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[发明专利]克服牛体外胚胎早期发育阻滞的培养液配制和培养方法-CN201210311808.2无效
发明人：孙永刚;徐惊涛;才让东智;马志杰 -专利权人：青海省畜牧兽医科学院
申请日： 2012-08-29 - 公布日： 2012-11-28 - 主分类号： C12N5/073 文献下载
摘要：本发明提供一种克服牛体外胚胎发育阻滞，提高体外胚胎发育率的培养液制作和培养方法，包括步骤：（a）采集牦牛或黄牛的输卵管；无菌处理后经0.25%胰蛋白酶消化获得输卵管上皮细胞；（b）输卵管上皮细胞用TCM-199培养2—3天；（c）收集输卵管上皮细胞培养液，0.22μm滤器过滤除菌，添加BSA、丙酮酸钠及血清；（d）胚胎培养液分装冷冻保存；（e）胚胎培养液解冻后培养微滴的制作；（f）牦牛和黄牛体外同种受精胚胎
克服体外胚胎早期发育阻滞培养液配制培养方法

[发明专利]一种提高组织工程前板层角膜上皮细胞粘附力的方法-CN202110197135.1在审
发明人：张晋南;王海利;宇咏梅;马百双;甘良波 -专利权人：深圳艾尼尔角膜工程有限公司
申请日： 2021-02-22 - 公布日： 2021-06-11 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明属于组织工程技术领域，提供了一种能够提高组织工程前板层角膜上皮细胞粘附力的方法，包括上皮细胞扩增步骤和前板层角膜构建步骤，所述上皮细胞扩增包括前处理、消化和贴壁培养；所述前板层角膜构建包括涂布、接种和两阶培养本发明通过将涂布液涂布到脱细胞角膜支架材料的前弹力层上，模拟人体角膜上皮细胞与前弹力层之间的基底膜，起到稳固连接上皮细胞与前弹力层的作用，另外利用气液面培养的方法，模拟人体眨眼的环境条件进行组织工程前板层角膜的构建，促进角膜上皮细胞复层化；本发明从以上两个方面保证了含有上皮细胞层的组织工程前板层角膜的临床使用效果。
一种提高组织工程前板层角膜上皮细胞粘附方法

[发明专利]一种视网膜色素上皮细胞的制备方法-CN202311017480.8有效
发明人：刘凡菲 -专利权人：四川大学华西医院
申请日： 2023-08-14 - 公布日： 2023-10-27 - 主分类号： C12N5/079 文献下载
摘要：本发明提供了一种视网膜色素上皮细胞的制备方法，属于细胞生产技术领域。本发明通过设置特定的培养参数、利用特定的诱导培养基，能够成功诱导得到视网膜色素上皮细胞，并克服了现有技术中诱导得到视网膜色素上皮细胞的方案复杂、效率较低等问题。本发明提供的制备方法提高了干细胞分化为视网膜色素上皮细胞的性能，并且还发现了培养过程的早期在低氧条件下培养，并且培养中不使用抗生素更有利于制备视网膜色素上皮细胞，最终得到了一种稳定、高效率、低成本、操作简单的视网膜色素上皮细胞制备方法
一种视网膜色素上皮细胞制备方法

[发明专利]用于改善视力的装置和方法-CN03825056.X无效
发明人： C·J·马莫;A·贝克 -专利权人：眼科科学公司
申请日： 2003-09-02 - 公布日： 2005-11-09 - 主分类号： A61F2/14 文献下载
摘要：放置在眼部(10)的角膜矫正器(60)，它具有透镜(40)和固定在所述透镜上的上皮细胞(70)。所述矫正器的上皮细胞可来自培养的细胞，包括干细胞，如角膜缘干细胞，或上皮细胞系，或者可以包括在它上面放置所述矫正器的眼上皮的至少一部分。所述角膜矫正器可以具有位于所述透镜和所述上皮细胞之间的细胞附着部件，以便有利于所述上皮细胞附着在所述透镜上。预期将角膜矫正器(60)用在去上皮的眼上，所述眼可以是业已全部或部分去上皮的眼。
用于改善视力装置方法

