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[发明专利]一种SD大鼠皮层神经元培养方法-CN201910011692.2在审
发明人：范振峰;唐梅;李慧;贺永胜 -专利权人：云南洛宇生物科技有限公司
申请日： 2019-01-07 - 公布日： 2019-04-19 - 主分类号： C12N5/0793 文献下载
摘要：本发明提供了一种SD大鼠皮层神经元培养方法，本方法操作简单，具有较高的可重复性；通过使用专用神经元培养基，皮层神经元生产效果好，保证了皮层神经元的纯度。本发明能够简便、高效、经济的获得大量功能活性正常的SD大鼠皮层神经元，便于直接在纯净的体外细胞培养模型中进一步研究皮层神经元的生理功能。
皮层神经元皮层神经元培养神经元培养基体外细胞培养功能活性可重复性生理功能保证生产研究

[发明专利]一种裸鼹鼠皮层神经元培养方法-CN201610164387.3有效
发明人：崔淑芳;杨文静;孙伟;汤球;肖邦;赵善民;丛薇;程继帅 -专利权人：中国人民解放军第二军医大学
申请日： 2016-03-22 - 公布日： 2019-07-02 - 主分类号： C12N5/0793 文献下载
摘要：本发明涉及细胞生物学技术领域，特别涉及一种裸鼹鼠皮层神经元的分离纯化和培养方法。本发明综合使用多种培养基从新生裸鼹鼠大脑皮层分离并纯化培养皮层神经元，摸索出了适于变温的啮齿类哺乳动物裸鼹鼠皮层神经元的合理培养方法。本发明方法能够简便、高效、经济的获得大量功能活性正常的裸鼹鼠皮层神经元，低氧条件下的培养能够保证这种细胞在离体环境中依然能够保持在体状态下的生物学特性，从而便于直接在纯净的体外细胞培养模型中进一步研究裸鼹鼠皮层神经元的特殊生理功能
一种鼹鼠皮层神经元培养方法

[发明专利]脑红蛋白在促进神经元突起生长中的应用-CN201010257651.0有效
发明人：陈晓钎;余上斌;赖晓晶;李莉;罗振钊;刘倩蓉 -专利权人：华中科技大学
申请日： 2010-08-20 - 公布日： 2011-01-05 - 主分类号： A61K38/42 文献下载
摘要：本发明在原代培养的小鼠大脑皮层神经元中发现，随神经元突起的生长，脑红蛋白基因表达量显著增加。在原代培养的小鼠大脑皮层神经元以及小鼠神经瘤母细胞中转染本发明构建的脑红蛋白质粒，与对照组相比，脑红蛋白基因编码的蛋白表达增加，神经元的突起明显增长，证明增加脑红蛋白具有促进神经元突起的生长作用。在原代培养的小鼠大脑皮层神经元以及小鼠神经瘤母细胞中转染本发明构建的脑红蛋白RNA干扰质粒，与对照组相比，内源性脑红蛋白表达减少，神经细胞突起明显变短，证明内源性脑红蛋白具有促进神经元突起生长的生理作用在小鼠神经瘤母细胞中转染脑红蛋白质粒后再予无氧无糖处理，与对照组相比，神经细胞的突起明显增长，证明增加脑红蛋白具有促进受损神经元突起的生长作用。
蛋白促进神经元突起生长中的应用

[发明专利]脑红蛋白在促进神经元突起生长中的应用-CN201210024447.3无效
发明人：陈晓钎;余上斌;赖晓晶;李莉;罗振钊;刘倩蓉 -专利权人：华中科技大学
申请日： 2010-08-20 - 公布日： 2012-12-12 - 主分类号： C12N15/12 文献下载
摘要：本发明在原代培养的小鼠大脑皮层神经元中发现，随神经元突起的生长，脑红蛋白基因表达量显著增加。在原代培养的小鼠大脑皮层神经元以及小鼠神经瘤母细胞中转染本发明构建的脑红蛋白质粒，与对照组相比，脑红蛋白基因编码的蛋白表达增加，神经元的突起明显增长，证明增加脑红蛋白具有促进神经元突起的生长作用。在原代培养的小鼠大脑皮层神经元以及小鼠神经瘤母细胞中转染本发明构建的脑红蛋白RNA干扰质粒，与对照组相比，内源性脑红蛋白表达减少，神经细胞突起明显变短，证明内源性脑红蛋白具有促进神经元突起生长的生理作用在小鼠神经瘤母细胞中转染脑红蛋白质粒后再予无氧无糖处理，与对照组相比，神经细胞的突起明显增长，证明增加脑红蛋白具有促进受损神经元突起的生长作用。
蛋白促进神经元突起生长中的应用

