[发明专利]一种苗药黑骨藤HPLC指纹图谱研究及多成分含量测定方法

摘要

本发明公开了一种苗药黑骨藤HPLC指纹图谱研究及多成分含量测定方法。采用HPLC法建立不同产地黑骨藤指纹图谱，并测定其中4种咖啡酰基奎宁酸类化学成分含量，为黑骨藤药材品质评价提供依据；色谱柱为Xtimate C18(4.6mmx250mm,5μm)；以0.1％磷酸水溶液(A)‑乙腈(B)为流动相，梯度洗脱；流速1mL/min；柱温30℃；进样量10μL，检测波长为330nm；使用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)对样品进行相似度分析，通过黑骨藤HPLC指纹图谱与含量测定，能同时测定4种咖啡酰基奎宁酸类化学成分含量，不同产地之间该4种成分有较大的差异，各成分含量与产地有一定的关联为后期苗药黑骨藤质量标准研究奠定基础。

主权项

1.一种苗药黑骨藤HPLC指纹图谱研究及多成分含量测定方法，其特征在于：包括有以下步骤：/na、供试品溶液的制备：将黑骨藤粉碎过筛，粉末置干燥器中保存，精密称取黑骨藤粉末1.000g，置50mL具塞锥形瓶中，加入50％甲醇20mL，称定重量，超声提取30min，待冷却至室温后，用50％甲醇补足超声过程中损失的重量，摇匀，过0.22μm微孔滤膜，取续滤液，即得；/nb、对照品溶液的制备：分别精密称取新绿原酸5.00mg、绿原酸5.04mg、隐绿原酸5.00mg、异绿原酸C 5.03mg，分别置于5mL的容量瓶中，以0.1％的磷酸水和乙腈溶液使之充分溶解，定容，配制成浓度分别为新绿原酸1.00mg/mL、绿原酸1.008mg/mL、隐绿原酸1.00mg/mL、异绿原酸C1.006mg/mL的对照品溶液，备用；/n混合对照品溶液的配制：分别精密量取2mL的新绿原酸对照品溶液、5mL的绿原酸对照品溶液、2mL的隐绿原酸对照品溶液、2mL的异绿原酸C对照品溶液置于25mL容量瓶中，用75％的甲醇定容至刻度线，则混合对照品中4种成分的浓度分别为：新绿原酸0.08mg/mL、绿原酸0.2016mg/mL、隐绿原酸0.08mg/mL、异绿原酸C 0.0805mg/mL；/nc、将供试品溶液和混合对照品溶液分别进行液相色谱进样测定，将色谱对比后，并分别计算出试品溶液中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸和异绿原酸的含量；/nd、将供试品溶液按进行梯度洗脱，记录HPLC色谱图，并导入《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2012)软件，计算相似度。/n