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[发明专利]一种利用细菌破胞酶液处理液加固粉质砂土及其沙化土的方法-CN201711237474.8在审
发明人：高玉峰;何稼;顾张翔;王丽亚;任杰 -专利权人：河海大学
申请日： 2017-11-30 - 公布日： 2018-05-18 - 主分类号： E02D3/12 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用细菌破胞酶液处理液加固粉质砂土及其沙化土的方法，其特征在于，利用包括细菌破胞酶液与对应无机胶结液处理液的细菌破胞酶液处理液，对粉质砂土和沙化土试样进行重复灌入处理4‑10次，可以将其强度提升至本发明对于粉质砂土和沙化土的处理，采用细菌破胞酶液相比单纯的细菌固化处理处理深度大大提升，固化程度更加均匀，处理过程简便易行，成本更加低廉，适用于实际工程易于操作。
一种利用细菌破胞酶液处理加固砂土及其沙化方法

[发明专利]一种亚硝酸还原酶的制备方法及应用-CN202110938894.9有效
发明人：杨忠华;袁林;丁俊辉;邹志成 -专利权人：武汉科技大学
申请日： 2021-08-16 - 公布日： 2023-05-12 - 主分类号： C12N9/06 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，尤其涉及一种亚硝酸还原酶的制备方法及应用。本发明提供了一种新的制备亚硝酸还原酶的方法，具体为使用不动杆菌在含有亚硝酸盐的发酵培养基中培养，培养一定时间后，离心或过滤收集菌体，将菌体混悬于破胞抽提液中破胞，离心或利用膜分离得到破胞上清液即为含亚硝酸还原酶的粗酶液本申请提供的方法，得到的亚硝酸还原酶粗酶液中，每毫升粗酶液所产酶活性高于2000U(酶活单位)，甚至达到2500U，显著高于现有技术的水平，为亚硝酸还原酶的工业化生产提供了更高效的技术方法，且本发明提供的制备方法工艺简单
一种亚硝酸还原酶制备方法应用

[发明专利]利用酵母胞内表达制备黄曲霉尿酸氧化酶的方法-CN202210026351.4在审
发明人：冯军;路建光;王亚鹏;赵文杰;于敏;黄宗庆;赵伟;化浩举;杜萱 -专利权人：正大天晴药业集团股份有限公司;上海医药工业研究院;上海多米瑞生物技术有限公司
申请日： 2022-01-11 - 公布日： 2022-07-19 - 主分类号： C12N9/06 文献下载
摘要：本发明涉及一种利用酵母胞内表达制备黄曲霉尿酸氧化酶的方法，包括在诱导重组酵母胞内表达黄曲霉尿酸氧化酶后，使菌体置于破胞缓冲液中破碎细胞；其中所述破胞缓冲液包含添加剂，所述添加剂选自二硫代苏糖醇、三(2‑本发明通过优化匀浆缓冲液抑制酵母胞内蛋白的降解，保证了目标蛋白的完整性；还能改善破胞条件如降低匀浆压力，从而降低了生产能耗，降低了对于设备的要求。
利用酵母表达制备黄曲霉尿酸氧化酶方法

[发明专利]一种微生物低温破胶酶的制备及其应用方法-CN202010529673.1在审
发明人：雷光伦;褚程程;姚传进;达祺安;李蕾;曲晓欢;孟凡怡 -专利权人：中国石油大学（华东）
申请日： 2020-06-11 - 公布日： 2020-09-04 - 主分类号： C12N9/24 文献下载
摘要：本发明提供了一种微生物低温破胶酶的制备及其应用方法，属于油田压裂液破胶剂技术领域，针对现有氧化型破胶剂在温度低于50℃的地层中存在破胶效果不理想和破胶产物多导致地层导流能力下降以及破胶不可控等问题，本发明选用解淀粉芽胞杆菌制备微生物低温破胶酶，这种破胶酶可在温度低于50℃时使胍胶水基压裂液破快速彻底破胶、降低压裂液残渣对地层的伤害，同时破胶酶具有易降解，不会造成环境污染，适用范围广，对地层伤害小，返排率高，驱油效果好，制备方法简便，成本低等优点
一种微生物低温破胶酶制备及其应用方法

