本发明公开了一种过氧化氢酶突变体及其应用,所述突变体至少在初始型过氧化氢酶氨基酸序列的下列位置之一发生了突变:第67位异亮氨酸突变为苯丙氨酸、第102位蛋氨酸突变为亮氨酸、第200位缬氨酸突变为苯丙氨酸、第251位丙氨酸突变为丝氨酸,所述初始型过氧化氢酶氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。与初始过氧化氢酶BmCAT相比,过氧化氢酶突变体氨基酸序列发生了替换,形成的突变体显著提高了催化过氧化氢的能力。在利用乳酸氧化酶生物合成丙酮酸的过程中,采用表达该过氧化氢酶突变体的全细胞催化消除反应过程中产生的过氧化氢,酶的用量少,过氧化氢的消除率显著提高,产物丙酮酸的摩尔转化率最高达为99.7%,具有很高的工业化应用前景