本发明属于水产生物技术领域,公开了一种用于中华鳖遗传性别鉴定的分子标记及方法,采用RAD技术对中华鳖雌雄个体进行测序,筛选雌雄特异性片段;根据雌雄特异性片段进行雌性基因组Walking,获得6532bp的特异性片段SEQ ID NO:1;基于特异性片段设计引物,进行引物筛选和验证获得特异性引物;采集中华鳖裙边组织,提取中华鳖基因组DNA,利用引物对在中华鳖个体中进行扩增;扩增结果进行电泳检测;进行遗传性别的鉴定本发明解决了目前尚未见到中华鳖性别特异性标记用于遗传性别的鉴定,具有原创性。本发明准确鉴定成功率达到100%。
本发明公开了松材线虫的特异性PCR检测引物、检测方法及检测试剂盒。本发明以松材线虫的Bx‑tlp‑1基因为靶标设计了多对引物,经过筛选发现SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的引物对扩增松材线虫和拟松材线虫DNA,结果松材线虫有特异性片段,该片段大小为755bp,而拟松材线虫无特异性片段;本发明进一步利用该特异性引物对扩增野外采集的媒介天牛组织DNA,结果扩增出松材线虫的特异性片段。本发明所筛选出的PCR特异性引物对具有良好的特异性和灵敏度,能够准确的检测媒介天牛是否携带松材线虫,并在野外对媒介天牛实现快速检测。