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[发明专利]植物膜结合转录因子原核表达纯化的方法-CN202011279881.7在审
发明人：李晓娟;张原;鲁雨晴;边佳辉;姚晓敏;张耿;苏晓;刘佩佩 -专利权人：北京林业大学
申请日： 2020-11-16 - 公布日： 2021-02-05 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开了植物膜结合转录因子原核表达纯化的方法，包括如下步骤，步骤1：设计引物构建原核表达载体；步骤2：原核系统中蛋白的表达；步骤3：蛋白纯化。本发明在传统原核表达纯化的基础上，根据膜结合蛋白的蛋白结构与性质，优化了其纯化方法，并筛选了相应的诱导表达条件与纯化缓冲液配置方法，实现了对膜结合蛋白的原核高浓度纯化表达。
植物结合转录因子表达纯化方法

[发明专利]骨形态发生蛋白BMP-2重组蛋白、编码基因及其原核表达方法-CN202310044443.X在审
发明人：易红飞;胡慧芳 -专利权人：翌圣生物科技（上海）股份有限公司
申请日： 2023-01-30 - 公布日： 2023-05-23 - 主分类号： C07K14/51 文献下载
摘要：还公开了其编码基因、表达质粒、原核表达载体以及原核表达方法。本发明采用原核表达系统，创造性地引入增溶标签，使包涵体表达转为可溶性表达，BMP‑2在原核系统中为包涵体表达，通过添加增溶标签，使蛋白转为可溶性表达，减小了蛋白分离纯化的难度，缩短了纯化周期，提高了纯化效率
形态发生蛋白 bmp 重组编码基因及其表达方法

[发明专利]一种制备N-乙酰氨基半乳糖转移酶的方法-CN201911267015.3有效
发明人：张延;梁涛;许之珏;贾文娟 -专利权人：上海交通大学
申请日： 2019-12-11 - 公布日： 2022-09-23 - 主分类号： C12N9/10 文献下载
摘要：本发明涉及生物技术领域，特别是涉及一种用于表达N‑乙酰氨基半乳糖转移酶的原核表达系统。本发明提供一种用于表达N‑乙酰氨基半乳糖转移酶的原核表达载体，所述表达载体中包括ppGalNAc‑T蛋白表达框和PDI蛋白表达框。本发明所提供的用于表达N‑乙酰氨基半乳糖转移酶的原核表达载体和原核表达系统使用共表达单一质粒及具有胞内氧化环境的宿主细胞、并通过常规的通用培养基进行表达，表达系统和操作方法均简单，一步表达、纯化，不需要重折叠等后续操作，且获得ppGalNAc‑T2酶的产量优于人源HEK 293T细胞系表达纯化的ppGalNAc‑T2酶。
一种制备乙酰氨基半乳糖转移酶方法

[发明专利]原核细菌光诱导基因表达系统及其调控基因表达的方法-CN201210274040.6有效
发明人：杨弋;陈显军;马正才;刘韧玫 -专利权人：华东理工大学
申请日： 2012-08-02 - 公布日： 2013-04-10 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明提供一种原核细菌光诱导基因表达系统，包括：a）重组光敏转录因子编码基因，所述重组光敏转录因子包括作为DNA结合结构域的第一多肽和作为光敏结构域的第二多肽；b）靶转录单元，包括被所述第一多肽识别/结合的至少一个反应元件的启动子或启动子本发明还提供包含这种光诱导基因表达系统的原核细菌表达载体，和用这种光诱导基因表达系统在原核细菌中调控基因表达的方法，以及装有所述光诱导基因表达系统各组分的试剂盒。本发明的原核细菌光诱导基因表达系统诱导快速、高效且强，比其他诱导剂安全，毒性小或无毒性；它可在时间和空间上控制基因的表达；可用于调节原核细菌的生命活动。
细菌光诱导基因表达系统及其调控方法

[发明专利]人聚角微丝蛋白基因原核表达系统及其表达蛋白的应用-CN201010105241.4有效
发明人：沈波;徐巍;朱敏 -专利权人：浙江省台州医院
申请日： 2010-01-29 - 公布日： 2010-12-08 - 主分类号： C12N15/12 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，具体涉及人聚角微丝蛋白基因，即Filaggrin基因(含瓜氨酸肽编码序列)原核表达系统构建及其表达蛋白的应用。本发明涉及人filaggrin基因原核表达系统构建，以及纯化蛋白的应用开发，具体包括人filaggrin基因(含瓜氨酸肽编码序列)的PCR钓取、原核表达载体的构建、工程菌株的建立、目的蛋白分离纯化，以及
人聚角微丝蛋白基因表达系统及其应用

