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[发明专利]一种用油厂土壤中筛选的菌株固态发酵生产脂肪酶的方法-CN201110082484.5无效
发明人：江连洲;徐速;韩春然;于殿宇;刘晶;李越;陈晓惠;李志平;张佳宁;时敏 -专利权人：东北农业大学
申请日： 2011-04-02 - 公布日： 2011-09-21 - 主分类号： C12N9/20 文献下载
摘要：一种用大庆日月星油厂附近土壤中筛选的菌株固态发酵生产脂肪酶的方法，本发明涉及采用筛选分离的方法从土壤中提取产脂肪酶的菌株，并对其采用固态发酵的方法生产脂肪酶。将分离纯化后的该菌接入到固态发酵培养基中，在此过程中确定产脂肪酶获利最高的发酵参数：在种龄36h，接种量0.3％的脂肪酶固态发酵条件下，麸皮和豆粕的比为1∶4，含水量为50％(V/W)，发酵温度29℃，发酵时间3d。此时，固态培养基中脂肪酶的活力可达1450U/g。
一种用油厂土壤筛选菌株固态发酵生产脂肪酶方法

[发明专利]采用固定化马抗体提取纯化脂肪酶的方法-CN201910183987.8在审
发明人：廖承勇;王晨宇;张小利;王盼冉;赵国芬;尹俊;王新国;娜日苏;劲松;王秀丽;海永胜;于瑞;王勇 -专利权人：内蒙古博格农牧业开发有限责任公司
申请日： 2019-03-12 - 公布日： 2019-05-10 - 主分类号： C12N9/20 文献下载
摘要：本发明公开了一种采用固定化马抗体提取纯化脂肪酶的方法，包括步骤：采用产脂肪酶的假单胞菌为发酵菌种进行发酵，得到发酵液；将发酵液离心，收集上清液，得到脂肪酶粗酶液；将脂肪酶粗酶液上固定化马抗体柱，之后用清洗液洗柱，再采用磷酸氢二钠‑柠檬酸缓冲液洗脱，收集洗脱液，得到纯化后的脂肪酶；在纯化后的脂肪酶中加入聚乙二醇，使脂肪酶沉淀；之后离心，收集沉淀；将沉淀干燥，得到脂肪酶。本发明利用抗原抗体特异结合提取纯化脂肪酶，可以有效去除杂质，特异性强，所得脂肪酶纯度高、质量好、收率高、活性损失少，在脂肪酶浓度较低时也可以对其进行提纯，且生产成本低，是一种高效的脂肪酶提取纯化方法。
脂肪酶提取纯化固定化抗体粗酶液发酵液沉淀柠檬酸缓冲液有效去除杂质磷酸氢二钠生产成本低沉淀干燥发酵菌种活性损失假单胞菌聚乙二醇抗原抗体特异结合特异性强清洗液上清液洗脱液提纯收率洗脱洗柱发酵

[发明专利]粘质沙雷氏菌脂肪酶发酵产酶及其提高酶活的方法-CN201510993398.8在审
发明人：宋亮;李岩;程晓文 -专利权人：苏州开元民生科技股份有限公司
申请日： 2015-12-28 - 公布日： 2016-04-27 - 主分类号： C12N9/20 文献下载
摘要：本发明揭示了粘质沙雷氏菌脂肪酶发酵产酶及其提高酶活的方法，先通过在发酵过程中采用流加的方法添加诱导剂，大幅度地提高了来源于粘质沙雷氏菌的脂肪酶产量，然后通过多种金属离子组合的方法，在酶量不变的情况下激活了脂肪酶，提高了脂肪酶的酶活，为生产应用中提供了低成本、高酶活的脂肪酶。本发明促进了来源于粘质沙雷氏菌株中脂肪酶在生产中的应用，并极大的降低了生产成本，使发酵产酶和酶活提高变的简单而高效。
粘质沙雷氏菌脂肪酶发酵及其提高方法

