的用氯气对外植体灭菌的方法。操作步骤是将有干燥外表皮包裹的外植体放在普通口杯的网兜中，口杯中先后倒入次氯酸钠溶液和浓盐酸溶液产生氯气时，外植体便处在氯气环境中进行灭菌且与次氯酸钠溶液和浓盐酸溶液是分隔开的，灭菌适当时间后就得到无菌的外植体该方法的优势为：相比用次氯酸钠或升汞等直接浸泡灭菌，该方法对外植体的伤害更小、灭菌更彻底；相比将氯气和外植体放入干燥器中灭菌，该方法操作更简便，避免了灭菌后的外植体从干燥器中拿到超净台时染菌。用该方法对外植体灭菌的整个过程只需普通口杯、次氯酸钠溶液和浓盐酸溶液，数小时后就可以达到理想的灭菌效果，操作简便。
口杯便捷外植体灭菌方法

[发明专利]从动物细胞系和/或组织外植体生产、分离和/或提取胶原蛋白和/或明胶-CN202180079546.9在审
发明人： S·麦克尔逊;K·范德森-赫斯普;R·贝当古;A·伊夫 -专利权人：杰拉泰克公司
申请日： 2021-10-08 - 公布日： 2023-08-04 - 主分类号： C12N15/00 文献下载
摘要：本文公开了建立和/或培养动物(连续)细胞系的方法、设计和/或基因修饰动物(连续)细胞系的方法、从动物(连续)细胞系中分离胶原蛋白的方法、为了应用修饰和/或基因设计胶原蛋白的DNA序列和/或增加动物细胞中胶原蛋白产量的方法和通过材料和/或工艺的使用从培养动物外植体中提取胶原蛋白的方法。在优选实施例中，所述动物是水母并且动物外植体是水母外植体、水母息肉外植体、水母美杜莎外植体或海绵外植体。
动物细胞系组织外植体生产分离提取胶原蛋白明胶

[发明专利]丹参组织培养中愈伤组织诱导工艺-CN201710498169.8在审
发明人：巢晓峰;盛益龙 -专利权人：常州市孟河双峰中草药科技有限公司
申请日： 2017-06-26 - 公布日： 2017-09-08 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明公开了丹参组织培养中愈伤组织诱导工艺，包括外植体取样、外植体消毒、外植体处理、外植体接种、外植体培养等步骤，与现代组织培养中愈伤组织诱导培养相比，本发明的优势在于，本发明通过优化丹参组织培养过程中愈伤组织的诱导工艺，提高丹参外植体愈伤组织诱导速率、长势、质地等；NAA和2,4‑D浓度降低，有利于愈伤组织诱导率增加，培养条件优化，愈伤组织增值生长旺盛，整体愈伤组织诱导技术工艺优化，使得诱导出的愈伤组织质地紧密，颜色黄绿色
丹参组织培养中愈伤组织诱导工艺

[发明专利]一种以花梗为外植体的花椰菜高效遗传转化方法-CN202210311649.X有效
发明人：盛小光;顾宏辉;虞慧芳;王建升;沈钰森;赵振卿 -专利权人：浙江省农业科学院
申请日： 2022-03-28 - 公布日： 2023-04-07 - 主分类号： C12N15/84 文献下载
摘要：本发明公开了一种以花梗为外植体的花椰菜高效遗传转化方法，该方法包含：(1)花梗外植体的选取：以松散型花椰菜作为供体植株，选取横径在0.3～0.8cm的花梗作为外植体；(2)外植体的灭菌；(3)外植体的预培养；(4)外植体的浸染；(5)外植体与菌液共培养；(6)外植体延迟培养；(7)外植体筛选培养；(8)抗性芽的生根培养；(9)再生植株的阳性检测。本发明的方法首次建立了以花椰菜花梗为外植体的高效遗传转化，结合PCR检测和GUS染色结果，遗传转化植株阳性率达到了10～15％，在花梗芽再生过程中，不需要愈伤组织的诱导，可以直接再生出芽，大大缩短了芽再生所需时间
一种花梗外植体花椰菜高效遗传转化方法

[发明专利]一种远志植物的茎根扦插方法及设备-CN202211713726.0在审
发明人：吴昌娟;田洪岭;郭淑红;裴帅帅;王秋宝;左宪强;张强;高金虎 -专利权人：山西农业大学经济作物研究所
申请日： 2022-12-27 - 公布日： 2023-03-28 - 主分类号： A01G2/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种远志植物的茎根扦插方法，包括以下步骤：茎根选择，选择当年生的带有尚未萌发腋芽的半木质化枝条，切取至少带1个节间茎段作为外植体；茎根处理：将外植体按序浸泡在消毒液与营养液中各一段时间；扦插基质挑选：按照外植体的存活条件选择合适的扦插基质，并对扦插基质进行消毒；扦插栽培：将消毒后的扦插基质加入到培养基中，加入到外植体的栽培区域露出即可，并将消毒后外植体插入栽培区域；插后管理：将插好外植体的培养基置于遮阳的环境中；能够减少外植体根部腐烂的可能，且能够将聚集在外植体的根部的多余水分单独收集，在喷淋机构的喷淋作用下将多余的水分重新导入到培养皿中进行浇灌，实现了水体的循环利用。
一种远志植物扦插方法设备