[发明专利]一种双荧光筛选β-丙氨酸合成酶的方法-CN201910071013.0有效
发明人：孙东昌;裘娟萍;毛旭丹;王琳;陈一扬 -专利权人：浙江工业大学
申请日： 2019-01-25 - 公布日： 2022-06-21 - 主分类号： C12Q1/527 文献下载
摘要：本发明公开了一种双荧光法筛选β‑丙氨酸合成酶的方法，将荧光报告基因与β‑丙氨酸合成酶基因共同导入宿主菌中，接种含阿拉伯糖的基本盐培养基，在30～37℃诱导培养后，获得发酵液；取发酵液冻融破胞，取破胞液即为粗酶液；取粗酶液加入L‑天冬氨酸，于37℃条件下静置2h进行转化反应将底物转化为β‑丙氨酸，取转化液在吸收波长355nm和发射波长445nm的条件下测定荧光值；取发酵液在吸收波长395nm和发射波长509nm的条件下测定荧光值，筛选获得高活力β‑丙氨酸合成酶；本发明体系操作简便、酶活测量稳定、酶活检测灵敏度高等优点，在β‑丙氨酸合成酶定向改造方面具重要的应用价值。
一种荧光筛选丙氨酸合成方法

[发明专利]一种制备及快速分离胞内单宁酶的方法-CN201310593724.7有效
发明人：杨洋;严东;赵芬芬;叶琴;马万良;胡振兴 -专利权人：广西大学
申请日： 2013-11-22 - 公布日： 2014-03-05 - 主分类号： C12N9/18 文献下载
摘要：本发明涉及一种制备及快速分离胞内单宁酶的方法，属于生物发酵和生物分离工程领域。本发明公开的一种制备及快速分离胞内单宁酶的方法，首先配置液体发酵培养基，灭菌、冷却；往冷却后的培养基内接入无花果曲霉孢子悬液进行液体发酵，制得无花果曲霉胞内单宁酶；发酵结束后，将发酵液冷冻离心，收集湿菌体，通过超声和液氮研磨进行无花果曲霉细胞破壁，离心收集粗酶液；对离心后的粗酶液进行单宁酶纯化。本发明采用液体发酵能制备胞内单宁酶，发酵条件较好控制，不易污染杂菌，生产效率高，能随时检测酶活力，且检测过程中杂质干扰小。采用液体发酵方式研究了细胞内产生的单宁酶的性质，为单宁酶的综合开发提供参考。
一种制备快速分离单宁方法

[发明专利]一种高耐受度的环保微生物改性剂及其制备方法和应用-CN202111461157.0有效
发明人：郑俊杰;徐智韬;陈一航;蒋文松;郑志善;田聪;曾晨 -专利权人：华中科技大学
申请日： 2021-11-30 - 公布日： 2023-01-06 - 主分类号： C04B41/62 文献下载
摘要：本发明属于裂缝修复相关技术领域，其公开了一种高耐受度的环保微生物改性剂及其制备方法和应用，方法包括：将巴氏芽孢杆菌或上一代细菌菌液富集培养后的细菌悬浮液进行离心处理获得细菌沉淀物和细菌上清液；将部分细菌沉淀物依次进行破胞处理和离心处理，得到破胞液；将细菌上清液、另一部分细菌沉淀物以及破胞液混合得到菌酶混合物；在液体培养基中接种菌酶混合物，培养后获得细菌菌液；将细菌菌液与第一浓度尿素混合得到试剂A液；将钙源溶液和第二浓度尿素混合得到试剂B液。
一种耐受环保微生物改性及其制备方法应用