[发明专利]发酵液中脂肪酶的泡沫分离方法-CN202010333376.X在审
发明人：邵文尧;林滢;陈国玺 -专利权人：厦门大学
申请日： 2020-04-24 - 公布日： 2020-08-28 - 主分类号： C12N9/20 文献下载
摘要：发酵液中脂肪酶的泡沫分离方法，属于泡沫分离技术领域。发酵罐发酵生产脂肪酶，得脂肪酶发酵液；发酵液配制成不同浓度的脂肪酶溶液，测定脂肪酶起泡能力与泡沫稳定性；检查泡沫分离装置气密性，将发酵液引入泡沫分离装置气浮管中；打开气瓶主阀和减压阀，调节转子流量计，将分离气速调整至所需值，向发酵液中通入空气，气体抵达气浮管底部，在气体分布器上均匀分布并向上输送，带动、分离泡沫发生管内的溶液溶质，气泡最终由气浮管顶端排出，并收集到泡沫收集烧杯中，测定泡沫液中的脂肪酶的浓度和酶活，并计算泡沫分离的回收率和酶活富集比成本低、作用条件温和、操作简便，有效解决脂肪酶生产中产物抑制、分离困难、营养物质利用率低等问题。
发酵脂肪酶泡沫分离方法

[发明专利]一种脂肪酶基因COLIP及其编码的脂肪酶-CN201410416419.5有效
发明人：杨江科;詹志春;周文静;毛玲;缪礼鸿 -专利权人：武汉轻工大学
申请日： 2014-08-22 - 公布日： 2017-01-04 - 主分类号： C12N15/55 文献下载
摘要：本发明属于人工合成基因领域，具体涉及一种脂肪酶基因COLIP及其编码的脂肪酶、表达脂肪酶基因COLIP的基因工程菌。本发明公开了一种脂肪酶基因COLIP，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，由其编码的脂肪酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。与现有技术相比，本发明所获得的脂肪酶基因COLIP可在毕赤酵母中超高效表达，所构建的毕赤酵母基因工程菌GS115（COLIP）可以用来大量生产脂肪酶。发酵结果显示：在10 L发酵罐条件下，发酵120小时，发酵液中脂肪酶的酶活可稳定在45,000 U/mL以上，发酵液中蛋白含量稳定在3.2 g/L以上。
一种脂肪酶基因 colip 及其编码

[发明专利]一种脂肪酶的发酵生产方法-CN201310633763.5无效
发明人：曹天一;谭天伟 -专利权人：北京化工大学
申请日： 2013-11-29 - 公布日： 2014-03-26 - 主分类号： C12N9/20 文献下载
摘要：本发明涉及一种脂肪酶的发酵生产方法。该方法将产脂肪酶的假丝酵母和/或装载了含有LIP2基因的质粒的耶氏酵母作为发酵菌种加入发酵培养基进行发酵生产脂肪酶，并以发酵液中的丙酮酸为代谢标志物来控制发酵过程。该方法通过向发酵培养基或发酵液中加入维生素B6来控制发酵液中的丙酮酸含量，并通过在发酵过程中控制发酵液pH、发酵液温度和通气量来控制碳源和氮源代谢。该发酵工艺通过控制发酵液中作为代谢标志物的丙酮酸解除了脂肪酶合成过程中的抑制作用，从而提高了发酵菌种产生脂肪酶的能力。脂肪酶活力相比于原始发酵工艺（未添加维生素B68000IU/ml）提高了2000-4000IU/ml发酵液以上。
一种脂肪酶发酵生产方法

[发明专利]一种赭色小莫勒菌发酵生产脂肪酶的培养基及方法-CN201310440716.9有效
发明人：邱君志;涂洁;李小霞;孟丽雪;曹丽萍;何肖云;郭庆丰;董冬;张以盼;姚灵丹 -专利权人：福建农林大学
申请日： 2013-09-25 - 公布日： 2014-01-29 - 主分类号： C12N9/20 文献下载
摘要：本发明涉及真菌的发酵培养基及工艺。更具体地，本发明涉及一种赭色小莫勒菌发酵生产脂肪酶的培养基及方法。所述培养基的原料含有胰蛋白胨0.5g/L，α-乳糖2.5g/L，Zn2+1.3g/L，VB40.1g/L，乳化橄榄油50g/L(诱导产生脂肪酶），培养基初始pH=7.1。该方法通过将发酵种子液接种于上述产脂肪酶的培养基中培养，250mL的三角瓶装液量为75mL，接种量10%，于25℃，转速120r/min下培养。本发明的发酵方法有发酵周期短；条件温和，易于控制；提供的用于赭色小莫勒菌发酵生产脂肪酶的培养基，具有脂肪酶产率高，脂肪酶活力高等优点。
一种赭色小莫勒菌发酵生产脂肪酶培养基方法

