本发明涉及标准品制备,具体讲,涉及一种重组人谷丙转氨酶蛋白标准品和重组人谷草转氨酶蛋白标准品及其制备方法。编码重组人谷丙转氨酶蛋白标准品的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示,编码重组人谷草转氨酶蛋白标准品的核苷酸序列如SEQ ID NO:6所示。本发明还涉及重组人谷丙转氨酶蛋白标准品或重组人谷草转氨酶蛋白标准品的制备方法,包括:目的基因的获得、构建基因表达菌株、目的蛋白的表达与纯化、基质血清的处理、标准品的评价、标准品的定值以及不确定度的评估。本发明通过基因重组的技术制备出人谷丙转氨酶和人谷草转氨酶标准品,可用于临床检验实验室以及试剂盒的质量控制。
本发明属于分子生物学技术领域,具体的说是一种坛紫菜谷草转氨酶基因及其应用。谷草转氨酶(GOT)基因为序列表SEQ ID No.1中的碱基所示。本发明基于坛紫菜转录组测序结果,从坛紫菜中克隆得到一种转录水平较高的谷草转氨酶(GOT)基因的cDNA序列,其开放阅读框(ORF)为1290bp,编码含429个氨基酸的蛋白质序列。