[发明专利]脑红蛋白在促进神经元突起生长中的应用-CN201210024291.9无效
发明人：陈晓钎;余上斌;赖晓晶;李莉;罗振钊;刘倩蓉 -专利权人：华中科技大学
申请日： 2010-08-20 - 公布日： 2012-07-18 - 主分类号： C07K14/805 文献下载
摘要：本发明在原代培养的小鼠大脑皮层神经元中发现，随神经元突起的生长，脑红蛋白基因表达量显著增加。在原代培养的小鼠大脑皮层神经元以及小鼠神经瘤母细胞中转染本发明构建的脑红蛋白质粒，与对照组相比，脑红蛋白基因编码的蛋白表达增加，神经元的突起明显增长，证明增加脑红蛋白具有促进神经元突起的生长作用。在原代培养的小鼠大脑皮层神经元以及小鼠神经瘤母细胞中转染本发明构建的脑红蛋白RNA干扰质粒，与对照组相比，内源性脑红蛋白表达减少，神经细胞突起明显变短，证明内源性脑红蛋白具有促进神经元突起生长的生理作用在小鼠神经瘤母细胞中转染脑红蛋白质粒后再予无氧无糖处理，与对照组相比，神经细胞的突起明显增长，证明增加脑红蛋白具有促进受损神经元突起的生长作用。
蛋白促进神经元突起生长中的应用

[发明专利]脑组织皮层区原代神经元培养并用腺相关病毒转染的方法-CN201810054859.9在审
发明人：龚薇;斯科;黄理蒙 -专利权人：浙江大学
申请日： 2018-01-19 - 公布日： 2018-07-20 - 主分类号： C12N5/0793 文献下载
摘要：本发明公开了一种脑组织皮层区原代神经元培养并用腺相关病毒转染的方法。提取胎鼠大脑，分离皮层组织，消化处理；去除组织杂质，然后于第一培养液中制备细胞悬液；将细胞悬液接种于培养皿，置于细胞培养箱内培养，获得原代神经元培养液；原代神经元培养液中加入腺相关病毒进行神经元转染；转染后不断换液本发明培养的原代神经元状态良好，转染方法稳定、高效、快速、可进行大基因片段转染。
转染腺相关病毒神经元培养液脑组织皮层神经元培养细胞培养培养皿培养液神经元并用细胞悬液接种制备细胞悬液神经元状态基因片段皮层组织消化处理换液胎鼠去除大脑

[发明专利]高效分离和培养皮层神经元的方法-CN201910409389.8在审
发明人：周瑾;朱惠敏;王常勇;刘伟;王春兰 -专利权人：中国人民解放军军事科学院军事医学研究院
申请日： 2019-05-16 - 公布日： 2019-08-09 - 主分类号： C12N5/0793 文献下载
摘要：本发明公开了属于细胞培养技术领域的一种高效分离和培养皮层神经元的方法。本发明使用的种植液为85％DMEM+10％马血清+5％胎牛血清，维持液为90％DMEM+10％马血清的培养体系，培养体系成分简单，成本低，但培养得到的神经元存活率高、形态典型、长期培养可形成复杂的功能化神经网络虽然没有使用阿糖胞苷等试剂对神经元进行纯化，但本培养体系下神经元仍有较高纯度。
培养体系神经元培养皮层神经元高效分离马血清神经元存活率细胞培养技术阿糖胞苷神经网络胎牛血清高纯度功能化维持液种植液