[发明专利]一种脂多糖诱导奶牛乳腺上皮细胞凋亡模型的建立方法-CN201510173219.6在审
发明人：丁月云;殷宗俊;张晓东;孟云;张威;付坤;张梦琦;黄龙;王源朗;朱树娇 -专利权人：安徽农业大学
申请日： 2015-04-13 - 公布日： 2015-07-08 - 主分类号： C12Q1/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导奶牛乳腺上皮细胞凋亡模型的建立方法，包括如下步骤：(1)2-3代奶牛乳腺上皮细胞的获取；(2)CCK-8法检测LPS对奶牛乳腺上皮细胞增殖的抑制作用，初步找出符合建立体外细胞损伤模型细胞凋亡率在40-50％指标要求的LPS作用浓度及作用时间；(3)流式细胞术检测乳腺上皮细胞凋亡率；(4)DNA ladder检测凋亡细胞核酸的变化情况；(5)透射电镜观察乳腺上皮细胞内部形态结构变化；本发明所述的LPS诱导奶牛乳腺上皮细胞凋亡模型诱导条件的测定方法具有效果理想、成本低、操作简便的优点。
一种多糖诱导奶牛乳腺上皮细胞模型建立方法

[发明专利]一种羊膜上皮细胞的分离、纯化方法-CN202210164376.0在审
发明人：张宇;张莉;杜为;周建宇;杨荣婷;房敬超;韩俊领;杨文玲 -专利权人：协和干细胞基因工程有限公司
申请日： 2022-02-22 - 公布日： 2022-09-13 - 主分类号： C12N5/073 文献下载
摘要：本发明公开了一种羊膜上皮细胞的分离、纯化方法，解决现有方法获得P0代羊膜上皮细胞数量少、纯度低的问题，方法主要包括以下步骤：一、胎盘采集运输；二、羊膜上皮细胞分离；三、羊膜上皮细胞纯化，获得大量高纯度P0代羊膜上皮细胞冻存，即完成。本发明在短时间消化这种现有方法基础上增加消化次数，既保证了细胞活率、贴壁率，又能获得更多的细胞；将分离的细胞在铺有基质的培养器材上以合适密度接种进行贴壁纯化，于细胞贴壁完成且未进行扩增前消化收获，获得了SSEA‑4、CD105稳定表达的高纯度P0代羊膜上皮细胞。
一种羊膜上皮细胞分离纯化方法

[发明专利]人呼吸道上皮细胞病原细胞学检测方法及试剂盒-CN202010140935.5在审
发明人：吴纯;宋砚明;刘杨;刘岩;孙晓磊;郭金城;周勤;王超 -专利权人：苏州百道医疗科技有限公司
申请日： 2020-03-03 - 公布日： 2020-07-28 - 主分类号： G01N33/569 文献下载
摘要：本发明涉及人呼吸道上皮细胞病原检测领域，尤其涉及一种人呼吸道上皮细胞病原细胞学检测方法及试剂盒。本发明的方法，包括以下步骤：S1、样品获取：采集人呼吸道上皮细胞，放入细胞保存液中固定；S2、制片：手动或自动将样本添加至载样介质上；S3、孵育：采用免疫细胞化学染色技术和/或显色原位杂交技术孵育样品；S4、阳性样本判断：人工计数识别阳性细胞并输出诊断报告，或者通过计算机扫描后自动计数并输出辅助诊断报告；其克服了现有诊断手段的不足，比如核酸检测中提取样本过程中核酸的损失，提高病毒的检出率，比目前常规使用的核酸检测和
呼吸道上皮细胞病原细胞学检测方法试剂盒