[发明专利]一种新型碱性脂肪酶的制备方法-CN200910154648.3无效
发明人：吴菁 -专利权人：湖州来色生物基因工程有限公司
申请日： 2009-11-23 - 公布日： 2011-05-25 - 主分类号： C12N9/20 文献下载
摘要：本发明公开了一种碱性脂肪酶的制备方法。是从含油的土壤中分离得到碱性脂肪酶菌株，经过初筛和复筛和紫外诱变，获得了一株高产脂肪酶菌株，经过种子培养后转入发酵培养基培养，发酵得到碱性脂肪酶液，酶液经过硫酸铵盐析、疏水层析、阴离子交换层析后干燥得到纯度和酶活高的碱性脂肪酶，为碱性脂肪酶的进一步研究和开发生产提供了新的途径。
一种新型碱性脂肪酶制备方法

[发明专利]一株表达脂肪酶的地衣芽孢杆菌及其发酵产酶方法-CN202011244303.X有效
发明人：曾哲灵;赵钧馨;曾诚;马毛毛;余平;万冬满 -专利权人：南昌大学
申请日： 2020-11-10 - 公布日： 2022-09-16 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：一株表达脂肪酶的地衣芽孢杆菌及其发酵产酶方法，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.20140。地衣芽孢杆菌发酵生产脂肪酶的发酵液酶活高达到32000U/mL；所产脂肪酶最适作用温度范围为30℃‑40℃，最适pH范围为8.5‑9.5，在4℃保温48h后相对酶活为60％，具有广泛的最适作用范围和显著的耐低温性和耐碱性，可应用于不同需求的工业生产中，显著地拓展了脂肪酶的工业应用范围，提高了脂肪酶的应用价值。
表达脂肪酶地衣芽孢杆菌及其发酵方法

[发明专利]一种利用偶联生产脂肪酶的方式催化生产生物柴油的方法-CN201410138507.3在审
发明人：阎金勇;李盛英 -专利权人：中国科学院青岛生物能源与过程研究所
申请日： 2014-04-04 - 公布日： 2014-07-16 - 主分类号： C12P7/64 文献下载
摘要：本发明属于生物柴油的酶法制备方法，具体的说是一种利用偶联生产脂肪酶的方式催化生产生物柴油的方法。以脂肪酶基因、重组载体和表达宿主通过基因工程方式获得高效表达脂肪酶的重组酵母基因工程菌株作为出发材料，利用出发材料酵母菌株重组表达的脂肪酶发酵培养物作为原位催化剂，同时在发酵物中添加外源油脂与短链醇，以外源添加物作为反应底物，将脂肪酶的表达生产与生物柴油催化整合于酵母高密度发酵过程中，将反应底物在原位催化剂存在的条件下进行原位催化制备生物柴油。本发明的整合生物加工过程通过高密度发酵和催化同步操作，将传统的脂肪酶表达生产与生物柴油催化两个独立的过程整合于一个过程，过程简易，能耗低，无污染。
一种利用生产脂肪酶方式催化生物柴油方法

[发明专利]一种脂肪酶及其应用-CN201310069500.6有效
发明人：王华明;訾祯祯;陈志兵 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所;青岛蔚蓝生物集团有限公司
申请日： 2013-03-05 - 公布日： 2014-09-10 - 主分类号： C12N9/20 文献下载
摘要：本发明涉及一种脂肪酶，该脂肪酶的氨基酸序列为SEQ ID NO: 1，编码该脂肪酶的基因组DNA，其序列为SEQ ID NO:2。本发明的脂肪酶为碱性低温脂肪酶，在洗涤、皮革、食品、饲料等方向将拥有巨大的市场前景。本发明脂肪酶在较高的碱性环境下仍有很高的酶活力，反应最佳pH9.0。在应用试验中检测脂肪酶的去污效果发现，本发明未浓缩的脂肪酶发酵液样品和诺维信6万单位的脂肪酶高浓缩样品相比，其洗涤去污能力仅相差10倍，而其生产成本远低于诺维信脂肪酶的成本，有望通过进一步的发酵优化和产品浓缩达到相同去污效果
一种脂肪酶及其应用