[发明专利]一种毕赤酵母细胞壁破碎的方法及其应用-CN202211077019.7在审
发明人：廖怡辉;陈思龙;符磊 -专利权人：武汉华美生物工程有限公司
申请日： 2022-09-05 - 公布日： 2022-12-20 - 主分类号： C12N1/06 文献下载
摘要：本申请涉及生物技术领域，尤其涉及一种毕赤酵母细胞壁破碎的方法及其应用；所述方法包括：混合毕赤酵母细胞和酶并进行酶解破壁处理，以使毕赤酵母细胞的破壁率至少为50％，得到细胞混合液；在于或等于基准温度的低温条件下，对细胞混合液进行均质破壁处理，以进一步破碎细胞壁；所述应用包括将所述方法用于对酵母细胞的胞内蛋白的破壁处理中；采用酶对酵母细胞进行酶解，使得50％以上的酵母细胞被破碎，并使得未破碎的酵母细胞的细胞壁变薄，再在较基准温度较低的温度条件下，对未破碎酵母细胞进行均质破壁处理，不仅使得酵母细胞被进一步的破碎，还能避免破碎出的胞内蛋白被降解，能在保证产品纯度的条件下对毕赤酵母细胞的破壁效率的有效提高。
一种酵母细胞壁破碎方法及其应用

[发明专利]一种裂殖壶菌发酵液破壁提取其胞内油脂的方法-CN201410183699.X无效
发明人：陈礼毅;陈水荣;林杰 -专利权人：厦门汇盛生物有限公司
申请日： 2014-05-04 - 公布日： 2014-08-13 - 主分类号： C11B1/00 文献下载
摘要：本发明公开一种裂殖壶菌发酵液破壁提取其胞内油脂的方法，先将富含DHA的裂殖壶菌发酵液投入破壁罐；接着用食品级酸或碱调其pH值至6.0～8.0，控制温度35～60℃，并添加裂殖壶菌发酵液重量的1.0～4.0%复合酶，保温搅拌酶解3.0～5.0小时并灭活；酶解后的发酵液直接过砂磨机砂磨，使发酵液中的单细胞壁/膜彻底破裂；然后破壁液经高速离心机分离，获取油相即为富含DHA初级油脂。本发明能够高效破壁提取富含DHA初级油脂，收率可达到85%以上，其中DHA含量在30～63%，经济、环保、实用，并能在工业上有效应用。
一种裂殖壶菌发酵液破壁提取油脂方法

[发明专利]一种生产腺苷蛋氨酸的方法-CN200810225881.1无效
发明人：徐明波;吴彦卓;陈献华;秦富景;赵晶晶;刘迎 -专利权人：北京双鹭药业股份有限公司
申请日： 2008-11-05 - 公布日： 2010-06-16 - 主分类号： C12P13/00 文献下载
摘要：其特征在于：首先利用基因工程技术获得表达SAM的高效基因工程菌，利用发酵技术发酵，在工程菌中表达SAM和SAM合成酶，通过破胞提取胞内的SAM和SAM合成酶，然后利用胞内提取的SAM合成酶再在胞外进行胞外酶促合成反应生产即一次发酵可同时获得胞内胞外两部分SAM产物，大大提高了单位发酵液的产量。即本发明为低成本大规模生产药用腺苷蛋氨酸提供一种新方法。
一种生产腺苷蛋氨酸方法

[发明专利]一种利用生物催化剂催化转化合成苯乳酸的方法-CN202210064093.9在审
发明人：祝铃钰;张莹;楼小玲;贠军贤 -专利权人：浙江工业大学
申请日： 2022-01-20 - 公布日： 2022-04-19 - 主分类号： C12P7/42 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用生物催化剂催化转化合成苯乳酸的方法，其特征在于所述的方法是以副干酪乳杆菌的破胞液为原料进行上样，以阴离子交换半疏水晶胶的堆积床层作为分离吸附介质，通过晶胶层析上样吸附，使所述破胞液原料中的活性酶充分吸附在阴离子交换半疏水晶胶上；然后将固载了活性酶的阴离子交换半疏水晶胶做为生物催化剂，加入至含有苯丙酮酸和NADH辅酶的反应液中进行生物转化反应，生成苯乳酸。
一种利用生物催化剂催化转化合成乳酸方法

