本发明提供一种双佐剂用于生产灭活疫苗的制备方法，将提取的病毒液加入以百分比配制佐剂1和佐剂2，佐剂1氢氧化铝胶的用量为1-50％；佐剂2Montanide ISA 206佐剂的用量为1-50％或用氢氧化铝胶佐剂1-50％、白油1-50％、吐温-80为1-10％、司盘-20为1-10％：经复合，将佐剂1充分搅拌、吸附静置沉淀，弃去上清液，再加入佐剂2乳化即可获取灭活疫。采用双佐剂用于生产配制口蹄疫O型灭活疫苗、口蹄疫O型、亚洲1型二价灭活疫苗；口蹄疫O型、亚洲1型和A型三价灭活疫苗；A型单价灭活疫苗与常规206佐剂配制的口蹄疫O型灭活疫苗；口蹄疫O型、亚洲1型二价灭活疫苗；口蹄疫O型、亚洲1型和A型三价灭活疫苗；铝胶佐剂配制的A型单价灭活疫苗进行免疫效果更好。
