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[发明专利]负载羊膜固有干细胞的冻存活性羊膜微粒及其条件培养基与应用-CN201510435208.0有效
发明人：纪世召;郑勇军;肖仕初;夏照帆;李廷;王光毅;孙颖 -专利权人：中国人民解放军第二军医大学
申请日： 2015-07-22 - 公布日： 2018-11-23 - 主分类号： C12N5/073 文献下载
摘要：本发明涉及组织工程和医学创面修复技术领域，具体涉及负载羊膜固有干细胞的冻存活性羊膜微粒及其条件培养基与应用。本发明将废弃新鲜羊膜制备成微粒，采用无血清干细胞冻存液冻存在液氮中，在保留羊膜完整基质成份的同时，长期保留羊膜上皮细胞活性，而且可有效避免疾病传播。通过其收集制备的条件培养基能明显促进人表皮细胞、成纤维细胞、内皮细胞的趋化、迁移，动物移植发现活性羊膜微粒可通过调节炎症反应、促进血管化、加快上皮化等多条途径来改善创面愈合，而且羊膜基质可直接作为真皮替代物诱导真皮再生本发明制备的负载羊膜固有干细胞的冻存活性羊膜微粒及其条件培养基可为创面修复提供一种简单有效的方法。
负载羊膜固有干细胞活性微粒及其条件培养基应用

[发明专利]一种脱细胞软骨支架及其制备方法-CN201810009357.4在审
发明人：张建鑫;周新钦;杨帅;王川;朱天钢;刘尧;李恒 -专利权人：河南汇博医疗股份有限公司
申请日： 2018-01-02 - 公布日： 2018-04-24 - 主分类号： A61L27/56 文献下载
摘要：本发明提供一种脱细胞软骨支架及其制备方法，属于关节软骨技术领域。脱细胞软骨支架包括脱细胞软骨基质和钙磷化合物‑PLGA混合物以及接种于混合物上的干细胞诱导的软骨细胞。制备方法，包括如下步骤对关节软骨杀菌，除去关节软骨上的软骨膜，去除关节软骨上的细胞成分后干燥。将1‑3重量份的钙磷化合物、5‑10重量份的PLGA和氯化钠混合加热后，除去氯化钠。将1‑5重量份的脱细胞软骨基质、2‑8重量份的钙磷化合物‑PLGA静电纺丝。分离提取出脊髓液中的骨髓间充质干细胞，在培养基下诱导培养。将1‑5重量份的干细胞诱导的软骨细胞接种于支架载体。此制备过程无毒，脱细胞软骨支架为多孔结构，具有良好的骨诱导能力。
一种细胞软骨支架及其制备方法

[发明专利]细胞结构体及细胞结构体的制造方法-CN201680040735.4在审
发明人：中村健太郎 -专利权人：富士胶片株式会社
申请日： 2016-07-08 - 公布日： 2018-03-23 - 主分类号： A61L27/00 文献下载
摘要：本发明的课题在于提供一种能够在短时间内制造，并且具有规定以上的大小的细胞结构体及上述细胞结构体的制造方法。根据本发明，提供一种细胞结构体，该细胞结构体包含生物相容性高分子嵌段物及两种以上的细胞，且在多个细胞之间的间隙配置有多个生物相容性高分子嵌段物，其中，两种以上的细胞包含选自包括血管内皮细胞、心肌细胞、胰岛细胞、肝细胞、上皮细胞、内皮细胞、神经细胞、胚胎干细胞、诱导多能干细胞、角膜上皮细胞及视网膜色素上皮细胞的组中的至少一种第一细胞和选自包括间充质细胞、基质细胞、成纤维细胞、平滑肌细胞、成肌细胞、间充质干细胞、脂肪来源干细胞及脐带来源干细胞的组中的至少一种第二细胞。
细胞结构制造方法