[发明专利]一种高效生产BPI－Fc重组蛋白的方法-CN00107590.X无效
发明人：安云庆;陈金栋 -专利权人：首都医科大学;陈金栋
申请日： 2000-05-22 - 公布日： 2004-08-25 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明公开了采用原核表达系统表达由杀菌/渗透性增强蛋白(BPI)与免疫球蛋白重链恒定区(Fc)嵌合组成的BPI-Fc重组蛋白的高效生产方法，包括(1)、构建BPI-Fc嵌合基因表达载体；(2)、BPI-Fc重组蛋白在原核宿主细胞中表达；本发明还公开了在原核表达系统表达BPI-Fcγ1重组蛋白过程中的特异表达载体；本发明对研制新型高效抗感染生物制剂具有重要价值，在制药行业具有广阔的应用前景。
一种高效生产 bpi fc 重组蛋白方法

[发明专利]一种Bet V1重组蛋白及其制备方法和应用-CN202010169695.1在审
发明人：李子樵;周延庆 -专利权人：蓝怡科技集团股份有限公司;浙江蓝怡医药有限公司
申请日： 2020-03-12 - 公布日： 2020-06-19 - 主分类号： C12N15/29 文献下载
摘要：所述Bet V1重组蛋白的编码基因经过密码子优化，经人工合成后亚克隆至原核载体得到重组载体，采用原核表达系统表达制备，有利于实现BetV1重组蛋白在原核表达系统中的高效表达。
一种 bet v1 重组蛋白及其制备方法应用

[发明专利]酪蛋白激酶Iα的重组蛋白的原核表达载体及其构建方法-CN201611067652.2在审
发明人：蔡磊;高毅;潘明新;李阳 -专利权人：南方医科大学珠江医院
申请日： 2016-11-28 - 公布日： 2018-06-05 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开一种酪蛋白激酶Iα的重组蛋白的原核表达载体，其包含如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列、限制性酶切位点Nde Ⅰ和限制性酶切位点BamH Ⅰ。一种如前所述的酪蛋白激酶Iα的重组蛋白的原核表达载体的构建方法，其包括以下步骤：根据GenBank数据库收录的大鼠酪蛋白激酶Iα的核苷酸序列设计扩增CKIα的引物；获取大鼠细胞的全cDNA；利用所述扩增CKIα的引物从所述cDNA中的克隆CKIα基因；将所述克隆获得的CKIα基因与原核表达载体进行连接，获得重组的原核表达载体。本发明酪蛋白激酶Iα的重组蛋白的原核表达载体及其构建方法成功利用了原核表达系统，获得了重组CKIα。
原核表达载体酪蛋白激酶重组蛋白构建限制性酶切位点核苷酸序列扩增引物克隆原核表达系统大鼠细胞大鼠成功

[发明专利]用于无抗生素表达的表达载体-CN200480038608.8无效
发明人：安德烈亚斯·安东;马库斯·菲德勒;安德烈亚斯·弗林斯 -专利权人：塞尔蛋白质股份有限公司
申请日： 2004-12-22 - 公布日： 2007-01-17 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明涉及待用于营养缺陷型、原核宿主细胞的表达载体，以及含有表达载体和营养缺陷型原核宿主细胞的表达系统。此外，本发明还涉及含有本发明表达载体的无抗生素发酵培养基，以及无抗生素表达肽/蛋白质的方法。
用于抗生素表达载体

[发明专利]一种双启动子表达载体及其构建方法-CN202010005223.2在审
发明人：王小引;王天云;易丹丹;许重洁;苗馨之;张伟莉;杨雯雯 -专利权人：新乡医学院
申请日： 2020-01-03 - 公布日： 2020-05-01 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本申请属于基因工程技术领域，具体涉及一种能同时在原核及哺乳动物细胞中分别表达目的基因的双启动子表达载体及其构建方法。该载体以真核表达载体为出发载体，同时基因组中包含有原核启动子T7序列、核糖体结合位点和T7终止序列。本申请所构建的双启动子表达载体，能在原核和真核细胞中同时表达同一目的基因，可克服现有同一目的蛋白在哺乳动物及原核细胞需要2套表达系统的繁杂步骤，也为相关目的基因在不同表达系统中表达奠定一定技术基础。
一种启动子表达载体及其构建方法