[发明专利]一种耐高温碱性脂肪酶及其制备方法和应用-CN202210795881.5在审
发明人：牛永武;纪晨雪;赵仁勇;孙艺铭;杨岩晓;乔杉 -专利权人：河南工业大学
申请日： 2022-07-07 - 公布日： 2022-10-25 - 主分类号： C12N9/20 文献下载
摘要：本发明公开了一种耐高温碱性脂肪酶及其制备方法和应用。本发明耐高温碱性脂肪酶来自蚜虫莫氏黑粉菌。首先将蚜虫莫氏黑粉菌置于活化培养基中进行培养，活化培养后的蚜虫莫氏黑粉菌接入种子培养基中进行培养，培养后的蚜虫莫氏黑粉菌接种至发酵培养基中进行培养发酵，所得发酵液进行分离或分离纯化，得到耐高温碱性脂肪酶本发明制备所得耐高温碱性脂肪酶在催化酯水解和在改善馒头品质中均具有较好的催化效果。本发明制备的耐高温碱性脂肪酶可广泛应用于工业生产中，尤其是对补充工业化生产的耐高温碱性脂肪酶种类具有重要意义。
一种耐高温碱性脂肪酶及其制备方法应用

[发明专利]一种生产米黑根毛霉脂肪酶mRML酶粉的方法-CN201811092251.1有效
发明人：黄金金;赵庆伊;陈凌霄;卜伟;叶梦奇;郑维发 -专利权人：江苏师范大学
申请日： 2018-09-19 - 公布日： 2021-08-10 - 主分类号： C12N9/20 文献下载
摘要：一种生产米黑根毛霉脂肪酶mRML酶粉的方法，包括步骤：构建含脂肪酶基因mrml的能够表达mRML的工程菌株；培养工程菌株；经诱导表达获得含米黑根毛霉脂肪酶mRML的发酵液；将发酵液离心，取上清，调节pH至7.0，之后置于低温环境中，直至上清液表面出现结冰；向上清液中加入预冷丙酮，静置，弃上清，收集沉淀；风干沉淀，得米黑根毛霉脂肪酶mRML酶粉。本发明的一种生产米黑根毛霉脂肪酶mRML酶粉的方法，以50mL发酵液为研究对象，丙酮和发酵液的体积比为2:1，当发酵液pH调到5.0‑7.0，酶活回收率保持在70％以上。当发酵液pH为7.0时，酶回收率最高，获得酶粉的重量为1.373g，酶粉的比活为3367U/g，酶粉的回收率为94.4％，明显优于现有的生产方法。
一种生产根毛脂肪酶 mrml 方法

[发明专利]微生物发酵生产低温脂肪酶的方法-CN201010162740.7有效
发明人：张庆芳;迟乃玉;窦少华;于爽 -专利权人：大连大学
申请日： 2010-04-09 - 公布日： 2011-06-15 - 主分类号： C12N9/20 文献下载
摘要：本发明所述的一种微生物发酵生产低温脂肪酶的方法是将产生脂肪酶的微生物逐级低温驯化，使其在低温环境中生长良好；将低温驯化后的脂肪酶产生菌在14～20℃逐级扩大培养，按发酵液体积的3～9％接种量接入液体发酵培养基中，在14～20℃培养48～120h，即微生物发酵生产低温脂肪酶结束；发酵液在4,000～8,000rpm离心收集液体，收集的液体即为粗酶液；根据不同需要和使用对象不同，将粗酶液进一步浓缩、分离纯化，制备成不同活性
微生物发酵生产低温脂肪酶方法

[发明专利]一种脂肪酶及其生产方法与应用-CN201710838182.3有效
发明人：刘文龙;王兴吉;郭庆文;贾仁洁;曹世源 -专利权人：山东隆科特酶制剂有限公司
申请日： 2017-09-18 - 公布日： 2020-09-25 - 主分类号： C12N9/20 文献下载
摘要：本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种脂肪酶及其生产方法与应用。所述脂肪酶产自假单胞菌(Pseudomonas sp.)LD‑14，菌株保藏号为CGMCC No.14414。假单胞菌LD‑14发酵生产脂肪酶的发酵液酶活达到25000U/mL至26000U/mL；所产脂肪酶最适pH范围为8.5‑10.0，最适作用温度范围为30℃‑40℃，在20℃保温1d后剩余酶活为80％，具有显著的耐低温性和耐碱性，可广泛应用于工业生产。
一种脂肪酶及其生产方法应用

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