[发明专利]一种基于人多能干细胞构建心脏类器官的方法-CN202210150888.1在审
发明人：吴福建;杨晓菲;李富荣 -专利权人：深圳市人民医院
申请日： 2022-02-18 - 公布日： 2022-05-06 - 主分类号： C12N5/077 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于人多能干细胞构建心脏类器官的方法。本发明提供了基于人的多能干细胞构建心脏类器官的方法，包括如下步骤：1)将离体人的多能干细胞在不进行水凝胶包裹的条件下成球培养，得到人多能干细胞球；2)将所述人多能干细胞球依次进行第一次分化培养、第二次分化培养和第三次分化培养，即得到心脏类器官；本发明方法构建的心脏类器官中的心肌细胞组成比例与人心脏接近，构建的心脏类器官心肌细胞比例为34.1％，构建的心脏类器官具有类腔室结构以及分泌细胞外基质ECM；心脏类器官跳动收缩正常。
一种基于多能干细胞构建心脏器官方法

[发明专利]丝蛋白水凝胶及其制备方法、应用-CN201911380244.6有效
发明人：吕强;杭颖婕;陈红 -专利权人：苏州大学
申请日： 2019-12-27 - 公布日： 2023-09-12 - 主分类号： C12N5/0735 文献下载
摘要：本发明利用不同生物材料对丝蛋白取向凝胶进行包被，调控材料同干细胞的相互作用强度，获得理想的细胞粘附效果，结合结构仿生设计，实现胚胎干细胞命运的体外控制，在无滋养层细胞和基本避免外源性生长因子使用的前提下，采用常规细胞培养手段实现胚胎干细胞的干性长期维持和体外扩增。本技术解决了现有胚胎干细胞技术要求苛刻，费用昂贵等问题，为胚胎干细胞的体外扩增提供了简单、经济且更为稳定的培养基质和技术方法。
蛋白凝胶及其制备方法应用

[发明专利]包含脂肪干细胞和明胶的生物材料及其制备方法-CN201980061659.9在审
发明人：丹尼斯·迪弗拉纳 -专利权人：诺瓦迪普生物科学股份公司
申请日： 2019-09-20 - 公布日： 2021-05-18 - 主分类号： C12N5/077 文献下载
摘要：本发明涉及一种生物材料，其包含脂肪干细胞(ASC)、细胞外基质和明胶。本发明还涉及用于制备生物材料的方法及其用途。
包含脂肪干细胞明胶生物材料及其制备方法

[发明专利]模拟骨髓环境培养造血干细胞的3D模型及其制备方法和应用-CN202011452050.5在审
发明人：刘中民;乐文俊;陈炳地;胡益辉;梅天笑 -专利权人：上海市东方医院（同济大学附属东方医院）
申请日： 2020-12-10 - 公布日： 2021-03-26 - 主分类号： C12N5/0789 文献下载
摘要：本发明公开了模拟骨髓环境培养造血干细胞的3D模型及其制备方法和应用，所述3D模型包括细胞培养基和胶原蛋白溶液；其中，细胞培养基包括：v/v为1％的青霉素/链霉素无血清干细胞基础培养基、100ng/mL重组人干细胞因子与现有技术相比，本发明具有以下优点：(1)所述3D模型首先将细胞加入胶原蛋白中促使细胞聚合，最大程度地模拟了造血干细胞在细胞外基质内的环境；(2)所述3D模型后续将细胞培养基加入含有干细胞的胶原蛋白中，能够很好地渗入胶原蛋白为细胞增殖提供营养；(3)所述3D模型保留了造血干细胞的多向分化能力，因此为造血干细胞的体外扩增提供了良好的应用前景。
模拟骨髓环境培养造血干细胞模型及其制备方法应用

