[发明专利]一种重组EBV gHgL免疫原的制备方法及其应用有效

专利信息
申请号: 202010026943.7 申请日: 2020-01-10
公开(公告)号: CN111154803B 公开(公告)日: 2022-07-22
发明(设计)人: 段良伟;王辉;郑前前;牛玉娜;牛志国;张佳璐;刘梦楠 申请(专利权)人: 新乡医学院
主分类号: C12N15/85 分类号: C12N15/85;C07K14/03;A61K39/245;A61P31/22
代理公司: 北京金智普华知识产权代理有限公司 11401 代理人: 杨采良
地址: 453003 *** 国省代码: 河南;41
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摘要: 发明属于生物医药技术领域,尤其涉及一种重组EBV gHgL免疫原的制备方法及其应用。本发明利用聚合酶链式反应PCR技术,获得gH和gL的基因片段,将这两个目的片段分别克隆入昆虫表达载体pMT,经质粒大提去除内毒素后,与抗性筛选质粒pCoBlast一起共转染黑腹果蝇Schneider2细胞,用杀稻瘟菌素进行阳性克隆筛选,筛选出高效分泌表达gHgL的S2稳定细胞系。扩大培养后,经镍柱亲和层析和凝胶过滤层析两步纯化,即可获得高均一、高产量、高天然保真性的gHgL。通过微量热涌动技术验证了gHgL与受体EphA2的相互作用,适合作为免疫原用于EBV亚单位疫苗以及与gB和gp350联合疫苗的研发。
搜索关键词: 一种 重组 ebv ghgl 免疫原 制备 方法 及其 应用
【主权项】:
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