本发明公开了一种用于鉴别川贝母真伪或用于检测川贝母掺伪程度的PCR引物和方法。该PCR引物包括川贝母真品鉴别引物和/或川贝母伪品鉴别引物;其中,川贝母真品鉴别引物以川贝母ITS1区的第75位碱基“C”为3'未端,川贝母伪品鉴别引物则以伪川贝母ITS1区的第75位碱基“T”为3'未端,本申请在两种引物3'端第3、9、10位碱基处均引入碱基错配,获得如SEQ ID No.1或2的川贝母真品鉴别引物和如SEQ ID No.3或4的川贝母伪品鉴别引物。采用本申请的PCR引物对川贝母样品进行鉴定,能够准确快捷的鉴别出川贝母真伪或检测出川贝母掺伪程度。