[发明专利]一种恶臭假单胞菌株及其在制备羟基乙酸中的应用-CN200910154126.3无效
发明人：林春娇;杨立荣;吴坚平;徐刚 -专利权人：浙江大学
申请日： 2009-11-05 - 公布日： 2010-05-12 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明公开了一种恶臭假单胞菌株及其在制备羟基乙酸中的应用，该菌株命名为恶臭假单胞菌株CA15，可用于制备羟基乙酸。本发明使用恶臭假单胞菌株CA15制备羟基乙酸的方法主要包括如下步骤：添加诱导剂对恶臭假单胞菌CA15进行诱导培养，离心获得细胞或者在获得细胞后进一步经过破胞提取粗酶；以获得的静息细胞或者粗酶液为催化剂，在缓冲溶液中添加氯乙酸盐作为底物进行反应，然后从反应液中收集羟基乙酸。
一种恶臭假单胞菌株及其制备羟基乙酸中的应用

[发明专利]一种产油脂酵母细胞的快速破壁方法-CN201610017806.0在审
发明人：车春玲 -专利权人：济南开发区星火科学技术研究院
申请日： 2016-01-12 - 公布日： 2016-04-13 - 主分类号： C12N1/06 文献下载
摘要：本发明公开了一种产油脂酵母细胞的快速破壁方法，其通过选择生长稳定期的产油脂酵母细胞，在经离心振荡后的酵母悬浮液中加入复合酶和破壁剂，最后使用高压均质破碎机进行酵母细胞破壁。本方法所用的复合酶和破壁剂对酵母细胞壁的快速破碎有显著的促进作用，且胞内油脂分离回收率高，适合各类产油脂酵母细胞的快速破壁。
一种油脂酵母细胞快速方法

[发明专利]一种利用微生物加固液防治桥台跳车的方法及其微生物加固液-CN201711238469.9在审
发明人：高玉峰;何稼;顾张翔;汤昕怡;王丽亚 -专利权人：河海大学
申请日： 2017-11-30 - 公布日： 2018-05-08 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明的一种利用微生物加固液防治桥台跳车的方法及其微生物加固液，采用微生物菌粉、处理粉、水，其微生物菌粉由细菌破胞酶液经过干燥后获得，其处理粉由无机胶结液处理液经过干燥后获得，其细菌破胞酶液由富集培养的好氧型细菌液加入缓冲液后超声波破碎获得其方法：将微生物菌粉运至现场后与处理粉混合搅拌，加入水后获得微生物加固液；用微生物加固液对桥台桥背土体进行多次加固处理。
一种利用微生物加固防治桥台方法及其

[发明专利]一种利用热稳定融合蛋白制备多肽的方法-CN201910751657.4有效
发明人：刘懿 -专利权人：成都英普博集生物科技有限公司
申请日： 2019-08-14 - 公布日： 2022-02-18 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：针对目前各种大肠杆菌工程菌表达的融合蛋白制备工艺中的缺点，特别是菌体破胞这一步的难点，开发了一种适合工业化大生产的解决方案。其主要特征在于，发酵结束后，在不需要离心收集菌体的前提下，利用发酵液直接高温热破胞的方式达到高效的菌体破胞效果，再经过碟片离心机离心获得含有重组融合蛋白的上清液。然后利用膜过滤和膜浓缩常规流程获得浓缩后的重组融合蛋白溶液，然后经酶切获得目标多肽。该工艺设备要求低，工艺流程简单、成本低，非常适合工业化放大生产。
一种利用稳定融合蛋白制备多肽方法

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