[发明专利]重组人胰岛素前体的酶切转换方法在审
| 申请号： | 202011607271.5 | 申请日： | 2020-12-29 |
| 公开（公告）号： | CN112625116A | 公开（公告）日： | 2021-04-09 |
| 发明（设计）人： | 聂洪霞;刘海峰;黄菁;许波;吕晓林;张金迪;解福生;郝向慧 | 申请（专利权）人： | 华润昂德生物药业有限公司;上海昂德生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/62 | 分类号： | C07K14/62;C12P21/06 |
| 代理公司： | 北京思元知识产权代理事务所(普通合伙) 11598 | 代理人： | 余光军;霍雪梅 |
| 地址： | 252201 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明公开了重组人胰岛素前体的酶切转换方法，包括：(1)将初步纯化的重组人胰岛素前体溶液加入缓冲液进行浓度和pH值的调整得到酶切反应底物混合液；(2)向酶切反应底物混合液中加入重组赖氨酰肽内切酶进行重组人胰岛素前体的酶切转换反应。本发明选择重组赖氨酰肽链内切酶作为工具酶，与常用的重组胰蛋白酶相比，单位前体蛋白所需的酶更少，酶切位点单一，酶切过程更高效，使人胰岛素前体的酶切转换效率达到95％以上；在放大酶切时，没有过酶切的顾虑且酶切后获得的目的蛋白纯度更高；重组赖氨酰肽链内切酶酶切最适pH范围离酶切前后蛋白的pI更远，有利于目的蛋白的稳定且对酶切环境中的盐浓度耐受范围更大。 | ||
| 搜索关键词： | 重组 胰岛素 转换 方法 | ||
【主权项】：
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