[发明专利]人组织激肽释放酶6原核表达载体-CN201010255050.6无效
发明人：胡成进;张华 -专利权人：胡成进
申请日： 2010-08-17 - 公布日： 2011-03-23 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明属于医学研究领域，特别公开了一种人组织激肽释放酶6原核表达载体。该人组织激肽释放酶6原核表达载体，其特征在于：所述载体通过设计引物扩增出组织中的KLK6基因片段用分子克隆的方法将KLK6基因片段克隆至原核表达载体pET28b中进行构建。本发明的表达系统遗传图谱明确，费用低廉，对许多外源蛋白耐受能力强，能高水平的表达蛋白。
组织激肽释放酶表达载体

[发明专利]一种原核表达载体及其构建方法和应用-CN202010102716.8在审
发明人：郭抗抗;赵娣;张亮;张彦明;刘勇 -专利权人：西北农林科技大学
申请日： 2020-02-19 - 公布日： 2020-05-19 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种原核表达载体及其构建方法和应用，属于基因工程技术领域。本发明公开的一种原核表达载体，以pET‑32a为原始载体，在其基础上进行改造；双酶切pET‑32a原核表达载体，并合成两条含rbs序列及分别含有BamHⅠ、EcoRⅠ的酶切位点的单链，退火形成带缺口的双链，进而连入双酶切的pET‑32a原核表达载体，形成仅含单一his标签的原核表达载体pET‑32a‑gai。PCR扩增C蛋白的基因序列，将其连入pET‑32a‑gai原核表达载体形成pET‑32a‑gai‑C原核表达载体。本发明的原核表达载体将在外源小分子蛋白(特别是猪瘟病毒石门株衣壳蛋白C)表达的生产中发挥重要作用。
一种表达载体及其构建方法应用

[发明专利]一种重组胰岛素样生长因子-I的制备方法-CN201210206263.9有效
发明人：王惠生;肖齐世;刘振青;任洪柳;周项 -专利权人：上海普欣生物技术有限公司
申请日： 2012-06-20 - 公布日： 2012-10-17 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种重组胰岛素样生长因子-I的制备方法，先将5’端引入烟草蚀纹病毒蛋白酶识别序列编码基因的胰岛素样生长因子-I的编码基因克隆入原核表达载体，构建成重组原核表达载体；而后将重组原核表达载体转入合适的原核宿主细胞；而后培养原核宿主细胞，表达可溶性含胰岛素样生长因子-I的融合蛋白；最后分离出含胰岛素样生长因子-I的融合蛋白，用烟草蚀纹病毒蛋白酶酶解后，再分离获得重组胰岛素样生长因子-I。本发明制备IGF-I的方法与现有化学裂解法或酵母系统生产相比，表达量高，成本低，有利于大规模生产。
一种重组胰岛素生长因子制备方法

[发明专利]一种PCV2病毒样颗粒及其制备方法和裂解及VLP组装缓冲液-CN201410145870.8有效
发明人：杨毅;雷昕诺;王乃东;邓治邦;湛阳;王爱兵;薛立群;张颜 -专利权人：美国普赛生物高科技有限责任公司;湖南农业大学
申请日： 2014-04-11 - 公布日： 2014-10-01 - 主分类号： C12N7/04 文献下载
摘要：基于自主优化设计，并人工合成适合在原核表达系统中高效表达的PCV2核衣壳蛋白基因，通过大肠杆菌原核表达系统表达PCV2核衣壳蛋白的全长基因序列，并利用其可溶性核衣壳蛋白在特定条件下高效自体组装成了病毒样颗粒本发明创新点主要在于采用不同于常规的真核表达系统获取VLPs方法，而是利用原核表达系统获取PCV2VLPs，本方法成本低廉、简单高效，适合大规模产业化应用；其中还应用到独创的既可以促进菌体裂解又能适合VLPs
一种 pcv2 病毒颗粒及其制备方法裂解 vlp 组装缓冲液

[发明专利]人胱抑素C真核表达载体的构建及其表达、纯化-CN201010213242.0无效
发明人：华权高;沈鹤霄 -专利权人：武汉生之源生物科技有限公司
申请日： 2010-06-30 - 公布日： 2011-05-25 - 主分类号： C12N15/79 文献下载
摘要：本发明公开一种利用真核表达系统进行重组人胱抑素C蛋白表达及其纯化的方法。由于原核表达系统缺少翻译后修饰等机制使得表达纯化后的蛋白与天然蛋白相比具有活性低，结构差异大的缺点，这应该是利用大肠杆菌来源重组胱抑素C蛋白制备的单抗在建立胱抑素C检测试剂遇到困难的主要原因。本方法利用真核表达系统克服了原核表达的缺点获得了高活性的重组人胱抑素C蛋白，为获得高质量抗体提供了有力的基础。
人胱抑素表达载体构建及其纯化

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