本发明提供了一种预防和/或治疗非酒精性脂肪肝的片仔癀小RNA、小RNA组合物及制备方法和用途,属于生物医药技术领域。本发明小RNA是如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列,小RNA组合物是由SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列为组分组成。本发明从片仔癀中提取得到的3种小RNA均可通过摄食可被有效吸收,并稳定存在,发挥预防和/或治疗非酒精性脂肪肝的作用。并且,将这3种小RNA组合得到的组合物可以有效抑制脂肪堆积,对非酒精性脂肪肝有良好的预防和/或治疗效果。本发明研究发现片仔癀中利于预防和/或治疗非酒精性脂肪肝的小RNA,这对于片仔癀的进一步研发和质量控制均具有重要意义。