[发明专利]一种小鼠成纤维细胞及其用途-CN201810335862.8有效
发明人：李晖 -专利权人：深圳涌泰生物科技有限公司
申请日： 2018-04-16 - 公布日： 2021-07-06 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明公开了一种小鼠成纤维细胞及其用途。属于细胞生物学领域。该细胞命名为小鼠成纤维细胞MFC/HL‑041，保藏编号为CCTCC NO：C201714。经药物丝裂酶素C或放射线辐照处理后的小鼠成纤维细胞用于正常原代上皮细胞与原代肿瘤细胞的分离和传代培养。由此获得的人肺正常和肺癌的原代上皮细胞在显微镜下观察，状态鲜活，排列紧密、细胞界限清晰、立体感强、多角型的上皮细胞。可用于人或动物正常细胞的生理学研究，体外正常细胞的病毒感染模型，体外正常细胞针对不同药物的药敏检测，以及癌症病人个体化治疗的药物筛选和抗癌新药的研发。
一种小鼠纤维细胞及其用途

[发明专利]一种肾小管上皮原代细胞的提取方法及其应用-CN202310861355.9在审
发明人：成欢;程悦 -专利权人：中国人民解放军西部战区总医院;西南交通大学
申请日： 2023-07-13 - 公布日： 2023-10-27 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本申请涉及细胞提取和培养技术领域，尤其涉及一种肾小管上皮原代细胞的提取方法及其应用；所述方法包括：破碎肾脏皮质，并机械研磨过滤，后离心，得到第一细胞沉淀；向第一细胞沉淀中加入红细胞裂解液，并混合和静置，后离心，得到第二细胞沉淀；向第二细胞沉淀中加入培养液，并混匀，得到培养基；对培养基孵化至细胞贴壁，后换液和培养，得到肾小管上皮原代细胞；机械研磨过滤采用注射器头于滤网中研磨和过滤的方式进行，注射器头的粗糙度Ra为5μm～10μm，注射器头的转速为15r/min～20r/min；该方法中不需加入特定的细胞分离液进行分离，因此可以降低细胞分离的难度并缩短细胞分离所用的时间。
一种肾小管上皮细胞提取方法及其应用

[发明专利]一种鱼类肠道上皮细胞的分离方法-CN201510893962.9有效
发明人：张美玲;刘钰锟;薛敬东 -专利权人：华东师范大学
申请日： 2015-12-07 - 公布日： 2019-03-19 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明公开了一种鱼类肠道上皮细胞分离培养的方法，所述方法包括：鱼类肠道分离清洗；蛋白酶消化组织块；收集细胞，分离酶液与细胞；细胞培养。本发明首次提出了鱼类物肠道上皮细胞培养的可行方法，所述方法具有操作简单、成本低、成功率高、效率高、分离的鱼类肠上皮细胞稳定的特点，解决了肠道上皮细胞易污染的问题。
一种鱼类肠道上皮细胞分离方法

[实用新型]食管上皮细胞提取装置-CN201220071239.4有效
发明人：梁海清 -专利权人：梁海清
申请日： 2012-02-25 - 公布日： 2012-10-24 - 主分类号： A61B10/02 文献下载
摘要：本实用新型涉及食管上皮细胞提取装置，包括探查球、探查孔、充气气囊、刷毛、胶管、外管，其特征在于探查球与外管连接，探查球为空心不锈钢球体，空心不锈钢球体的空腔与外管贯通，探查球的球壁设置有十个贯通球体的探查孔使用方法：探查球吞入食管内，通过胶管向充气气囊加气使其膨胀，充气气囊上的刷毛会突出在探查球的探查孔外，转动探查球，让刷毛刮取一部分上皮细胞组织，通过胶管给充气气囊放气，取出充气气囊后提取刷毛上的组织进行实验
食管上皮细胞提取装置