[发明专利]一种脑脱细胞基质的制备方法-CN202210014806.0在审
发明人：刘昌胜;陈曦;张雪薇;王碧雪 -专利权人：华东理工大学
申请日： 2022-01-07 - 公布日： 2022-03-18 - 主分类号： A61L27/36 文献下载
摘要：本发明公开了一种脑脱细胞基质的制备方法，包括以下步骤：i)提取小鼠的脑作为脱细胞基质的原材料；ii)采用物理法、化学法和生物法对小鼠的脑进行脱细胞处理得到脑脱细胞基质。本发明的方法能够较好地保持生物组织的生物活性和完整性，保留了多种关键蛋白和因子，而且去细胞率高。基于此方法制备的脑脱细胞基质可用于构建复合生物支架、培养干细胞，并应用在创伤性脑损伤的修复与再生方面。
一种细胞基质制备方法

[发明专利]一种去蛋白脱钙骨基质植入型微载体的制备方法及应用-CN201410225274.0无效
发明人：张智勇;裴国献;邹继伟 -专利权人：中国人民解放军第四军医大学
申请日： 2014-05-26 - 公布日： 2014-08-20 - 主分类号： A61L27/36 文献下载
摘要：一种去蛋白脱钙骨基质植入型微载体的制备方法及应用，在制备组织工程材料方面的应用；制备方法为将牛皮质骨进行冷冻粉碎后，筛出粒径小于200um的骨颗粒，并对骨颗粒进行脱脂、脱钙和脱蛋白处理。本发明所得去蛋白脱钙骨基质植入型微载体的免疫原性低、细胞粘附率高。在静态培养条件下其所培养细胞的活性高、干细胞表型保持完整、且由于去除了脱钙骨基质中的蛋白活性成分，该类去蛋白脱钙骨基质颗粒在培养过程中将不会引起干细胞等目的细胞发生成骨分化；通过对BMSCs的动态培养实验证实，该微载体颗粒可用于动态悬浮培养条件，在适宜于细胞培养的搅拌速度下可顺利形成悬浮，其细胞粘附率较cytodex3稍高、扩增效率相仿。
一种蛋白脱钙骨基质植入载体制备方法应用

[发明专利]软骨脱细胞基质及其制备方法和用途-CN200910200056.0有效
发明人：张文杰;龚轶一;薛继鑫;周广东;崔磊;刘伟;曹谊林 -专利权人：上海国睿生命科技有限公司
申请日： 2009-12-07 - 公布日： 2011-06-08 - 主分类号： A61L27/38 文献下载
摘要：本发明公开了软骨脱细胞基质及其制备方法和用途。所述软骨脱细胞基质的厚度为1-30μm，且通过下述方法制备得到：(1)将动物软骨切为厚度为1-30μm的薄片；(2)将步骤(1)得到的薄片进行脱细胞处理。本发明还公开了组织工程化软骨移植物的制备方法，步骤为(a)将种子细胞接种于软骨脱细胞基质的一个表面上；(b)在接种有种子细胞的基质表面上覆盖另一片的软骨脱细胞基质；和(c)重复步骤(a)-(b)直至本发明提供的软骨脱细胞基质有10-30层，得到组织工程化软骨移植物；所述的种子细胞选自软骨细胞、骨髓基质干细胞hBMSCs、或其混合。
软骨细胞基质及其制备方法用途

[发明专利]一种适宜儿童使用的组织工程神经及其制备方法-CN202210469270.1在审
发明人：钱闯;李昊;王达辉 -专利权人：复旦大学附属儿科医院
申请日： 2022-04-28 - 公布日： 2022-08-30 - 主分类号： C12N5/079 文献下载
摘要：本发明提供了一种适宜儿童使用的组织工程神经及其制备方法，其特征在于，包括以下步骤：冻干脱细胞神经支架的制备；人脐带间充质干细胞的培养和诱导；支架‑细胞复合物的构建与动物实验；本发明中冻干脱细胞技术利用冻干复温过程在保持细胞外基质完整的同时破坏细胞壁结构，避免使用去污剂等有细胞毒性的试剂进行脱细胞的操作，保持细胞外基质的生物特性，本发明运用的种子细胞是人脐带间充质干细胞，这种细胞已经被证明有施万细胞的分化能力，对于儿童多见的产瘫病人而言，这种细胞较病人其他部位的细胞更容易获取
一种适宜儿童使用组织工程神经及其制备方法

