[发明专利]一种沙门菌菌蜕疫苗的制备方法及应用在审
申请号: | 202011478059.3 | 申请日: | 2020-12-15 |
公开(公告)号: | CN112587659A | 公开(公告)日: | 2021-04-02 |
发明(设计)人: | 马喆;左庚亮 | 申请(专利权)人: | 南京农业大学 |
主分类号: | A61K39/112 | 分类号: | A61K39/112;A61K47/42;A61P31/04;C12N1/21;G01N33/68;G01N33/569;C12R1/42 |
代理公司: | 上海创开专利代理事务所(普通合伙) 31374 | 代理人: | 吴海燕 |
地址: | 210095 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种沙门菌菌蜕疫苗的制备方法及应用,利用λ‑Red系统制备获得鸡白痢沙门菌pagC基因缺失突变株ΔPagC;取过夜培养的ΔPagC菌液,1:100接种到50ml液体LB培养基中,37℃、180rpm振荡培养至OD值约0.8;4℃,5000rpm离心10min后用无菌的PBS缓冲液洗涤3次,然后用终浓度为50μM的MAP溶液重悬菌体至OD值为0.3,21℃恒温静置16h,4℃、5000rpm离心10min收集菌体,进行灭菌效果检测和核酸残留检测;检测合格后调整剂;与佐剂1:1混合,充分乳化后接种动物。本发明疫苗株接种小鼠后无不良反应,可保护小鼠应对鸡白痢沙门菌CVCC1800、肠炎沙门菌ATCC19585和鼠伤寒沙门菌CVCC542的感染;该疫苗能够能与基于PagC蛋白的沙门菌抗体间接ELISA检测试剂盒联用,实现沙门菌人工免疫和自然感染的鉴别诊断,表现出良好的DIVA特性。 | ||
搜索关键词: | 一种 沙门 菌菌蜕 疫苗 制备 方法 应用 | ||
【主权项】:
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