[发明专利]一种miR-25-3p、应用及其应用方法-CN202111329966.6在审
发明人：周松林;丁斐;从猛;张琦;沈宓;刘畅 -专利权人：南通大学
申请日： 2021-11-11 - 公布日： 2022-02-25 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明提供一种miR‑25‑3p、应用及其应用方法，涉及生物医学技术领域，其中，所述miR‑25‑3p作为分子干预靶点，过表达miR‑25‑3p，用以促进DGR神经元和皮层神经元轴突的生长。所述miR‑25‑3p通过调节DGR神经元轴突生长参与周围神经损伤修复。所述miR‑25‑3p通过调节皮层神经元轴突生长参与中枢神经损伤修复。在体外DRG神经元中，转染miR‑25‑3p mimic，可以显著促进原代培养的DRG神经元和皮层神经元轴突的生长。本发明所述miR‑25‑3p可以通过调节DRG神经元轴突生长参与周围神经损伤修复，也可以通过调节皮层神经元轴突生长参与中枢神经损伤修复。有助于更好地理解miRNA在神经损伤修复过程中的重要作用，并为神经损伤后的治疗提供新的靶点。
一种 mir 25 应用及其方法

[发明专利]大脑皮层神经元分离和原代培养方法-CN201410066546.7有效
发明人：刘洛贤 -专利权人：刘洛贤
申请日： 2014-02-21 - 公布日： 2014-05-14 - 主分类号： C12N5/0793 文献下载
摘要：本发明属于细胞生物学领域，涉及一种神经元分离和培养方法及试剂。本发明的目的在于针对现有技术存在的问题，改进当前海马神经元体外分离和培养的方法，解决了皮层神经细胞原代培养的增殖性和活性无法保持的问题。本发明建立了一套比较成熟的体外培养皮层神经细胞的方法，本发明得到的神经细胞数量充足，生长状态较好，能够从哺乳动物的海马组织中分离出高活性、高数量的皮层神经细胞，符合原代皮层神经细胞培养的要求，可满足神经科学研究中细胞生物学实验的需求
大脑皮层神经元分离培养方法

[发明专利]一种多能干细胞诱导产生兴奋性和抑制性神经元的方法-CN202210640116.6在审
发明人：刘长梅;刘佩佩;滕兆乾;徐雅洁;杜洪震 -专利权人：中国科学院动物研究所
申请日： 2022-06-08 - 公布日： 2022-08-30 - 主分类号： C12N5/0793 文献下载
摘要：本发明公开了一种多能干细胞诱导产生兴奋性和抑制性神经元的方法。本发明公开的多能干细胞诱导产生兴奋性神经元的方法包括将人多能干细胞依次在培养基II、N2培养基、N2+lamin培养基、N2B27培养基、神经元培养基中进行培养，得到兴奋性神经元；多能干细胞诱导产生抑制性神经元的方法包括将人胚胎干细胞依次在hES培养基、NIM培养基、NIM+pur培养基、VPA培养基、NDM培养基中进行培养，即得到抑制性神经元。本发明的方法简单，能够有效减少诱导时间，同时能定向分化为单一方向的神经元，指向性明确，对于研究人类大脑皮层发育具有重要意义。
一种多能干细胞诱导产生兴奋性抑制神经元方法

[发明专利]人类多能细胞的皮层生成-CN201180037682.8无效
发明人：弗雷德里克·约翰·利夫西;施熠辰 -专利权人：剑桥实业有限公司
申请日： 2011-07-29 - 公布日： 2013-04-17 - 主分类号： C12N5/079 文献下载
摘要：本发明涉及通过在刺激视黄素信号化并且抑制TGFβ超家族信号化的条件下培养细胞，用于在人多能细胞如iPS细胞中体外诱导皮层生成的方法。这在产生皮层神经元，尤其是患者特异性皮层神经元；模型化青少年和成人发作的神经疾病；以及治疗的开发中可以是有用的。
人类多能细胞皮层生成

