[发明专利]一种基于沉淀试剂法的细胞上清液外泌体提取工艺在审
| 申请号： | 201911114046.5 | 申请日： | 2019-11-14 |
| 公开（公告）号： | CN110747158A | 公开（公告）日： | 2020-02-04 |
| 发明（设计）人： | 赵凯 | 申请（专利权）人： | 赵凯 |
| 主分类号： | C12N5/00 | 分类号： | C12N5/00 |
| 代理公司： | 11572 北京卓特专利代理事务所(普通合伙) | 代理人： | 段宇 |
| 地址： | 277116 山东省*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明公开了外泌体提取领域的一种基于沉淀试剂法的细胞上清液外泌体提取工艺。本发明通过多次离心与沉淀剂结合方法，先通过离心去除细胞以及细胞碎片，通过滤膜，去除大分子的杂质，提高上清液中外泌体的纯度，通过PEG与外泌体的脂质分子层结合，改变外泌体的溶解度或分散性，使外泌体发生沉淀，离心得到初步外泌体，通过初步外泌体与乙醇与乙醚混合溶液混合，去除初步外泌体中少量的低丰度的蛋白质，得到纯度较高的外泌体，通过链霉亲和素沉淀剂与重悬后的纯度较高的外泌体结合，链霉亲和素沉淀剂中的特异性磁性探针与外泌体结合，离心得到沉淀，进而去除低丰度的蛋白质，进一步提高外泌体的纯度。 | ||
| 搜索关键词： | 沉淀剂 去除 链霉亲和素 低丰度 上清液 蛋白质 沉淀 离心去除细胞 沉淀试剂 磁性探针 多次离心 混合溶液 细胞碎片 脂质分子 层结合 分散性 溶解度 乙醇 滤膜 乙醚 重悬 细胞 | ||
【主权项】：
1.一种基于沉淀试剂法的细胞上清液外泌体提取工艺，其特征在于：包括如下步骤：/nS1、将需提取外泌体的细胞放入培养基中，在36～38℃、3～6％CO
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