本发明公开了包括人类组织因子途径抑制因子的重组质粒及高表达人类组织因子途径抑制因子重组酵母菌,包括人类组织因子途径抑制因子的重组质粒,是以序列表SEQ IDNo.2、SEQ ID No.3所述序列为PCR引物,mTFPI-pPIC9为模板,扩增出人类组织因子途径抑制因子基因阅读框架,回收得序列表SEQ ID No.1所述的核苷酸序列,与pPIC9K加入T4连接酶进行反应,制成包括人类组织因子途径抑制因子的重组质粒本发明应用剂量效应原理,运用抗生素G418抗性,筛选出高表达人类组织因子途径抑制因子重组酵母菌。经高密度发酵,使菌种表达人类组织因子途径抑制因子量大大提高。
本发明提供了一种抗组织因子人源化抗体及制备的抗体偶联药物和应用,属于生物制药技术领域。本发明提供的抗组织因子人源化抗体,重链的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示,轻链的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。所述抗组织因子人源化抗体对组织因子具有高亲和力。本发明还提供一种抗体偶联药物,是所述抗组织因子人源化抗体和细胞毒药物偶联得到。基于抗组织因子人源化抗体对低表达和高表达组织因子的肿瘤细胞株均具有较高的亲和力和细胞内吞时间短特点,所述抗体偶联药物能快速达到肿瘤靶点发挥细胞毒性作用,同时能有效抑制肿瘤细胞的生长以及小鼠皮下瘤生长。