[发明专利]去氢骆驼蓬碱在促进神经再生和修复神经损伤方面的应用-CN202111202926.5在审
发明人：周炳;柳瑞璇;杨晓燕 -专利权人：北京航空航天大学
申请日： 2021-10-15 - 公布日： 2021-12-03 - 主分类号： A61K31/437 文献下载
摘要：本发明公开了去氢骆驼蓬碱在制备促进神经再生和修复神经损伤药物方面的应用。本发明利用微流控系统在体外培养皮层神经元和DRG神经元，形成中枢神经系统和周围神经系统的神经轴突损伤后，采用去氢骆驼蓬碱进行治疗，发现去氢骆驼蓬碱可以显著促进皮层神经元和DRG神经元轴突的损伤后的再生，该发现为脊髓损伤和外周损伤等神经损伤患者的治疗提供了新的方向。
骆驼促进神经再生修复神经损伤方面应用

[发明专利]一种外泌体活性制剂的制备方法及其应用-CN202110382445.0在审
发明人：董晓华;李心远 -专利权人：上海市同仁医院
申请日： 2021-04-09 - 公布日： 2021-06-18 - 主分类号： A61K35/30 文献下载
摘要：用来源于新出生小鼠大脑皮层神经元原代细胞培养上清，通过超高速离心获得。将小鼠大脑皮层组织经胰酶消化后铺板培养，收集大脑皮层神经元培养上清，利用低温离心机经反复离心后，将离心得到的外泌体溶于PBS中。通过粒径分析仪分析大脑皮层神经元细胞分泌的外泌体浓度以及外泌体大小，将外泌体通过CCV注射到血脑屏障损伤的斑马鱼模型中，可通过促进血管新生方式有效修复血脑屏障损伤，降低头部血细胞流出量。因此，本发明公开的新生小鼠大脑皮层神经元原代细胞分泌外泌体可在促进血管新生、促进血脑屏障损伤修复，可用于制备促血脑屏障修复的药物或试剂。
一种外泌体活性制剂制备方法及其应用

[发明专利]一种模拟骨髓间充质干细胞移植体外模型的构建方法-CN201210492449.5有效
发明人：姜晓丹;李鹏;法志强;张润;孙海涛;刘翼 -专利权人：姜晓丹;李鹏
申请日： 2012-11-27 - 公布日： 2013-03-27 - 主分类号： C12N5/0793 文献下载
摘要：本发明公开了一种模拟骨髓间充质干细胞移植体外模型的构建方法，含以下步骤：(1)选取离体乳鼠皮层神经元；(2)选取离体大鼠骨髓间充质干细胞；(3)将大鼠骨髓间充质干细胞经预处理后，接种于乳鼠皮层神经元中进行共培养；(4)将共培养后的大鼠骨髓间充质干细胞和乳鼠皮层神经元经光镜、荧光显微镜、原子力显微镜及扫描电镜，确立模拟骨髓间充质干细胞移植的体外模型以及在超微结构上确定皮层神经元与骨髓间充质干细胞之间生长趋势、相互作用及突触样结构的形成
一种模拟骨髓间充质干细胞移植体外模型构建方法

[发明专利]一种裸鼹鼠海马神经元培养方法-CN201610163720.9有效
发明人：崔淑芳;杨文静;孙伟;汤球;丛薇;余琛琳;林丽芳;徐晨;蔡丽萍;李周桐 -专利权人：中国人民解放军第二军医大学
申请日： 2016-03-22 - 公布日： 2019-07-02 - 主分类号： C12N5/0793 文献下载
摘要：本发明涉及细胞生物学技术领域，特别涉及一种裸鼹鼠海马神经元的分离纯化和培养方法。本发明综合使用多种培养基从新生裸鼹鼠大脑皮层分离并纯化培养海马神经元，摸索出了适于变温的啮齿类哺乳动物裸鼹鼠海马神经元的合理培养方法。本发明方法能够简便、高效、经济的获得大量功能活性正常的裸鼹鼠海马神经元，低氧条件下的培养能够保证这种细胞在离体环境中依然能够保持在体状态下的生物学特性，从而便于直接在纯净的体外细胞培养模型中进一步研究裸鼹鼠海马神经元的特殊生理功能
一种鼹鼠海马神经元培养方法

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