[发明专利]鉴别从人或动物生物体液中富集的非血源性有核细胞的方法-CN201110340544.9有效
发明人：李彦萍 -专利权人：李彦萍
申请日： 2011-11-01 - 公布日： 2013-05-08 - 主分类号： G01N33/577 文献下载
摘要：本发明提供了一种用于从人的生物体液中将红细胞与非血源性有核细胞进行快速有效分离的方法，该方法不需裂解融破红细胞，不会对人的体液内的靶细胞(如体液中的肿瘤细胞)产生任何影响，从而很好地保持了原有的细胞形态，极为便于后续的细胞识别与判断。本发明还涉及一种鉴别从人或动物生物体液中富集的非血源性有核细胞(如肿瘤细胞，血管上皮细胞等)的方法，其中同步实施抗人白细胞抗体免疫荧光染色以及染色体荧光原位杂交以区别血源性有核细胞，以有效去除在判断肿瘤细胞过程中血源性细胞产生的干扰，从而达到高效快速地从人体液中富集提取并有效鉴别非血源性上皮来源(实体瘤)或非上皮来源(黑色素瘤)的稀有肿瘤细胞。
鉴别动物生物体液富集非血源性有核细胞方法

[发明专利]一种羊膜上皮细胞复合去表皮真皮构建组织工程皮肤的方法-CN201710201645.5在审
发明人：江蕾微;陆洪光;聂瑛洁;盛良;马婷;时光 -专利权人：贵州省人民医院
申请日： 2017-03-30 - 公布日： 2017-08-08 - 主分类号： A61L27/60 文献下载
摘要：本发明公开了一种羊膜上皮细胞复合去表皮真皮构建组织工程皮肤的方法，是以人羊膜上皮细胞(hAECs)作为种子细胞，以人去表皮的真皮组织(De‑epidermized dermis,DED)作为支架材料，将种子细胞种植于支架材料上构建hAECs‑DED组织工程皮肤，包括以下步骤1)hAECs的分离培养；2)成纤维细胞(FB)的分离培养；3)DED的制备；4)hAECs‑DED组织工程皮肤的构建。本发明选择羊膜上皮细胞作为种子细胞，选择人去表皮的真皮组织作为支架，种子细胞和支架均是来自于人体，具有同源性，构建的组织工程皮肤具有与正常皮肤相似的组织结构和功能，还具备正常表皮增殖和分化的某些特征。
一种羊膜上皮细胞复合表皮真皮构建组织工程皮肤方法

[发明专利]白藜芦醇在制备治疗由草甘膦引起的猪乳腺上皮细胞抗氧化功能损伤的药物中的应用-CN202110664116.5在审
发明人：石宝明;姚欣欣 -专利权人：东北农业大学
申请日： 2021-06-16 - 公布日： 2021-10-08 - 主分类号： A61K31/05 文献下载
摘要：本发明公开一种白藜芦醇在制备治疗由草甘膦引起的猪乳腺上皮细胞抗氧化功能损伤的药物中的应用，利用白藜芦醇对草甘膦诱导的猪乳腺上皮细胞损伤进行修复的问题。白藜芦醇可以显著缓解由草甘膦抑制的猪乳腺上皮细胞活力。上调由草甘膦诱导的猪乳腺上皮细胞抗凋亡基因BCL2和BCL‑XL的表达，上调草甘膦引起的猪乳腺上皮细胞中解毒酶GST和GSH基因的表达。本发明公开了白藜芦醇可以减轻草甘膦诱导PMECs细胞的增殖毒性、氧化，具有保护动物乳腺上皮细胞的完整性和健康的优点。
藜芦制备治疗草甘膦引起乳腺上皮细胞氧化功能损伤药物中的应用

[发明专利]鞭毛蛋白抗体在制备防治泌尿系结石及肾损伤的药物中的应用-CN201910942256.7有效
发明人：吴文起;赖永长;吴伟宙;陈东;梁雄发;钟芳灵;黄健;黄亚鹏;张世科;何枝灿 -专利权人：广州医科大学附属第一医院
申请日： 2019-09-30 - 公布日： 2023-08-01 - 主分类号： A61K39/40 文献下载
摘要：本发明首次研究证明了鞭毛蛋白抗体具有抑制晶体的聚集及其对肾小管上皮细胞的粘附的作用，具备治疗泌尿系结石的潜力。
鞭毛蛋白抗体制备防治泌尿系结石损伤药物中的应用