[发明专利]肌营养不良症嵌合细胞和治疗肌营养不良症的方法-CN201680033733.2在审
发明人：马里亚·西米奥诺 -专利权人：伊利诺伊大学理事会
申请日： 2016-06-10 - 公布日： 2018-04-17 - 主分类号： A01N1/02 文献下载
摘要：本文描述了通过成肌细胞与第二成肌细胞、间充质干细胞或基质细胞的离体融合产生的肌营养不良症嵌合细胞，以及其在治疗肌营养不良症中的用途。
营养不良嵌合细胞治疗方法

[发明专利]一种利用脐带间充质干细胞获取生物活性蛋白的方法-CN201510077611.0在审
发明人：时兆田;于艳秋;荣耀星;张停停;邓雯雯;李秀文;吕亚楠 -专利权人：沈阳澔源生物科技有限公司
申请日： 2015-02-13 - 公布日： 2015-05-27 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：一种利用脐带间充质干细胞获取生物活性蛋白的方法，首先使用Ⅰ型胶原酶短时消化脐带华通氏胶，得到含细胞外基质蛋白和组织块组成的糊状混合物并进行原代培养；然后在填充床式生物反应器内加入“干细胞生长培养基”用于扩增脐带间充质干细胞，当反应器内的细胞融合率达到标准时，添加“蛋白生产培养基”进行连续培养，收集培养液并处理，最终获得生物活性蛋白。本发明利用脐带间充质干细胞获取生物活性蛋白的方法，得到的脐带间充质干细胞纯度高，增殖能力好，缩短了干细胞培养时间；并且得到的生物活性蛋白产量高，质控过程方便，易于规模化生产。干细胞和生物活性蛋白均不含任何动物源性成分，提高了临床应用的安全性。
一种利用脐带间充质干细胞获取生物活性蛋白方法

[发明专利]肝脏类器官的制备方法-CN202110481017.3有效
发明人：高毅;易笑;陈枫;李阳;王沂峰;刘凡;郜坤洁 -专利权人：广东乾晖生物科技有限公司
申请日： 2020-08-28 - 公布日： 2022-05-17 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本申请公开一种肝脏类器官的制备方法，包括以下步骤：将脱细胞基质水凝胶、干细胞和肝脏细胞用无血清培养基混合均匀；在培养容器中静置培养至所述脱细胞基质水凝胶凝固；确定凝固后的所述脱细胞基质水凝胶中的细胞存活之后继续培养
肝脏器官制备方法

[发明专利]一种人羊膜间充质干细胞的分离培养方法-CN202011623274.8在审
发明人：张晓南;吴芳春;谷涌泉;侍晓云;张斌 -专利权人：北京昱龙盛世生物科技有限公司
申请日： 2020-12-31 - 公布日： 2021-03-30 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明提供一种人羊膜间充质干细胞的分离培养方法，包括从胎盘上剥离羊膜层、清洗、剪碎和消化，其特征在于：还包括从胎盘上剥离羊膜层后，除去基底膜下的基质组织使分离的羊膜尽可能的薄和除去血细胞，然后再进行剪碎和消化；其中胎盘组织为新鲜的足月顺产胎儿的胎盘组织，且胎盘组织经过消毒、清洗后即在无菌条件下，从胎盘上分离羊膜层；且人羊膜不需要先进行上皮细胞的消化分离，而是直接用于消化分离人羊膜间充质干细胞。采用本发明的人羊膜间充质干细胞的分离培养方法分离得到的人羊膜间充质干细胞纯度高、活力强、增值快。结论建立了人羊膜间充质干细胞分离、培养及鉴定方法。hAMSCs具有骨髓间充质干细胞的表型特征。
一种羊膜间充质干细胞分离培养方法