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- [发明专利]将外源基因导入盐藻的方法-CN200910248436.1无效
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柴晓杰;靳非
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大连水产学院
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2009-12-15
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2010-06-02
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C12N15/79
- 本发明公开一种操作简单、省时快捷、不需要昂贵的仪器设备和试剂、转化率高及外源基因能稳定表达的将外源基因导入盐藻的方法:取盐藻细胞采用105个/mL接种量接种于培养液中,在温度为26℃的条件下,16h光照/8h黑暗交替静置培养5天,光照强度为100μEm-2sec-1;取10mL藻液4000rpm离心10min取沉淀,用10mL TE缓冲液洗沉淀一次;将沉淀悬浮于1.2mL TE缓冲液,取1mL悬浮液与0.5mL 0.2mol/L醋酸锂混合得混合液;取10μL浓度为600μg/mL表达外源基因的质粒DNA和0.1mL上述混合液,在29℃水浴中保温30min;加0.1mL 70%聚乙二醇29℃保温1h;加1.5mL无菌海水4000rpm离心10min;将沉淀悬浮于20mL培养液中于26℃中孵育48h。
- 将外源基因导入方法
- [发明专利]一种将外源基因转入灵芝的方法-CN01129744.1无效
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李刚;李宝健
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李刚;李宝健
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2001-10-11
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2002-07-17
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C12N1/14
- 本发明公开了一种将外源基因转入灵芝的方法,用溶壁酶将灵芝菌丝体酶解成原生质体,所制备的原生质体经精制、纯化后,利用PTC转化缓冲液,以纯化的灵芝原生质体作为受体细胞,将含有外源基因的真菌表达载体转入灵芝原生质体中本方法的转化效率可达60-100个转化子/μgDNA.107转化子,能高效地将外源基因转入并整合到灵芝基因组DNA中,并使外源基因得到高效表达和稳定的遗传,从而建立了灵芝的高效转化系统;这将为利用基因工程技术改良灵芝的药用品质奠定基础
- 一种将外源基因转入灵芝方法
- [发明专利]核小体转移性载体肽片段及其利用-CN202210897111.1在审
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贝利小林菜穗子;吉田彻彦
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东亚合成株式会社
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2022-07-28
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2023-04-07
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C12N15/87
- 本发明提供高效地将目标外源物质从真核细胞的外部至少向该细胞的细胞质内(进而核小体内)导入的技术。这里公开的将目标外源物质从真核细胞的外部至少向该细胞的细胞质内导入的方法包括:(1)准备外源物质导入用构建体的工序,该外源物质导入用构建体具有由KKRTLRKKKRKKR、KKRTLRKRRRKKR、KKRTLRKRKRKKR和KKRTLRKKRRKKR的任意氨基酸序列构成的载体肽片段、和与该载体肽片段的N末端侧和/或C末端侧结合的外源物质;(2)将外源物质导入用构建体供给到包含目标真核细胞的试样中的工序;和(3)对供给了外源物质导入用构建体的试样进行孵育,将构建体导入该试样的真核细胞内的工序。
- 小体转移性载体片段及其利用
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