[发明专利]一种蒙古栎的组织培养方法-CN202211586983.2在审
发明人：任俊杰;李迎超;张卫强;刘朝华;张桂芳;殷小娟;张婉莹;邢学丁;于水情;庞新博 -专利权人：河北省洪崖山国有林场（河北雄安新区白洋淀上游规模化林场）
申请日： 2022-12-10 - 公布日： 2023-03-07 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：一种蒙古栎的组织培养方法包括以下步骤：外植体的选择、外植体的灭菌处理、外植体的诱导培养、外植体的增殖培养、外植体的生根培养、无菌苗的炼苗驯化。本发明通过在外植体的灭菌处理中采用洗洁精浸泡、75％酒精擦拭、0.1％氯化汞消毒、无菌水冲洗等前期消毒手段，对外植体的灭菌效果更好，保证培养期间避免出现受污染、褐化、黄化等问题，提高蒙古栎的组织培养的效果
一种蒙古组织培养方法

[发明专利]一种木荷大树离体培养中抑制外植体褐变的方法-CN201510394239.6在审
发明人：蒋泽平 -专利权人：江苏省林业科学研究院
申请日： 2015-07-07 - 公布日： 2015-11-11 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种抑制外植体褐变的领域，特别是一种木荷大树离体培养中抑制外植体褐变的方法。它是通过外植体预处理以及调节培养基的硬度、基本培养基的类型、及添加种类和浓度不同的褐变抑制剂来抑制在木荷大树离体培养中外植体的褐变。采用这种抑制外植体褐变的方法后，可以有效地抑制木荷大树离体培养中外植体的褐变，将其褐变对外植体的影响降到最低，保证了外植体的生长分化，也保证了组织培养的成功。
一种大树培养抑制外植体褐变方法

[发明专利]一种非洲菊快繁培养和周年生产鲜花的方法-CN201810333681.1在审
发明人：何素芬;钟栎;杨静;周书兰 -专利权人：四川格睿园林科技有限公司
申请日： 2018-04-13 - 公布日： 2018-10-09 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种非洲菊快繁培养和周年生产鲜花的方法，包括以下步骤，(a)选取茎尖作为外植体，冲洗干净，用70％酒精浸泡外植体15分钟，再用0.1％升汞+0.5％吐温20的混合溶液对外植体消毒10分钟，再用无菌水冲洗5次，再将外植体接种在初代培养基中；(b)外植体长出1‑2个不定芽后，将外植体转移至新的初代培养基中继续培养；(c)不定芽的长度生长至2‑3cm时，将不定芽与外植体分离，在继代培养基中培养(d)将苗高在3‑5cm的不定芽切割下来，转移至生根培养基中培养，将长出2‑5条不定根的单株苗从生根培养基中取出，再假植在练苗基中，再定植在大棚中。
外植体不定芽初代培养基生根培养基周年生产非洲菊快繁继代培养基无菌水冲洗混合溶液酒精浸泡不定根单株苗鲜花大棚定植假植茎尖苗高吐温植体冲洗接种切割取出消毒生长

[发明专利]北美红枫的育苗方法-CN201911036350.2在审
发明人：丁增成;袁应菊;曹雨薇 -专利权人：安徽东方金桥农林科技股份有限公司
申请日： 2019-10-29 - 公布日： 2019-12-17 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种北美红枫的育苗方法，依次包括以下步骤：每年4月间，在无太阳的天气中，采摘取刚展叶的金脉红作为外植体；将采摘回来的外植体放置于自来水下冲洗，冲洗完成后沥干水分，再将外植体的嫩叶去掉丢弃，用切刀在外植体的外表皮上划出十字形切口；把外植体放置于酸性洗洁精溶液中浸泡，取出后风干，送入超净工作台，在超净工作台上，用酒精清洗、无菌水清洗、升汞进行消毒、用无菌水再清洗；将外植体接入培养基中，放入培养室中培养，获取无菌苗。
外植体冲洗采摘十字形切口无菌水清洗洗洁精溶液酒精清洗培养基出苗率培养室外表皮无菌苗无菌水风干工作台放入红枫沥干嫩叶切刀展叶丢弃浸泡清洗取出育苗自来水消毒太阳天气

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